倪慧群 方孝美 王娟梅
兩種分類方法對胸腹腔積液患者的臨床診斷價值比較
倪慧群 方孝美 王娟梅
目的 探討漿膜積液細胞形態學分析對胸腹腔積液患者的臨床診斷價值。方法 413例胸腹腔積液標本同時用直接計數分類法和瑞吉染色分類法進行細胞分類,評價兩種方法在臨床診斷中的價值。結果 413例胸腹腔積液標本,通過瑞吉染色分類法檢出腫瘤細胞66例、可疑腫瘤細胞3例、細菌4例、真菌1例、核異質細胞13例;直接計數分類法檢出真菌孢子1例,未檢出腫瘤細胞,亦未檢出細菌和核異質細胞。結論 漿膜腔積液用瑞吉染色分類法可鑒別積液性質為良性或惡性,明確惡性腫瘤的臨床診斷,臨床應用價值較高,應在醫院檢驗科常規檢查中推廣此種方法的應用。
漿膜腔積液 細胞 分類
人體的胸膜腔、腹膜腔和心包腔統稱為漿膜腔。在惡性腫瘤、結核、急慢性炎癥等病理情況下,漿膜腔內會潴留大量液體形成漿膜腔積液。不同原因的積液細胞成分不同,因此,漿膜腔積液細胞的準確分類能較直觀的反映患者積液形成的原因,直接提供病因證據[1],為臨床診斷和治療提供依據[2]。作者應用直接計數分類法和瑞吉染色分類法檢測胸腹腔積液標本413例,評價兩種方法在臨床診斷中的價值,報道如下。
1.1一般資料 2012年3月至2013年7月本院收治的各種原因引起的胸腹腔積液患者801例,對其中常規白細胞計數>100×106/L的413例胸腹腔積液標本同時行不染色直接分類和瑞吉染色分類。其中男272例,女141例;年齡17~91 歲,平均年齡(64.2±7.1)歲。發病原因:腫瘤82例、外傷52例、結核12例、肝病47例、各類感染83例、各種慢性病68例、其它69例。1.2 方法 (1)直接分類法:玻璃小試管滴加1滴(約50μl)冰乙酸,酸化后倒去多余冰乙酸,滴加混勻的漿膜腔積液3~4滴,再次混勻充入改良牛鮑型計數板,等待數分鐘后用高倍鏡根據細胞核的形態分別計數單個核細胞和多個核細胞,以百分率表示,同時觀察有無真菌、寄生蟲等病原體。(2)染色細胞形態學分析法:將標本直接1500r/min,離心10min吸去上清液留0.1~0.2ml沉淀物,用移液器吸取約10~20μl沉淀物(血性標本取離心后的白細胞層)置于干凈新玻片推片,待干燥后,用瑞吉染色,在顯微鏡油鏡下進行細胞分類和形態觀察,同時查找有典型特征的陽性細胞、細菌、真菌、寄生蟲等,對典型鏡視野進行攝像,留出具診斷性圖文報告。(3)質量控制:標本采集于含EDTA-K2抗凝干粉的專用試管,避免細胞破壞及形態的改變。標本離心不宜過快或過慢,過快巨噬細胞、腫瘤細胞等粘性較大的細胞堆積,不易分散,增加分析難度。過慢細胞沉淀少,影響分析量。制片方法推薦用推片法,盡量不用涂片法,因涂片法細胞分布隨意,增加典型細胞尋找難度,推片法頭體尾分布分明,細胞分布層次清晰,特別是大細胞(如腫瘤細胞)一般分布在片尾,易發現。
1.3統計學方法 采用SPSS 15.0軟件。計數資料采用百分率表示,組間比較采用t檢驗,P<0.05為差異有統計學意義。
兩種細胞分類方法的結果比較 瑞吉染色分類法檢出腫瘤細胞66例(其中胸水45例、腹水21例)、可疑腫瘤細胞3例(其中胸水1例、腹水2例)、細菌4例、真菌1例、核異質細胞13例(其中高度核異質9例、中度核異質4例)。而直接計數分類法檢出真菌孢子1例,未檢出腫瘤細胞及細菌和核異質細胞。兩組間差異有統計學意義(P<0.05)見表1。

表1 兩種細胞分類方法的結果比較[n(%)]
漿膜腔積液是臨床上比較常見的一種癥狀,準確的判斷積液的性質對疾病的診斷和治療起著非常重要的作用。在以往的工作中,僅對標本進行顏色、透明度、Rivalta試驗及細胞計數等常規檢查,以區別漏出液和滲出液,但對積液細胞的形態學分析關注較少。傳統的不染色直接分類法因方法學的限制,只能根據細胞核的形態將細胞簡單分為單個核細胞和多個核細胞,無法給臨床提供有價值的診斷依據。而通過瑞吉染色,單個核細胞還可以分為淋巴細胞、巨噬細胞及間皮細胞,而多個核細胞亦可以進一步分為中性粒細胞、嗜酸細胞、嗜堿細胞等,每一類細胞的異常增高均有其特殊的臨床意義,如中性粒細胞增高常見于急性、炎癥反應;淋巴細胞增高常見于結核、腫瘤引起的積液;嗜酸性粒細胞大量增多常見有惡性腫瘤、氣胸、結核、感染性疾病、肺梗塞、寄生蟲和變態反應性疾病等[3]。
吳茅等[4]認為單純的鑒別漏出液還是滲出液是不能滿足臨床需求。而瑞吉染色能清晰地區別白細胞形態外,還可以清楚地識別腫瘤細胞,為臨床提供有價值的診斷依據。惡性病變的積液中常可見腺癌細胞、小細胞癌細胞、鱗狀細胞癌細胞、惡性淋巴瘤細胞、白血病細胞等。積液中發現腫瘤細胞是診斷惡性積液的金標準[5]。而傳統的直接分類法無法識別腫瘤細胞。通過瑞吉染色積液細胞形態學分析能發現直接分類法中無法發現的細菌、寄生蟲等病原體。積液涂片見大量細菌提示患者為細菌感染引起的胸膜炎或腹膜炎。臨床上漿膜腔積液微生物培養一般需要5~7d,而染色形態學分析當天發出報告,能提前提示臨床,具有較高的輔助診斷價值。漿膜腔積液圖文報告是在瑞吉染色分類法的基礎上,對檢驗結果結合臨床信息進行初步的綜合評價,同時能給臨床醫生和患者帶來更為直觀的圖片分析,具有更大的說服力,其方法簡便快速、結果準確,易于基層醫院推廣。
1 Lee YC,Light RW.Management of malignant pleural effusions. Respirology, 2004,9(2):148~156.
2 單志明,樂美萍,夏曉華,等. 漿膜腔積液有形成份形態學室間質量評價體系的建立與應用.中國衛生檢驗雜志2013(2)23:500~502.
3 董關云,吳茅,鄭素潔,等. 106 例漿膜腔積液嗜酸性粒細胞增多的臨床分析中國衛生檢驗雜志2014(2)24:411~412,415.
4 吳茅.常規漿膜腔積液細胞檢驗現狀與質量控制.檢驗醫學,2008,24(4):72~73.
5 薛立福.惡性胸腔積液檢測方法及評價.中華結核和呼吸雜志,2001,24(1):18~19.
314300 浙江省海鹽縣人民醫院檢驗科