淺談水質環境監測中微生物檢測的質量控制

李森 賈玉鵬

【摘要】水質環境監測在防治水污染、制定水環境標準方面發揮重要作用。水質監測質量保證是一種保證監測數據準確可靠的手段，是整個監測過程的重要環節。在水質環境監測中，水中微生物的檢測是一項重要內容。本文從水質監測微生物樣品采集、實驗室檢測系統、水質微生物樣品檢測中、結果評價系統等方面對水質環境監測中微生物檢測的質量控制進行了論述分析，以供相關從業人員借鑒參考。

【關鍵詞】水質監測；微生物檢測；質量控制

水質監測過程中，水中微生物在實驗室的檢測存在一些特別的問題，諸如在分析標準，已知加入量、參比樣品等，通常都不具備或不知道，因此個人判斷常常顯得更為必要。一個有效的質量保證程序必須能控制從采樣到報告數據過程中所有足以影響檢驗結果的因素，這些因素包括采樣技術、實驗設備與器材、工作人員、材料供應的品質、培養基、分析測試步驟等等。以下就水質環境監測中微生物檢測的質量控制進行簡要分析。

1、水質監測微生物樣品采集的質量控制

1.1水質監測微生物實驗室先備齊采集微生物樣品的無菌采樣玻璃瓶

許多水體隨時間和空間會發生很大變化，必須制定出合理的采樣規劃。為保證采集的水樣必須有代表性，采樣時固定取水點，同一時間；采水量應為瓶容量的80%，以便在檢驗時充分混勻；采樣時應直接采集，不得用水樣刷洗已滅菌的采樣瓶，并避免手指和其他物品對瓶口的玷污；采樣時不可攪動水底的沉積物；采集管網水的樣品前應對水龍頭進行消毒，方法為用火焰在龍頭表面燒灼片刻（3～5秒），而后放水5～10分鐘。農村生活用水部分水樣為蓄水池，需要備一個干凈的水桶，放入水池中數分鐘，盡量不取表面水，提水后將水灌入無菌瓶中，手注意不要接觸到無菌瓶口和瓶塞。

1.2水樣的保存達到減緩微生物繁殖的作用

采用低溫冷藏箱來保存水樣，水樣全部采集后立即送回實驗室；在運輸中，玻璃容器要防止破裂，須有固定措施，防止樣品容器傾倒和樣品溢出。

2、實驗室檢測系統的質量控制

2.1主要實驗設備控制

（1）、溫度計或其它溫度計量一起每半年校對一次，以保證培養箱、冰箱、冷凍箱和干燥箱都能連續準確的反映操作溫度。（2）、天平的使用應嚴格遵守操作規程，定期進行檢定。（3）、使用PH計，至少要配制兩種標準緩沖液（PH4.0，PH7.0或PH10）來校準PH計。（4）、分析用水最好采用去離子水或蒸餾水，反對使用滲透水。（5）、電熱滅菌箱應定期（三個月）采用孢子試條或孢子懸浮液來測試其性能，確保操作準確顯在160℃～180℃之間，己滅菌的器皿應有標志區分（6）、高壓滅菌器也應定期采用孢子試跳或孢予懸浮液檢驗其滅菌效果，每次使用要記錄好溫度、氣壓和滅菌時間。（7）、膜濾裝置在使用前應將部件組合起來，并檢查有無滲漏，必要時覆以硅酮，以增強過濾排放的效果。使用應徹底清洗。（8）、紫外燈應每月定期擦試，每三個月一次使用紫外光度計測量紫外燈，以保持能使用紫外燈放出的紫外光在其最初放出的70%以上。（9）、培養箱應每天兩次檢查其使用溫度，培養箱應置于室溫為16℃-27℃范圍的房間最佳。（10）、所使用的玻璃器具要求完整無損，清洗后要進行檢查，如果洗后表面有過多水珠附著，必須重洗。對于一種新的洗滌劑，使用前應先檢驗其是否會留下對生物有抑制性的殘留物。必要時采用溴麝香草酚蘭或其它指示劑抽樣進行PH反應試驗。

2.2實驗室環境控制

（1）、實驗室要求有良好的通風而且能夠避免灰塵、溫度變化，最終好能要用集中式空調，這樣一來即能減少雜菌污染，又能保證培養箱的穩定操作和減輕培養基、分析天平的受潮問題。（2）、設計實驗室，以要工作時使往來通行和訪客的影響能減少到最小程序為原則，并要具專門的區域供配制培養基和無菌操作用。（3）、用光滑的最后一道漆覆蓋墻壁，使之易于清洗和消毒，地面要求使指定的材料，做到放滲水、光滑、易于清潔；工作臺高寬適當、臺面要做到防止透水、抗腐蝕、光滑無逢。（4）、保持高度標準的清潔空氣。可采用RODAC平皿、細菌密度平皿或拭抹法來監測空氣和臺桌面。

2.3對制成的培養基的質量控制

每次配制好的培養基應記錄有配制人，配制日期，培養基名稱和配制批次、數量、滅菌溫度和所使用時間、PH值以及培養基中是否配有不穩定成分等。并進行無菌檢驗及陽性的陰性對照培養檢查。

3、水質微生物樣品檢測中的質量控制

微生物水樣采集后送至水質檢測室，檢驗中所用的一切用品必須是完全滅菌的，在滅菌前應徹底洗滌干凈。培養基和稀釋液按規定要求進行高壓蒸汽滅菌。

3.1檢測菌落總數的質量控制

在接種前應將水樣充分搖勻，是水中的細菌均勻分布于水中，水樣稀釋時應小心沿管壁加入，不要觸及管內稀釋液，以防吸管尖外側部分粘附的檢液混入其中，將水樣注入皿內時，從皿側加入，不要揭去皿蓋，最后將吸管直立使水流空，并在皿底干燥處再擦一下吸管尖將余液排出，而不要吹出。為防止產生片狀菌落，水樣加入平皿后，在20分鐘內向皿內傾入營養瓊脂培養基，并立即混合均勻，皿內瓊脂凝固后，不要放置長久后才翻轉培養，而應于瓊脂凝固后，在數分鐘內將平皿翻轉進行培養，這樣可避免菌落蔓延生長。

3.2檢測大腸菌群的質量控制

接種后搖動試管，使水樣與乳糖發酵管混勻；乳糖發酵試驗中常有產氣量少或產酸不產氣的情況，有時倒管內雖無氣體，但在液面及管壁卻可以看到緩緩上浮的小氣泡，這時不要放棄，繼續做下一步證實實驗。初發酵陽性則需進一步革蘭染色和繼續接種培養觀察。挑取菌落數與大腸菌群的檢出率有密切關系，一定要挑取典型菌落，如無應多挑幾個以防假陰性。

4、結果評價系統的質量控制

4.1操作方法的精密度的度量

（1）、從某一特種型式的一批水樣中，選出最先15個陽性水樣，做雙樣分析。（2）、計算每個數據的對數，如果在任何一雙樣結果中有任一者為零，則都加1然后算對數值。（3）、計算每個一雙對數的差城（用R表示），并且計算出這些差城的平均值（R）。公務員之家。（4）、然后，取例行水樣中的10%，做雙樣分析。如果計算它們的差大于3.27R，則表示化驗員的精密度失控制，這時就應該否定自從上一次精密度檢查后的分析結構。找出原因，方可繼續分析。

4.2無菌性檢查

（1）、每做一次試驗，就必須用滅菌水為水樣，檢查培養基、濾膜、稀釋水、沖洗用水、玻璃器皿和器具的無菌性，如果有雜菌侵染，則用該材料做試驗所得的數據應該否定。（2）、每次試驗至少要對一個水樣做重復分析，原則上要對10%的水樣做出重復分析。（3）、對多人操作的實驗室，應進行對至少一個陽性水樣的平行分析，以便比較操作。

結束語

近年來水質環境監測已經取得一定成績，常規監測日趨成熟，水質自動監測正有計劃地逐步開展。我國水環境監測方法可以歸為三類：自動監測，常規監測，應急監測，而水質環境監測中水中微生物的檢測是其重要內容，因此對其檢測質量控制研究具有重要的現實意義。

參考文獻

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