陶愛群
(湖南環境生物職業技術學院,湖南 衡陽421005)
中秋酥脆棗是新豐果業有限公司從祁東糖棗中選育出的極適宜南方高溫多濕氣候的高檔鮮棗新品種,是湖南省內第一個綜合性狀優良的高檔鮮食棗品種。2013年,該品種被認證為國家地理標志產品。因其產量高、品質好、抗性強、適應性廣,深受農戶喜愛[1]。其種苗生產一直采用傳統的嫁接方式培育,耗時費力,產苗效益也不高。為了能在短期內大量生產中秋酥脆棗樹苗,節約生產成本,研究在中秋酥脆棗組培技術的基礎上,探索影響組培苗生根和移栽的因素,以期為高品質棗樹苗的生產提供依據。
以中秋酥脆棗為試材,所用組培苗已繼代繁殖10~15 代,繼代培養基[2]為MS(改良)+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L+瓊脂6.5~7.5 g/L+蔗糖30 g/L。
1.2.1 IBA 濃度對中秋酥脆棗組培苗生根的影響從繼代培養的組培苗中選取生長結實、枝葉濃綠、長勢較整齊的不定芽,剪取2~3 cm 的帶頂芽莖段,接種于含1/2 MS(改良)+蔗糖15 g/L+瓊脂6.5 g/L+IBA 的培養基中進行生根培養,IBA 濃度設定為0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 mg/L 6個濃度梯度,每個梯度為1個處理。
1.2.2 培養方式對中秋酥脆棗組培苗生根的影響對將要生根的組培苗帶頂芽莖段進行以下4種處理:處理1,為直接光照培養;處理2,先暗培養7 d 再進行光照培養;處理3,用不透明紙對培養基底部遮光;處理4,在培養基中添加5 g/L 的活性碳進行光照培養。
1.2.3 煉苗方式對中秋酥脆棗組培苗生根的影響煉苗均在溫室中進行,設置7個處理,分別為:處理1,照光開口煉苗3 d;處理2,自然光開口煉苗3 d;處理3,自然光閉口煉苗3 d 后開口煉苗3 d;處理4,自然光閉口煉苗3 d 后開口煉苗4 d;處理5,自然光閉口煉苗6 d 后開口煉苗3 d,處理6,自然光閉口煉苗6 d后開口煉苗4 d;處理7(CK),不煉苗。煉苗后,各處理小苗均移栽至腐殖土和河沙比例為1︰1 的基質中繼續培養。
1.2.4 培養基質對中秋酥脆棗組培苗的影響 以自然光開口煉苗3 d 的組培苗為材料,設計5種基質,分別為:處理1,珍珠巖和腐殖土(1︰1);處理2,蛭石和腐殖土(1︰1);處理3,純蛭石;處理4,細沙和腐殖土(l︰l),處理5,紫色土。
1.2.5 基質處理方式對中秋酥脆棗組培苗的影響以沙子和腐殖土(l︰l)作基質,設計4種處理方式,分別為:處理1,按基質重量噴灑體積分數0.3%的高錳酸鉀溶液25 g/kg;處理2,按基質重量攪拌50%的可濕性粉劑多菌靈5 g/kg;處理3,蒸汽高壓滅菌60 min;處理4(CK),不消毒。
以上每個處理樣本均超過40個,設兩次重復,處理后于室內繼續培養,培養條件:光照周期L︰D=16︰8,光照強度1 500 Lx,溫度25~26℃,相對濕度≥80%。處理30 d 后調查并統計中秋酥脆棗組培苗的生根或移栽成活情況,試驗數據用SASS 軟件進行數據分析。
把生長較整齊的不定芽接種于含不同濃度IBA的培養基中培養一段時間,不定芽基部開始出現愈傷組織,再培養一段時間,愈傷組織中開始出現不定根,但不同培養基中愈傷組織的大小有差別,表現出IBA濃度越低,愈傷組織越小的趨勢。同時,不同濃度IBA處理,其生根率、生根量和平均根長表現出一定差異,見表1。

表1 不同IBA 濃度對中秋酥脆棗組培苗生根的影響
從表1 中可以看出,不同IBA 濃度對愈傷組織生根率的差異均達顯著水平,其中以2.0 mg/L 的處理平均生根率最高,達85%。IBA 濃度在1.5~2.5 mg/L 時,平均生根條數差異不顯著,但顯著多于其他處理。根長亦表現出隨IBA 濃度增加而增長的趨勢。綜合考慮3個指標,認為中秋酥脆棗組培苗生根培養基中添加2.0 mg/L 的IBA 最為適宜。
從表2 中可以看出,處理3 和處理4 的平均生根率、平均生根數及平均根長均顯著優于處理1 和處理2,而處理3 和處理4、處理1 和處理2 之間差異不顯著。由此可見,培養基底部遮光或在培養基中添加活性碳有利于中秋酥脆棗組培苗生根,在實際工作中,為了減輕工作量,提高工作效率,認為在中秋酥脆棗生根時可以采用不透明紙遮光處理以促進其生根。

表2 不同培養方式對中秋酥脆棗組培苗生根的影響
由表3 可知,除對照以外,各處理間的移栽成活率并無顯著差異,表明移栽前煉苗有利于提高組培苗的移栽成活率。采取不同煉苗方式,組培苗移栽后的生長狀況不同,以處理5 和處理6(自然光閉口煉苗6 d 后開口3d 和4d)的生長狀況最好,葉色墨綠,葉片大,莖桿粗壯。雖然處理5 和處理6 的成活率不存在顯著差異,生長狀況基本一致,但開口煉苗到第4 d時,培養瓶內開始出現少量細菌,對組培苗的生長產生不良影響,因此中秋酥脆棗的煉苗以在培養架上自然光閉口鍛煉6 d 再開口3 d 為宜。

表3 不同煉苗方式對中秋酥脆棗組培苗移栽的影響
從表4 中可以看出,長度為2.1 cm 左右的中秋酥脆棗組培苗經自然光閉口煉苗3 d 后,移栽到不同的基質中,成活率以細沙和腐殖土(處理4)基質的最高,為88.75%,其次為珍珠巖和腐殖土(處理1)基質,兩者之間差異不顯著;蛭石和腐殖土(處理2)、紫色土(處理5)這兩種基質的移栽成活率稍低,與處理1 差異不顯著;而純蛭石(處理3)為基質時,中秋酥脆棗組培苗的移栽成活率明顯低于其他4種基質,且差異顯著。移栽30 d 后,統計苗木的增長高度時發現,剛移栽時苗木的平均高差異不顯著,但30 d 后在純蛭石基質中的苗木平均增長高度遠遠低于其他4種基質。

表4 不同培養基質對中秋酥脆棗組培苗的影響
試驗結果顯示,基質經過消毒滅菌處理后,組培苗的成活率得到顯著提高,處理1~處理3 的成活率分別為82.25%、87.50%和92.50%,分別比對照處理(72.25%)高14.00、15.25、20.25個百分點,其中以處理3(蒸汽高壓滅菌60 m in)的成活率最高,處理1(0.3%高錳酸鉀溶液)和處理2(50%可濕性粉劑多菌靈)次之。
試驗結果表明,2~3 cm 長的中秋酥脆棗度不定芽接種于1/2MS(改良)+IBA 2.0 mg/L+蔗糖15 g/L+瓊脂6.5 g/L 的培養基中,生根情況較理想,生根率較高,生根量較大,根較長;用不透明紙對培養基底部進行遮光處理,可明顯促進生根。以自然光閉口煉苗6 d再開口培養3 d 的方式煉苗,組培苗的移栽成活率較高,移栽苗生長狀況較好;生根基質則以細沙和腐殖土以1︰1 的比例混合較為適宜,使用前基質可用蒸汽高壓滅菌60 m in,有利于組培苗的成活。
為了提高中秋酥脆棗組培苗的適應力和移栽成活率,中秋酥脆棗組培苗移栽前必須進行生根培養,使組培苗在移栽前生出濃密而粗壯的不定根。其生根率的高低除材料差異外,還受基本培養基、生長調節物質、光照等條件的影響。研究表明,其他棗品種可以在H、B5、Wpm、White 和MS 等[3-5]基本培養基上生根,生根率無差異,但生根數量和根生長量不同。中秋酥脆棗在改良的1/2 MS 基本培養基上能再生出不定根,在其他基本培養基表現如何有待進一步研究證實。在培養基中添加不同濃度的IAA、NAA,尤其是IBA,有利于誘導棗不定梢生根[6-9],愈傷組織少則有利于移栽。亦有研究表明,適當的損傷有利于棗不定芽生根。該試驗結果表明,用IBA 誘導中秋酥脆棗不定芽生根,生根率較高,但愈傷組織較多。而IAA 對于中秋酥脆棗棗頭芽誘導的不定梢是否有同樣效果有待進一步研究。
組培苗煉苗的目的是使組培苗逐步適應外界的環境。可讓組培苗先適應溫度變化,再適應多菌的環境,在進行前兩者適應鍛煉的同時可進行光照適應性鍛煉。煉苗的基本程序與其他組織培養相差無幾。研究表明,組培苗煉苗時間長短與開口后培養基上不長菌時間長短、前期閉口煉苗時間的長短、前期光照適應性煉苗方法以及濕度適應方法等諸多因素有關[10]。該研究采用溫室自然光閉口煉苗后再開口煉苗的方法進行煉苗,可顯著提高組培苗的移栽成活率。試驗結果還顯示,不同煉苗方法之間成活率差異并不顯著,但對移栽后組培苗的生長產生影響,說明在同樣的溫、濕度條件下,一定時間變化的光照條件可以鍛煉組培苗的光照適應性,更好地適應外界環境。但無論采用何種方法煉苗,其時間應以培養基不受污染為前提[11-12]。
培育粗壯、濃密的優質根系是提高中秋酥脆棗組培苗移栽成活率的基礎,為了得到質優、量多的中秋酥脆棗苗,煉苗過程還應該考慮移栽方法、移栽基質以及基質處理方式。目前棗組培苗移栽方式常用過渡移栽[13]和基質沙土分層移栽,且成活率均較高。本試驗采用過渡移栽法移栽中秋酥脆棗其成活率可達到快繁要求。選用基質時要求基質既透氣又具有一定的保水保肥性,棗快繁時選用河沙、爐渣、碳化殼等作移栽基質成活率較高[14-15]。試驗中以細沙和腐殖土作基質的成活率最高,紫色土作基質的組培苗成活率低于含腐殖土基質。選用紫色土作基質,是由于中秋酥脆棗目前在紫色土分布區有較大面積推廣,同時紫色土較疏松,用紫色土與其他基質配合對中秋酥脆棗移栽成活率的影響還需進一步研究。
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