碘油聯(lián)合壁虎活性單體介入治療兔VX2肝移植瘤術(shù)前影像評(píng)價(jià)

張明 劉峰 孫業(yè)全

【摘要】目的：建立兔VX2肝移植瘤模型，對(duì)其影像學(xué)表現(xiàn)進(jìn)行評(píng)價(jià)，為下一步聯(lián)合壁虎活性單體評(píng)價(jià)治療效果提供一定的參考。方法：20只兔新西蘭大白兔在無(wú)菌條件下接種VX2瘤組織塊，建立VX2肝移植瘤模型，2周后行超聲、3.0T磁共振，評(píng)價(jià)其影像表現(xiàn)。結(jié)果：成瘤率為90%。超聲表現(xiàn)為略高回聲團(tuán)塊，沒(méi)有包膜，其內(nèi)可見(jiàn)強(qiáng)回聲。TIWI表現(xiàn)為低信號(hào)，T2WI表現(xiàn)為高信號(hào)，增強(qiáng)掃描后明顯強(qiáng)化，內(nèi)部有不強(qiáng)化的壞死區(qū)。結(jié)論：對(duì)兔VX2肝移植瘤而言，超聲檢查篩查腫瘤生長(zhǎng)情況，磁共振可以從分子水平上評(píng)價(jià)藥物療效，為下一步碘油聯(lián)合壁虎活性單抗評(píng)價(jià)藥效提供一定的依據(jù)。

【關(guān)鍵詞】兔；VX2肝移植瘤；影像表現(xiàn)

【中圖分類(lèi)號(hào)】R562.21【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B【文章編號(hào)】1005-0019（2015）01-0071-01

肝癌是常見(jiàn)的消化系統(tǒng)腫瘤之一，兔VX2肝移植瘤模型從生長(zhǎng)、轉(zhuǎn)移及死亡、病理均與人肝癌相似，建立兔VX2肝移植瘤模型，篩選合適的模型，可以為碘油聯(lián)合壁虎活性單抗行介入治療及評(píng)價(jià)療效提供更好的參考依據(jù)。

1材料與方法

1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及其模型建立

新西蘭大白兔20只，購(gòu)自山東省農(nóng)科院，體重2.5～3.5kg。從-152℃超低溫冰箱中取出組織塊，放入40℃水浴箱中復(fù)蘇1分鐘，放入盛有生理鹽水的換藥碗中。用1.5%戊巴比妥鈉（2ml/kg）耳緣靜脈注射麻醉2只，常規(guī)備皮、消毒、鋪無(wú)菌洞巾，于大腿內(nèi)側(cè)切開(kāi)皮膚，暴露肌肉，用手術(shù)刀切開(kāi)2mm長(zhǎng)的切口，切取大約1mm3的組織塊置入其中，縫合切口。術(shù)后三天每天給予40U青霉素預(yù)防感染。術(shù)后3周，超聲掃描可見(jiàn)接種處肌肉內(nèi)一實(shí)質(zhì)性低回聲包塊，即制成荷瘤兔。于3周后麻醉該瘤兔，切取新鮮腫瘤組織，剔除壞死組織，切成大約1mm3的組織塊，麻醉20只兔子，手術(shù)操作方法同上，于劍突下切開(kāi)大約2～3cm切口，于肝左葉用眼科鑷刺破形成3～5mm深的竇道，置入2～3塊組織塊，明膠海綿填塞，防止組織塊到皮下等位置，縫合。術(shù)后三天每天給予40萬(wàn)U/只，青霉素預(yù)防感染。

2、儀器及方法

選用SIMENS超聲診斷儀，探頭采用4PL，淺表器官探頭，變頻范圍5～12MHz。

GE3.0T磁共振，采用膝關(guān)節(jié)線(xiàn)圈，掃描參數(shù)TIWI，TR220ms，TE6.2ms，F(xiàn)OV576mm，層厚5mm，層間距1mm，矩陣320×224，T2WI，TR2360ms，TE71.9ms，F(xiàn)OV576mm，層厚5mm，層間距1mm，矩陣320×224，DWI，b值取0s/mm2、800s/mm2和1000s/mm2，TR5320ms，TE73ms，F(xiàn)OV456mm，層厚5mm，層間距1mm，矩陣128×128。經(jīng)耳緣靜脈注射Gd-DTPA，劑量0.1ml/kg，動(dòng)態(tài)增強(qiáng)掃描。

結(jié)果：

VX2肝移植瘤超聲表現(xiàn)：VX2肝移植瘤呈略類(lèi)圓形等回聲團(tuán)塊，與正常肝實(shí)質(zhì)分界欠清，其內(nèi)可見(jiàn)斑點(diǎn)狀強(qiáng)回聲。（圖A）

MRI表現(xiàn)：T2WI圖像上VX2肝移植瘤呈邊緣清楚的圓形或橢圓形高信號(hào)，高于周?chē)闻K或肌肉，其內(nèi)部信號(hào)不均勻，有不規(guī)則的高信號(hào)區(qū)。T1WI圖像上VX2呈現(xiàn)較均勻的低信號(hào)，中心信號(hào)略不規(guī)則。DWI圖像上顯示為高信號(hào)，增強(qiáng)后邊緣明顯強(qiáng)化，中心出現(xiàn)清楚的非強(qiáng)化區(qū)。（圖B-E）

討論：

VX2是Shop病毒在兔皮膚上誘發(fā)的鱗狀細(xì)胞癌經(jīng)多次傳代建立，其是穩(wěn)定的可移植腫瘤細(xì)胞株[1]。兔VX2肝移植瘤模型現(xiàn)在已經(jīng)比較成熟，是目前最大、最成熟和最常用的肝癌腫瘤模型[2]，其移植成功率高，時(shí)間短，是理想的動(dòng)物研究模型，其比較接近人類(lèi)肝癌，可以較好的為抗肝癌新藥的應(yīng)用研究提供良好的基礎(chǔ)模型。不同之處，是缺乏引起肝癌的原發(fā)病，例如肝炎、肝硬化，這在一定程度上限制了它的研究?jī)r(jià)值。開(kāi)腹手術(shù)種植法成瘤率高、模型性質(zhì)比較穩(wěn)定，是值得推薦的建立兔肝移植瘤模型的方法[3]。

相比其他影像學(xué)檢查方法，超聲檢查方便，經(jīng)濟(jì)，可以較好的篩查腫瘤的生長(zhǎng)情況，可重復(fù)性強(qiáng)，超聲檢查是一種監(jiān)測(cè)肝癌模型的有效手段。但是其在檢測(cè)腫瘤的壞死以及生長(zhǎng)率等方面應(yīng)用有一定的限制，由于主觀因素以及兔心臟搏動(dòng)等影響，因此很難準(zhǔn)確的測(cè)量大小等指標(biāo)。若生長(zhǎng)的肝癌比較靠近心臟，由于心臟搏動(dòng)的影響，很難準(zhǔn)確測(cè)量血流信號(hào)，難以明確腫瘤的供血情況。因此開(kāi)腹種植期間，注意盡量在肝左葉遠(yuǎn)離心臟的部位種植，同時(shí)也方便介入手術(shù)時(shí)的超選。

3.0T磁共振較1.5T磁共振具有更高的軟組織分辨率和信噪比，更適應(yīng)于評(píng)價(jià)腫瘤的治療效果。磁共振功能成像是對(duì)腫瘤進(jìn)行無(wú)創(chuàng)評(píng)價(jià)治療效果最常用的方法之一。磁共振彌散加權(quán)成像（DWI）是目前唯一能夠在體外無(wú)創(chuàng)性檢查組織內(nèi)水分子擴(kuò)散運(yùn)動(dòng)的方法[4]，在分子水平上評(píng)價(jià)治療效果，觀察腫瘤變化情況。b值是重要的影響因素之一，隨著b值的升高，圖像的CNR有所下降，但SNR和ADC比值卻會(huì)慢慢上升，雖然圖像質(zhì)量會(huì)有所下降，但是腫瘤與周?chē)螌?shí)質(zhì)、腫瘤中心與周邊的對(duì)比更加明顯，這對(duì)于研究抗腫瘤藥物的療效是最為合適的[5]，通過(guò)不同b值的比較，選取800 S/mm2，是最為合適的。磁共振動(dòng)態(tài)增強(qiáng)（DCE-MRI）技術(shù)可以動(dòng)態(tài)的觀察腫瘤局部微循環(huán)的特點(diǎn)，反映微循環(huán)變化的病理生理過(guò)程。通過(guò)分析得到的圖像數(shù)據(jù)可以在分子層面上評(píng)價(jià)腫瘤組織生理病理信息[6]。這可以為下一步評(píng)定經(jīng)血管抗腫瘤藥物的療效提供更好的參考。通過(guò)磁共振可以比較準(zhǔn)確的測(cè)定腫瘤的體積，與病理對(duì)照，為無(wú)創(chuàng)性檢查評(píng)價(jià)腫瘤治療效果提供更好的依據(jù)。雖然3.0T磁共振具有極高的軟組織分辨率和信噪比，但是3.0T磁共振圖像更易受到呼吸運(yùn)動(dòng)以及胃腸蠕動(dòng)的影響，從而造成偽影，影響評(píng)價(jià)藥物療效。因此在行此檢查時(shí)可以考慮應(yīng)用沙袋加壓或者呼吸抑制藥物等減少偽影。

VX2肝移植瘤2～3周生長(zhǎng)最旺盛，此時(shí)期為供瘤血管形成期[7，8]，是介入治療的最佳時(shí)期。由于兔血管比較細(xì)，所容納的造影劑的量是有限的[9]。注意介入治療時(shí)不要栓塞膽囊動(dòng)脈，以免造成膽囊壞死。