消油劑與120 #燃料油對馬糞海膽(Hemicentrotus pulcherrimus) 抗氧化酶活性的影響

段美娜，楊柏林，丁光輝，熊德琪,*

1. 大連海事大學，大連 116026 2. 東北大學秦皇島分校，秦皇島 066004

消油劑與120 #燃料油對馬糞海膽(Hemicentrotus pulcherrimus) 抗氧化酶活性的影響

段美娜1，楊柏林2，丁光輝1，熊德琪1,*

1. 大連海事大學，大連 116026 2. 東北大學秦皇島分校，秦皇島 066004

在溢油事故應急處置中，消油劑的使用備受爭議。為探究消油劑和溢油對海洋底棲模式生物海膽(Hemicentrotus pulcherrimus )復合毒性效應，通過WAFs(Water-accommodated fractions)和CEWAFs(Chemically enhanced water-accommodated fractions)的96 h暴露實驗，測定海膽腸和性腺中過氧化氫酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽硫轉移酶(GST)、谷胱甘肽過氧化物酶(GPx)活性的變化。實驗結果表明：隨油水配比濃度的增加，4種酶活性呈現(xiàn)先升高后降低趨勢，且酶活性峰值均極顯著高于海水對照組水平(P < 0.01)。腸中4種酶活性最大誘導倍數(shù)均高于性腺。相同暴露濃度下，CEWAFs組4種酶活性誘導程度均高于WAFs組。消油劑對照組和海水對照組間4種酶活性則無顯著性差異( P > 0.05)。

消油劑；120 #燃料油；馬糞海膽；抗氧化酶活性

近年來海上溢油事故頻發(fā)，造成嚴重的海洋污染。消油劑由于可以有效去除海面的大面積溢油而被廣泛應用在溢油事故中，但是消油劑的加入對石油烴毒性效應的影響尚未得到明確的結論。有研究證明消油劑的加入會引起水體中總石油烴濃度升高，增強原油對海水青鳉魚(Oryzias melastigma)的毒害作用[1]。對端足目動物(Allorchestes compressa)和蝸牛(Polinices conicus)的半致死濃度測定中，發(fā)現(xiàn)消油劑的投入增強了石油對生物的毒性效應[2]。對薄嘴鯔幼魚(Liza aurata)的研究表明，相比未處理的溢油，經消油劑分散的溢油使幼魚致死率更高[3]。然而也有一些學者認為溢油分散劑會使石油對生物毒性效應降低。例如：對糠蝦(Americamysis bahia)的96 h半致死濃度測定結果表明經消油劑分散后溢油急性毒性效應有所降低[4]；有研究得到原油和經消油劑分散后的原油對章魚(Octopus pallidus)魚卵孵化的48 h半抑制濃度分別為0.39 mg·L-1、1.83 mg·L-1[5]。因此，對于消油劑與石油的復合毒性效應亟待深入研究。

本研究以馬糞海膽(Hemicentrotus pulcherrimus)為受試生物。海膽作為底棲模式生物已被廣泛用作海洋環(huán)境污染指示生物。有研究證明消油劑中的表面活性劑對石油烴，尤其是石油烴中的有毒組分—多環(huán)芳烴(PAHs, polycyclic aromatic hydrocarbons)具有增溶作用，并且消油劑會加強沉積物對PAHs的吸附率，這會直接影響海洋底棲生物生存環(huán)境[6]。

本文通過對海膽抗氧化酶活性的測定，研究消油劑與石油對海洋生物的復合毒性效應。測試指標為：過氧化氫酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽硫轉移酶(GST)、谷胱甘肽過氧化物酶(GPx)。前人研究表明，這4種酶作為生物體內抗氧化系統(tǒng)的一部分，對污染物脅迫十分敏感，石油污染會引起它們的氧化應激反應，因此認為它們適用于本研究[7-11]。

本實驗采用我國船舶常用燃料油120 #和經中國海事局認可的消油劑，從生化反應水平考察消油劑和溢油對底棲模式生物海膽的復合毒性效應。為消油劑的海洋生態(tài)安全性評估及其使用管理以及適于海底石油污染早期預警生物標志物的尋求提供依據(jù)。

1　材料與方法(Materials and methods)

1.1實驗材料

120 #船舶燃料油：由大連海事局提供，由減粘渣油與一定比例的柴油調和而成，運動粘度低于120 mm2·s-1，直鏈烷烴占36.38%，芳香烴占32.91%。

消油劑：白靈牌“919”型，由鎮(zhèn)江百靈化學品有限公司生產，是中國海事局認可的消油劑產品，屬于非離子型表面活性劑、常規(guī)型，主要由脂肪烴溶劑和表面活性劑組成。

實驗用海水：取自大連市星海灣，經過沉淀，過濾并煮沸15 min后用于實驗。pH值為8.13，鹽度31.35，電導率47 300 μS·cm-1。

本文受試生物為馬糞海膽(Hemicentrotus pulcherrimus)，購自大連海寶漁業(yè)有限公司。選取直徑(7.0±0.5) cm、體重(70.0±3.2) g的海膽，實驗溫度控制在(18±2) ℃，暫養(yǎng)1周后選取健康、反應靈敏個體進行實驗。

1.2實驗方法

實驗設定油水配比濃度為2、4、6、8和10 g·L-1(預實驗確定濃度)。磁力攪拌器進行恒速攪拌24 h(控制渦度為液面高度的25%～30%)，靜置4 h，分離下層水相即為分散液(WAFs, water-accommodated fractions)。

在WAFs濃度設定基礎上加入投油量20%(體積比)的消油劑(預實驗確定消油劑投入量)，其他條件與配制WAFs相同。分離下層水相即為乳化液(CEWAFs, chemically enhanced water-accommodated fractions)。將WAFs、CEWAFs置于4 ℃環(huán)境中避光保存。以往實驗單純將WAFs和CEWAFs稀釋到相同總石油烴(TPH, total petroleum hydrocarbon)濃度考慮其對生物的毒性效應，而完全忽略了溢油分散劑使單位體積內的石油烴濃度增大的事實，本研究考慮石油烴總負荷計量作為整體，控制相同的油水配比濃度更能直接說明消油劑投加后石油烴對生物毒性效應變化的程度[3]。

TPH濃度測定方法：移液槍吸取待測水樣5 mL置于100 mL分液漏斗中，量筒量取四氯化碳25 mL移至分液漏斗中，均勻振蕩3 min(隨時打開閥門排氣)，靜置10 min，將下層有機相移出至錐形瓶中，封口。再量取四氯化碳25 mL并移至分液漏斗中與剩余的上層水樣繼續(xù)混合，并重復上述步驟。待分層后，將下層有機相轉移至錐形瓶中。向錐形瓶中加入無水硫酸鈉并震蕩，至無水硫酸鈉粉末全部結晶成塊，濾紙過濾收集至石英玻璃皿中，使用紅外分光光度儀測定石油濃度，每次萃取設置3個平行組。

暴露時間為96 h。實驗分為3組進行，1為對照組，包括海水對照組和消油劑對照組，其中，消油劑對照組中消油劑濃度為2 g·L-1；2為WAFs組；3為CEWAFs組。并設置3個平行組。海膽置于32 cm×16 cm×23 cm玻璃缸避光充氧暴露，暴露溶液總體積2 000 mL。每48 h換受試液，并投入一定餌料。

解剖暴露96 h的海膽，取得組織塊，經過預冷生理鹽水漂洗去除體液、血液，濾紙擦干稱取0.1 g置于10 mL燒杯中。取質量分數(shù)為0.86%的生理鹽水0.9 g置于燒杯中，醫(yī)用剪刀剪碎組織(冰上操作)，并用超聲粉碎機粉碎。超聲波發(fā)生器參數(shù)設定為400 W，破碎5 s，間歇10 s，反復5次。再將10%組織勻漿低溫高速離心，2 000 r·min-1離心10 min，取上清液置于4 ℃環(huán)境中保存。4種酶(CAT、SOD、GST和GPx)活性及蛋白質(考馬斯亮蘭法)測定均按照試劑盒方法進行。試劑盒購自南京建成生物工程研究所。

1.3數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析

所有數(shù)據(jù)均以3個平行組數(shù)據(jù)的平均值±標準差(Means±SD)表示，并采用SPSS 16.0數(shù)據(jù)分析軟件，對數(shù)據(jù)進行單因素方差分析，P < 0.05表示差異顯著；P < 0.01表示差異極顯著。

誘導倍數(shù)= Ni/N

公式中：Ni為實驗組受誘導后酶活性；N為海水對照組酶活性。

2　結果(Results)

2.1TPH濃度

不同油水配比對應TPH濃度如表1所示。

表1　不同油水配比對應總石油烴(TPH)濃度

注：WAFs代表分散液；CEWAFs代表乳化液。

Note: WAFs stands for water-accommodated fraction; CEWAFs stands for chemically enhanced water-accommodated fractions.

2.2消油劑對海膽2種組織中4種酶活性的影響

2 g·L-1的消油劑溶液對海膽2種組織中4種酶活性的影響結果如圖1所示。海水對照組與消油劑對照組中的海膽酶活性無顯著差異(P > 0.05)，表明2 g·L-1的消油劑溶液對海膽不同組織4種酶活性無明顯影響。因此，以下分析WAFs和CEWAFs對海膽2種組織中4種酶活性影響時，選取海水對照組作為空白對照組(CK, control check)。

2.3WAFs和CEWAFs對海膽2種組織CAT活性的影響

不同濃度120 #燃料油WAFs和CEWAFs對海膽腸和性腺組織的CAT活性影響結果如圖2所示。海膽腸中CAT活性隨暴露濃度增加呈先上升后下降趨勢，并且相同暴露濃度下，CEWAFs組中CAT活性誘導程度均高于WAFs組。2 g·L-1WAFs組CAT活性即受到顯著誘導(P < 0.05)，CAT活性隨濃度增加而繼續(xù)增加，在6 g·L-1WAFs組達到峰值，此時CAT活性為CK組的1.98倍，且極顯著高于CK組水平(P < 0.01)，隨后CAT活性下降，在10 g·L-1WAFs組達到最低值，此時CAT活性低于CK組(P > 0.05)。2 g·L-1CEWAFs組CAT活性即受到極顯著誘導(P < 0.01)，在6 g·L-1CEWAFs組達到峰值，此時CAT活性為CK組的2.50倍，且極顯著高于CK組水平(P < 0.01)，在10 g·L-1CEWAFs組達到最低值，此時CAT活性低于CK組(P > 0.05)。海膽性腺中CAT活性隨暴露濃度增加呈先上升后下降趨勢，并且相同暴露濃度下，CEWAFs組中CAT活性誘導程度均高于WAFs組。6 g·L-1WAFs組CAT活性受到極顯著誘導(P < 0.01)，在8 g·L-1WAFs組達到峰值(P < 0.01)，此時CAT活性為CK組的1.96倍，在10 g·L-1WAFs組達到最低值，此時CAT活性低于CK組(P > 0.05)。4 g·L-1CEWAFs組CAT活性受到顯著誘導(P < 0.05)，在6 g·L-1CEWAFs組達到峰值(P < 0.01)，此時CAT活性為CK組的2.34倍，在10 g·L-1CEWAFs組達到最低值，此時CAT活性低于CK組(P > 0.05)。

圖1　消油劑對海膽抗氧化酶活性的影響(A：腸；B：性腺)Fig. 1　Effects of dispersant on antioxidant enzyme activities in sea urchins (A: Intestine; B: Gonad)

圖2　WAFs和CEWAFs對海膽CAT活性的影響(A：腸；B：性腺)Fig. 2　Effects of WAFs and CEWAFs on CAT activities in sea urchins (A: Intestine; B: Gonad)

2.4WAFs和CEWAFs對海膽2種組織SOD活性的影響

不同濃度120 #燃料油WAFs和CEWAFs對海膽腸和性腺組織的SOD活性影響結果如圖3所示。海膽腸和性腺中SOD活性隨暴露濃度增加呈先上升后下降趨勢，并且相同組織相同暴露濃度下，CEWAFs組中SOD活性誘導程度均高于WAFs組。海膽腸和性腺中，2 g·L-1WAFs組中SOD活性即受到顯著誘導(P < 0.05)，SOD活性隨濃度增加而繼續(xù)增加，在6 g·L-1WAFs組達到峰值，此時腸中SOD活性為CK組的2.56倍，性腺中SOD活性為CK組的1.50倍，且均極顯著高于CK組水平(P < 0.01)，隨后SOD活性下降，在10 g·L-1WAFs組達到最低值，此時SOD活性均低于CK組(P > 0.05)。海膽腸和性腺中，2 g·L-1CEWAFs組SOD活性即受到極顯著誘導(P < 0.01)，在6 g·L-1CEWAFs組達到峰值，此時腸中SOD活性為CK組的3.14倍，性腺中SOD活性為CK組的1.76倍，且均極顯著高于CK組水平(P < 0.01)，在10 g·L-1CEWAFs組達到最低值，此時SOD活性低于CK組(P > 0.05)。

2.5WAFs和CEWAFs對海膽2種組織GST活性的影響

不同濃度120 #燃料油WAFs和CEWAFs對海膽腸和性腺組織的GST活性影響實驗結果如圖4所示。海膽腸和性腺中GST活性隨暴露濃度增加呈先上升后下降趨勢，并且相同組織相同暴露濃度下，CEWAFs組中GST活性誘導程度均高于WAFs組。海膽腸中，4 g·L-1WAFs組GST活性受到顯著誘導(P < 0.05)，GST活性隨濃度增加而繼續(xù)增加，在8 g·L-1WAFs組達到峰值，此時GST活性為CK組的1.52倍，且極顯著高于CK組水平(P < 0.01)，隨后GST活性下降，在10 g·L-1WAFs組達到最低值，此時GST活性低于CK組(P > 0.05)。2 g·L-1CEWAFs組GST活性即受到極顯著誘導(P < 0.01)，在6 g·L-1CEWAFs組達到峰值，此時GST活性為CK組的1.76倍，且極顯著高于CK組水平(P < 0.01)，在10 g·L-1CEWAFs組達到最低值，此時GST活性低于CK組(P > 0.05)。海膽性腺中，6 g·L-1WAFs組GST活性受到顯著誘導(P < 0.05)，在8 g·L-1WAFs組達到峰值(P < 0.01)，此時GST活性為CK組的1.41倍，在10 g·L-1WAFs組達到最低值，此時GST活性低于CK組(P > 0.05)。4 g·L-1CEWAFs組GST活性受到顯著誘導(P < 0.05)，在6 g·L-1CEWAFs組達到峰值(P < 0.01)，此時GST活性為CK組的1.53倍，在10 g·L-1CEWAFs組達到最低值，此時GST活性低于CK組(P > 0.05)。

2.6WAFs和CEWAFs對海膽2種組織GPx活性的影響

不同濃度120 #燃料油WAFs和CEWAFs對海膽腸和性腺組織的GPx活性影響實驗結果如圖5所示。海膽腸和性腺中GPx活性隨暴露濃度增加呈先上升后下降趨勢，并且相同組織相同暴露濃度下，CEWAFs組中GPx活性誘導程度均高于WAFs組。海膽腸中，2 g·L-1WAFs組GPx活性受到極顯著誘導(P < 0.01)，GPx活性隨濃度增加而繼續(xù)增加，在6 g·L-1WAFs組達到峰值，此時GPx活性為CK組的3.37倍，且極顯著高于CK組水平(P < 0.01)，隨后GPx活性下降，在10 g·L-1WAFs組達到最低值，此時GPx活性低于CK組(P > 0.05)。2 g·L-1CEWAFs組GPx活性即受到極顯著誘導(P < 0.01)，在6 g·L-1CEWAFs組達到峰值，此時GPx活性為CK組的4.07倍，且極顯著高于CK組水平(P < 0.01)，在10 g·L-1CEWAFs組達到最低值，此時GPx活性低于CK組(P > 0.05)。海膽性腺中，4 g·L-1WAFs組GPx活性受到極顯著誘導(P < 0.01)，在8 g·L-1WAFs組達到峰值(P < 0.01)，此時GPx活性為CK組的1.76倍，在10 g·L-1WAFs組達到最低值，此時GPx活性低于CK組(P > 0.05)。2 g·L-1CEWAFs組GPx活性受到顯著誘導(P < 0.05)，在8 g·L-1CEWAFs組達到峰值(P < 0.01)，此時GPx活性為CK組的1.92倍，在10 g·L-1CEWAFs組達到最低值，此時GPx活性低于CK組(P > 0.05)。

圖3　WAFs和CEWAFs對海膽SOD活性的影響(A：腸；B：性腺)Fig. 3　Effects of WAFs and CEWAFs on SOD activities in sea urchins (A: Intestine; B: Gonad)

圖4　WAFs和CEWAFs對海膽GST活性的影響(A：腸；B：性腺)Fig. 4　Effects of WAFs and CEWAFs on GST activities in sea urchins (A: Intestine; B: Gonad)

2.74種酶的最大誘導倍數(shù)

現(xiàn)將WAFs組和CEWAFs組海膽腸和性腺中4種酶活性的最大誘導倍數(shù)及其對應濃度列入表2。

通過對比不同暴露條件下海膽2種組織中4種抗氧化酶的最大誘導倍數(shù)及其對應濃度，發(fā)現(xiàn)性腺中CAT和SOD活性的CEWAFs組最大誘導倍數(shù)顯著高于(P < 0.05)WAFs組，腸中CAT、SOD、GST和GPx活性的CEWAFs組最大誘導倍數(shù)均顯著高于(P < 0.05)WAFs組，這表明CEWAFs對海膽的毒性效應大于WAFs。并且WAFs組，腸中SOD和GPx活性最大誘導倍數(shù)極顯著高于(P < 0.01)性腺；CEWAFs組，腸中SOD和GPx活性最大誘導倍數(shù)極顯著高于(P < 0.01)性腺，腸中GST活性誘導倍數(shù)顯著高于(P < 0.05)性腺。這表明，WAFs組腸中的SOD和GPx較性腺中的敏感；加入消油劑的CEWAFs組，腸中的SOD、GST和GPx較性腺中的更敏感。

圖5　WAFs和CEWAFs對海膽GPx活性的影響(A：腸；B：性腺)Fig. 5　Effects of WAFs and CEWAFs on GPx activities in sea urchins (A: Intestine; B: Gonad)

表2　WAFs組和CEWAFs組4種酶的最大誘導倍數(shù)

注：1) “a”表示對CEWAFs組數(shù)據(jù)和WAFs組數(shù)據(jù)進行單因素方差分析結果表明差異顯著(P < 0.05)，“aa”表明差異極顯著(P < 0.01)；2) “b”表示對性腺組數(shù)據(jù)和腸組數(shù)據(jù)進行單因素方差分析結果表明差異顯著(P < 0.05)，“bb”表明差異極顯著(P < 0.01)。

Note:1) For WAFs and CEWAFs exposure treatments, “a” indicates a significant difference (P < 0.05), “aa” indicates an extremely significant difference (P < 0.01); 2) For gonad and intestine, “b” indicates a significant difference (P < 0.05), “bb” indicates an extremely significant difference (P < 0.01).

3　討論(Discussion)

120 #燃料油WAFs和CEWAFs對海膽腸和性腺中4種酶活性均產生明顯誘導作用。在對紫貽貝(Mytilus galloprovincialis)、牡蠣(Ostrea edulis; Crassostrea gigas)、菲律賓蛤仔(Tapes semidecussata)、毛蚶(Scapharca subcrenata)和中間球海膽(Strongylocentrotus intermedius)的研究中曾經得出相似的結論[12-16]。這種誘導作用與海膽體內的自由基有關。受到外界污染物的干擾情況下，生物體內自由基會過量生成，會導致生物體內自由基產生和消除嚴重失衡從而對生物體產生損傷。而抗氧化酶在受到石油烴代謝產生的氧化壓力時活性受到誘導[17]，是生物體應對外源污染物引起氧化壓力的一種自我保護調節(jié)機制[9]。

海膽腸和性腺中4種酶活性隨著油水配比濃度增大而基本呈現(xiàn)低濃度誘導高濃度抑制趨勢。這一趨勢與之前對菲律賓蛤仔、毛蚶和蝦夷馬糞海膽(Strongylocentyotus internedius)的研究相似[18-20]。在高濃度石油烴污染條件下，一些海洋生物體內抗氧化酶活性會降低[21-23]。本研究馬糞海膽暴露于5組不同濃度燃料油中，出現(xiàn)了酶活性低濃度誘導高濃度抑制的現(xiàn)象，說明在實驗暴露條件下海膽體內產生了大量的活性氧，并且這種氧化壓力隨著多環(huán)芳烴濃度的增加而增強，當超過一定的濃度值時，海膽對污染物產生的氧化壓力的調節(jié)能力不能維持體內正常平衡，就會對機體產生毒害作用。

對比WAFs組和CEWAFs組，海膽2種組織中4種酶活性最大誘導倍數(shù)對應濃度：首先在性腺中SOD和GPx活性在WAFs組和CEWAFs組的最大誘導倍數(shù)對應濃度相同，而CAT和GST活性在CEWAFs組的最大誘導倍數(shù)對應濃度低于WAFs組，說明性腺中CAT和GST更適合作為監(jiān)測消油劑處理溢油造成的海洋污染的生物標志物；在腸中WAFs組和CEWAFs組的CAT、SOD和GPx活性最大誘導倍數(shù)對應濃度相同，而CEWAFs組GST活性最大誘導倍數(shù)對應濃度低于WAFs組，表明腸中GST更適合作為監(jiān)測消油劑處理溢油引起的海洋污染的生物標志物。

對比海膽2種組織中4種酶活性最大誘導倍數(shù)，發(fā)現(xiàn)在腸中的4種酶活性最大誘導倍數(shù)均高于性腺，其中WAFs組和CEWAFs組腸中SOD和GPx活性的最大誘導倍數(shù)極顯著高于(P < 0.01)性腺，并且CEWAFs組腸GST活性最大誘導倍數(shù)顯著高于(P < 0.05)性腺，說明海膽腸對污染物更敏感。這主要與腸的功能有關，因為腸的功能是消化吸收，能首先接觸水體中的多環(huán)芳烴，并且海膽沒有肝臟組織，腸是是其主要解毒場所，所以腸中的酶活性增大更為明顯[23]。

相同組織相同暴露濃度下，CEWAFs中4種酶活性誘導程度均高于WAFs，說明消油劑加強了石油烴對海膽的毒性效應。并且消油劑對照組與海水對照組之間4種酶活性并無顯著性差異(P > 0.05)，說明消油劑本身對海膽的毒性效應很小。CEWAFs對海膽的毒性效應增大原因主要是消油劑將石油分散為細小油滴增加了生物接觸石油烴的概率[1]，同時消油劑對石油烴具有增溶作用[6]，使相同油水配比濃度下CEWAFs中總石油烴濃度高于WAFs，導致海膽體內的氧化脅迫壓力增加，刺激海膽自身的抗氧化調節(jié)機制，使抗氧化酶活性增加。另外研究發(fā)現(xiàn)，暴露在經消油劑處理的溢油中的生物具有更高的PAHs生物富集濃度[1,3]，PAHs毒性較強，具有致畸、致癌、致突變效應，消油劑明顯增大PAHs溶解度，增加了石油烴對水生生物毒性效應[6,24]。消油劑處理后的燃料油對海膽的毒性效應增大是個極其復雜的過程，有必要做進一步的研究。

通訊作者簡介：熊德琪(1967—)，男，博士，教授，主要研究方向為環(huán)境風險評價。

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Effects of Dispersant and 120 # Fuel Oil on Four Antioxidant Enzyme Activities inHemicentrotuspulcherrimus

Duan Meina1, Yang Bailin2, Ding Guanghui1, Xiong Deqi1,*

1. Dalian Maritime University, Dalian 116026, China 2. Northeastern University at Qinhuangdao, Qinhuangdao 066004, China

5 May 2015accepted 29 July 2015

The use of dispersants is an oil spill response technique. However, effects of dispersed oil on aquatic organisms are controversial. In the present study, effects of 120 # fuel oil dispersed by dispersants on antioxidant enzyme activities of sea urchin (Hemicentrotus pulcherrimus) were investigated. The sea urchins were exposed to seawater, dispersant, water-accommodated fractions (WAFs) or chemically enhanced water-accommodated fractions (CEWAFs) for 96 h. Four antioxidant enzyme activities, that is, the activities of catalase (CAT), superoxide dismutase (SOD), glutathione S-transferase (GST) and glutathione peroxides (GPx), in intestine and gonad of sea urchins were measured. The results indicated that four enzyme activities increased firstly and then dropped down with increasing loading rate of oil. The maximal enzyme activities induced were significantly higher (P < 0.01) than those of seawater control group. The maximal times of four enzyme activities in intestine were higher than those in gonad in WAFs and CEWAFs groups. At the same concentrations, four enzyme activities induced by CEWAFs were higher than those induced by WAFs. There were no significant differences (P > 0.05) of four enzyme activities between seawater control group and dispersant control group.

dispersant; 120 # fuel oil; Hemicentrotus pulcherrimus; antioxidant enzyme activities

國家自然科學基金項目(41276105/D0608)；交通運輸部應用基礎研究項目(2013329225250)；中華環(huán)境保護基金會格平綠色行動遼寧環(huán)境科研教育‘123工程’(CEPF2012-123-2-20)

段美娜(1991-)，女，碩士，研究方向為海洋生態(tài)毒理學，E-mail: 562312223@qq.com；

Corresponding author)， E-mail: xiongdq@dlmu.edu.cn

10.7524/AJE.1673-5897.20150505001

2015-05-05 錄用日期：2015-07-29

1673-5897(2015)6-191-08

X55

A

段美娜, 楊柏林, 丁光輝, 等. 消油劑與120 #燃料油對馬糞海膽(Hemicentrotus pulcherrimus)抗氧化酶活性的影響[J]. 生態(tài)毒理學報，2015, 10(6): 191-198

Duan M N, Yang B L, Ding G H, et al. Effects of dispersant and 120 # fuel oil on four antioxidant enzyme activities in Hemicentrotus pulcherrimus [J]. Asian Journal of Ecotoxicology, 2015, 10(6): 191-198 (in Chinese)