TPPA和TRUST聯合檢測在梅毒診斷中的應用

王文忠

【摘要】目的：評價TRUST與TPPA兩種聯合檢測方法在梅毒診斷中的應用。方法：用TPPA和TRUST兩種方法同時檢測我院2013年1——12月958例門診及住院患者血清標本中的梅毒螺旋體抗體，同時進行TRUST滴度測定，并對比檢測結果。結果：對所有例數進行檢測后，TPPA特異性為99.99%，TRUST特異性為98.85%，TPPA檢測陽性率明顯優于TRUST，差異具有顯著統計學意義p<0.05。結論：TPPA法優于TRUST法，可以作為梅毒的確證實驗，TRUST可作為療效觀察，判定復發或再感染指征。兩種方法聯合使用在檢測梅毒診斷中具有重要的臨床意義。

【關鍵詞】TPPA；TRUST；梅毒診斷

【中圖分類號】R759.1【文獻標識碼】B【文章編號】1005-0019（2015）01-0098-01

梅毒是由蒼白（梅毒）螺旋體感染引起的一種傳播疾病。梅毒在感染人體后會產生特異性抗體、非特異性抗體，這些都是梅毒螺旋體在宿主細胞的類脂質和表面脂質產生的抗體，相關報告如下。

1.資料和方法

1.1一般資料

本組選擇我院于2014年1—12月958例疑似梅毒患者，其中男504例，年齡18～59歲，女454例，年齡17～60歲。將其隨機分為對照組、觀察組，每組各479例，兩組患者病程、年齡等比較，差異均無統計學意義P>0.05。

1.2主要試劑

我們采用上海榮盛生物藥業有限公司提供的梅毒甲苯胺紅不加熱血清試驗診斷試劑（TRUST）和日本富士株式會社生產的TPPA試劑。所有血清樣本均按照《全國臨床檢驗操作規程》與試劑說明書操作。

1.3方法

TRUST實驗檢測梅毒非特異性抗體時，在實驗卡漆圈內加入待檢血清50ul，在圈中均勻涂開，并且用生理鹽水50ul將50ul血清作倍比稀釋作滴度試驗（為避免前帶反應，滴度至少作到1：8），在每個漆圈內加入TRUST試劑17ul，置于水平旋轉儀上以100R/Min頻率水平混勻8分鐘，判讀實驗結果[2]。

做TPPA實驗檢測特異性抗體時，在U型反應板的第1—4孔中分別加入100、25、25、25ul血清稀釋液，取待檢血清25ul加入第1孔中，充分混勻后吸取25ul加入第2孔，再混勻，倍比稀釋直至第4孔，最后吸取25ul棄去，用專用滴管在第3孔中加入未致敏粒子1滴，在第4孔中致敏粒子1滴，微涼振蕩器震蕩均勻后，室溫加蓋水平靜置兩小時，觀察結果。

1.4統計學方法

應用SPSS16.0統計學軟件對上述治療進行數據的分析，計量資料用卡方檢驗，確定P<0.05差異具有統計學意義。

2、結果

2.1對958份樣品用TPPA和TRUST聯合檢測結果見表1，其中TPPA檢測法特異性為99.99%；TRUST檢測法特異性為98.85%。敏感度均為100%，TPPA檢測陽性率明顯優于TRUST，差異具有顯著統計學意義p<0.05。

3、討論

人體感染梅毒螺旋體后約6周可以檢測出某些非特異性抗體，反應素，如卵脂質、心脂質等抗梅毒螺旋體破壞患者組織后釋放出的某些物質抗體[3]。另外一種抗梅毒螺旋體產生的特異性抗體感染2周即可復查出。TRUST主要檢測的是非特異性抗體，操作較簡單，反應時間短，結果容易判讀，但該實驗方法的假陽性率較高，如肝炎、妊娠、及某些自身免疫性疾病均可引起該實驗假陽性，很容易出現漏診和誤診[4]。TPPA敏感性高，且患者一旦患有梅毒即使經過正規的治療，往往終身陽性，TPPA不適合于對梅毒的療效評估、復發和再感染的診斷。而TRUST檢測可以作為療效觀察以及復發和再感染的指標，當血清滴度升高4倍或者高滴度（≥1：8）者，結合臨床檢測結果應當給予及時的治療[5]。

TRUST檢測實驗中，常常會出現TRUST1：1陰性或弱陽性，而隨著血清稀釋倍數的增加，反應強度卻隨著升高，即“前帶反應”。試驗中出現帶現象是因為抗原或抗體過量的關系，通常抗原過量易于發生后帶反應，抗體過量易于發生前帶反應。所以，在日常的TRUST及滴度檢測實驗中，為避免前帶反應對實驗結果判讀造成誤導，滴度實驗至少要做到1：8。在試驗中我們發現TPPA檢測出陽性率高于TRUST檢測法，說明部分患者經過治療已經痊愈，尤其在老年人之中尤為明顯。因此，運用TPPA和TRUST聯合檢測梅毒抗體，并結合臨床進行具體分析能夠取得很大的臨床應用價值。

TRUST法主要用于檢測血清中的反應素，約感染6周后可查出，對早期梅毒輔助診斷能力差，但是TRUST滴度變化和梅毒治療情況成正相關，隨著梅毒的治療，抗體滴度下降，因此，適合用于梅毒治療的療效觀察、隨訪和復發等有效診斷，對病情的評估有著重要的作用[6]。此法操作簡單，容易判讀結果，它的滴度實驗可以作為療效觀察的指標。但影響因素多，多種疾病科出現反應素導致假陽性結果，又由于感染梅毒后反應素的出現晚于梅毒特異性抗體，晚期梅毒時反應素又可能轉陰。TRUST法不適用于一期梅毒早期、三期梅毒，對潛伏梅毒和神經梅毒也不敏感而導致假陰性結果，TRUST法不能單獨用為梅毒的臨床診斷。

梅毒特異性抗體從本質上又可以分為IgM和IgG兩種，而以IgG形式存在的抗體是可以通過胎盤屏障進入胎兒體內的，所以，在診斷先天梅毒時，尤其要注意結合兩種檢測方法，同時結合患兒母親的血清學檢測結果綜合判斷，必要時要進行病原學檢測或進行梅毒的IgM特異性抗體檢測，只有這樣，才能對患者做出最正確的診斷。

參考文獻

[1]胥國強，康清秀，蒲澤宴等.四種方法檢測梅毒螺旋體抗體結果的比較及應用評價[J].國際檢驗醫學雜志，2012，32（16）：1869—1870

[2]于春東，宋金蓮，李偉.不同檢測方法在孕婦梅毒篩選中的應用價值和監測意義[J].中國衛生檢驗雜志，2013，23（1）：140—141

[3]潘小平，洪曉綠，賴金國等.梅毒抗體不同血清學診斷方法的臨床評估[J].實驗與監測醫學，2013，31（2）：175—177

[4]王濤，李旭等.兩種梅毒血清學檢測方法的聯合運用分析[J].中國艾滋病性病，2012，18（7）：477—477

[5]何細德，代國知，陳虹亮.應用TPPA和TRUST試驗檢測梅毒螺旋體抗體及其臨床意義[J].實用預防醫學，2011，17（6）：1199—1200

[6]曾朱君，彭瑟.TPPA和TRUST檢測梅毒螺旋體抗體的臨床意義[J].中國醫藥指南，2013，33（11）：458—459