副豬嗜血桿菌病的病原、致病機理與檢疫

徐毅

1病原及致病機理

副豬嗜血桿菌病是由副豬嗜血桿菌感染所引起。該病是1910年由德國人革拉斯（Glasser）首次報道，因此又叫革拉斯氏病（Glasser'sdisease）。[1]

1.1病原

副豬嗜血桿菌屬于巴氏桿菌科豬嗜血桿菌屬，為革蘭氏陰性桿菌。其形狀有球桿狀、細長桿狀、絲狀等；菌體有菌毛、莢膜及膜外蛋白等特殊結構。副豬嗜血桿菌酶系統不全，必須要借助動物血液中的V因子（煙酰胺腺嘌呤二核苷酸[NAD]和煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸[NADP]）作為氧化還原代謝過程的脫氫輔酶，因此，對副豬嗜血桿菌的培養，必須加入V因子才能生長繁殖。

副豬嗜血桿菌的最佳生長溫度是37℃，在60℃下5～20分鐘即可將其殺滅；普通消毒劑就可將其殺死。

副豬嗜血桿菌的血清型按照瓊脂擴散血清分型方法進行分型，目前已經分離出至少有15個血清型，其中，毒力最強的有1、5、10、12、13、14六種血清型菌株；中等毒力的有2、4、8、15四種血清型菌株；毒力弱的是3、6、7、9、11五種血清型菌株。另外，還有約20%的分離菌株目前尚未定型。副豬嗜血桿菌的血清型具有區域差異性，在不同地區的病豬體內分離出的同一血清型菌株其毒性存有明顯差異。

1.2致病機理

副豬嗜血桿菌平時可存在于豬的上呼吸道黏膜及扁桃體陷窩，當豬只呼吸道黏膜受到損害，或感染其他病，或發生應急性反應等情況而導致機體免疫力下降時，副豬嗜血桿菌便乘機侵入機體，引發本病。副豬嗜血桿菌的毒力因子主要有菌毛、莢膜、內毒素、神經氨酸苷酶、細菌生物膜、膜外蛋白等[2]。

副豬嗜血桿菌的菌毛可以使其黏附在豬的呼吸道黏膜并侵襲機體；莢膜可以抵抗動物體內血液中殺菌活性物質的攻擊、吞噬細胞的吞噬作用和某些藥物的抑殺作用；內毒素是由菌體裂解而釋放，其主要成分是脂多糖，進入機體后，刺激動物機體單核細胞、巨噬細胞等釋放白介素-1、白介素-2、腫瘤壞死因子、干擾素等多種內源性致熱原及促炎因子，這些因子一方面作為基本信息分子以不同的途徑將發熱信號傳入體溫調節中樞，使動物產熱大于散熱，體溫升高，另一方面作用于機體的多種組織器官，特別是免疫系統和血管內皮系統，導致炎癥級聯反應，使微循環血管壁的通透性增加，形成器官組織的局灶性淤血、水腫及炎癥病變。[3]同時，脂多糖還可以通過促進血液內凝血酶的生成而引起彌散性血管內凝血，病情長者能導致肝細胞損傷，引起機體代謝障礙，繼而引起疾病營養不良性消瘦[4]；細菌生物膜具有黏附作用，并抑制中性白細胞和淋巴細胞對細菌的特異性和非特異性免疫，使細菌逃逸動物機體免疫系統對膜內菌體的清殺。神經氨酸苷酶與透酶、醛縮酶協調作用，除通過奪取宿主細胞的碳水化合物而增強細菌毒力外，還通過降低黏蛋白的黏性以干擾宿主的防御系統。

1.3組織器官病變

感官組織病變。胸腔病變：膈胸膜、肋胸膜、肺胸膜、心包胸膜發生纖維素性滲出性炎癥病變，胸水和心包液增多，顏色淡紅，有干酪樣纖維素性滲出物，后期的胸膜和心包膜出現假膜，嚴重時胸腔的臟層漿膜和壁層漿膜以及心包的內外膜發生黏連。腹腔病變：腹膜發生不同程度的纖維素性滲出性炎癥病變，腹水增多，有纖維素性滲出物出現。

關節腔病變：關節囊發生炎癥性腫脹，囊內膜出現纖維素性滲出性炎癥病變，關節液增多，呈談紅黃色，有纖維素性滲出性物，后期呈談紅黃色膠胨樣；關節面上因為有纖維素性滲出性物和壞死物而變得粗糙。

腦髓和脊髓病變：在腦髓的蛛網膜下腔和腦室以及脊髓的中央管，炎性滲出液增多，呈淡黃紅色，有纖維素性滲出性物。

實質性器官病變：在心、肺、腎等實質性器官出現局灶性充血、淤血、出血甚至壞死。全身淋巴結腫大，色暗紅，切面呈大理石花紋。[5]

鏡檢組織病變。病料經H.E染色鏡檢，可見病變組織內有現滲出性漿液和深紅色纖維素樣變；同時出現紅血球、中性白血球、單核球、淋巴球浸潤；可見球桿狀或細長桿絲狀的副豬嗜血桿菌菌體。

2檢疫

2.1宰前檢驗

流行特點。副豬嗜血桿菌主要感染高度健康的豬和不帶特異病原的豬易感，通常見于4～8周齡的豬，為地方流行性。副豬嗜血桿菌病發生的主要原因是副豬嗜血桿菌的入侵，凡能使豬只機體抗病免疫力下降的因素，如營養不良、應激反應以及患有其他疾病等都會引起副豬嗜血桿菌病的發生。

臨床癥狀。病豬發熱，體溫為40～41℃；食欲不振，被毛零亂，逐漸消瘦；可視黏膜發紺，鼻孔有黏液性及漿液性分泌物，呼吸困難，咳嗽，尖叫；關節腫脹、跛行；嚴重時皮膚發紅，耳朵發紺，不能站立，步態僵硬、震顫、共濟失調。一般死亡期3天左右，少數病例會發生突然死亡。

2.2宰后檢驗

病理組織檢查。根據感官組織病變和顯微檢查及可做出鑒定。

病原學鑒定。對副豬嗜血桿菌病的最終定性，要以副豬嗜血桿菌的定性檢驗結果為準。

方法一：用病豬的心、肺、淋巴結等器官組織做成病料涂片，用H.E染色，鏡檢。如果是副豬嗜血桿菌病，可見到球桿狀或細長桿絲狀的副豬嗜血桿菌菌體。

方法二：葡萄糖蛋白胨V因子培養液發酵試驗。原理：副豬嗜血桿菌酶系統不全，必須要借助V因子（NAD和NADP）作為氧化還原代謝過程的脫氫輔酶，在對副豬嗜血桿菌的培養，只有在培養基中加入V因子，副豬嗜血桿菌才能繁殖生長，并在繁殖生長過程將葡萄糖發酵分解產生乳酸，使培養基由藍變黃。方法及結果判定：將待檢菌株分別接種到沒有加入V因子和加入V因子（5uL0.01%的NAD）的兩支葡萄糖蛋白胨液培養液試管中，將試管置于5%的二氧化碳培養箱內，在37℃溫度下培養24～48小時后觀察。如果加有V因子的一管顏色由藍變黃，而另一管不變，則可確定所檢菌株是副豬嗜血桿菌。

方法三：鮮血瓊脂平板加金黃色葡萄球菌共同培養試驗。原理：金黃色葡萄球菌在鮮血瓊脂平板培養基上繁殖生長時能產生提供副豬嗜血桿菌繁殖生長所必須V因子（均勻向四周擴散）。

方法及結果判定：先將待檢疑似細菌接種在鮮血瓊脂平板培養基，再挑取金黃色葡萄球菌垂直于水平線畫線，經37℃培養24～48小時，如果待檢細菌是副豬嗜血桿菌，則在金黃色葡萄球菌菌落周圍有呈“衛星生長”菌落。

另外，脲酶試驗（-）、氧化酶試驗（-）、接觸酶試驗（+）、硝酸還原試驗（+）、聚合酶鏈反應等，亦可對副豬嗜血桿菌做出鑒定[6]。

2.3比較鑒定

副豬嗜血桿菌病在鑒定中極易與豬敗血性鏈球菌病相混淆，應注意比較鑒定。

副豬嗜血桿菌病和豬敗血性鏈球菌病的相同點：

從致病機理方面，這兩種病的病原菌毒素都是以主要侵害血管壁內膜細胞，引起局部微循環小血管和毛細血管擴張，血管通透性增大為主；從組織器官病理變化方面，都出現纖維素性滲出性關節炎、肺炎、心內膜炎、腦膜炎，實質性器官都發生局灶性淤血、充血、出血，后期都有敗血癥病變；從臨床表現方面，都有可視黏膜發紺、發熱、厭食、震顫、共濟失調、反應遲鈍、呼吸困難、關節腫脹、跛行、母豬流產等癥狀；從病理組織鏡檢方面，病灶組織鏡檢都可見滲出性漿液和纖維素、中性白血球、單核球、淋巴球甚紅血球至浸潤；從病原的存在方面，都可存在健康豬的鼻腔黏膜或扁桃體隱窩；從對藥物的敏感性方面，都對青霉素、磺胺等藥物敏感。

副豬嗜血桿菌病和豬敗血性鏈球菌病的不同點：從病原方面，副豬嗜血桿菌為桿狀，革蘭氏染色陰性，豬敗血性鏈球菌病的病原豬鏈球菌為球形，革蘭氏染色陽性；從易感豬群方面，副豬嗜血桿菌多感染幼齡豬只，特別是高度健康的豬和不帶特異病原的豬易感，豬敗血性鏈球菌感染豬只則不分年齡類群；從病理變化方面，副豬嗜血桿菌病豬心肌不擴張松弛、沒有化膿性腦膜炎病變，豬敗血性鏈球菌病豬心肌擴張松弛、有化膿性腦膜炎病變；從臨床癥狀方面，副豬嗜血桿菌病的病豬無驚厥現象、視覺聽覺正常，豬敗血性鏈球菌病的病豬有驚厥、失明、失聽現象。另外，還可以作特異性病原學鑒定。

3處理

對早期病或病情較輕的病豬，應及時隔離，同時用口服和注射較大劑量的誘導內毒素釋放少的抗菌藥物如強效嗜血康等進行治療，同群沒有癥狀的豬，可以在飲水或飼料中添加畜禽健、強效阿莫仙等藥物進行保健預防性處理；對污染的環境可用常規消毒液進行消毒；對晚期的或病情嚴重的病豬作急宰處理。

對急宰病豬，內臟器官進行銷毀，肉體可煉制工業油；對病死豬的肉尸作化制處理。

4預防措施

適當擴展豬只活動空間，消除現代工廠化設施養豬場中豬只活動空間過于緊窄而使豬只必須的生物習性活動受限所導致的精神不愉快性應激反應的發生。同時，在生豬運輸過程中要注意避免因車箱船艙通風不良和豬只擠壓而造成豬只生存性應激反應的發生。

建立完善生產豬場的檢疫防疫機制與工作檔案。平時應定期對豬群作副豬嗜血桿菌帶菌檢查，引進外來豬只時要重點實施開展對副豬嗜血桿菌帶菌檢查。對查出有帶菌的豬要嚴格實施隔離與治療處理。

參考文獻：

[1] 陳溥言.獸醫傳染病學第五版[M].北京：中國農業出版社，2009：264-265.

[2] 李靜怡，張建民，徐成剛，等.副豬嗜血桿菌主要毒力因子與致病機理的研究進展[J].中國畜牧獸醫，2010，37（12）：173-176.

[3] 郭萌，李冠民，黃清泉，等.細菌內毒素研究進展[J].中國實驗動物學報，2009，17（5）：397-401.

[4] 馬廣鵬.副豬嗜血桿菌毒力因子研究進展[J].動物醫學進展，2013，34（2）：83-88.

[5] 馬學恩.家畜病理學[M].北京：中國農業出版社，2011：299-230.

[6] 李仕新，黃彩梅，陳國開，等.副豬嗜血桿菌檢測技術的研究進展[J].中國動物檢疫，2011，28（3）：78-80.