細胞塊切片免疫組化染色在胸腔積液病理診斷中的應用價值

李中祥

(太康縣人民醫院 病理科 河南 周口 475400)

胸腔積液主要來源于非小細胞肺癌、肺腺癌和惡性胸膜間皮瘤等，傳統胸腔積液的診斷主要采用細胞涂片檢查。但單純應用細胞涂片進行檢查，無法對轉移性癌和漿膜腔原發性間皮性腫瘤進行區別。胸腔積液細胞免疫組化染色檢測是近年來應用在鑒別轉移性癌和間皮性腫瘤方面具有極高敏感度的檢測方法。本文選取80例惡性胸腔積液患者作為研究對象，采用細胞免疫組化染色檢測，具體報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 以太康縣人民醫院2013年10月至2014年10月80例胸腔積液患者為研究對象，其中觀察組40例，男22例，女18例，年齡14～76 歲，平均年齡(40.2±3.1)歲;對照組40例，男20例，女20例，年齡12～73 歲，平均年齡(41.1±3.3)歲。80例送檢樣本均為胸腔積液;觀察組40例均制作細胞塊，對照組40例均進行常規細胞涂片。本次研究均經過患者或患者家屬簽署知情同意書，且兩組患者在年齡、性別等一般資料方面比較，差異無統計學意義(P ＞0.05)，具有可比性。

1.2 研究方法

1.2.1 標本采集 清晨收集患者新鮮胸腔積液50 ml，分3～5個試管進行離心，以3 000 r/min 的轉速離心10～15 min;離心結束后用移液槍將上清液吸出，從沉渣中取部分行常規細胞涂片學檢查;余下所有沉渣加入2.5 ml 戊二醛進行固定，再以3 000 r/min的轉速離心5 min，離心后用移液槍將上清液吸出，將沉渣取出用濾紙包好，行常規脫水后用石蠟包埋切片，應用HE 染色。

1.2.2 免疫組化 采用Maxvision 快捷S－ P 法進行染色，Maxvision 試劑盒和DAB 顯色試劑均購于福建邁新有限公司，CEA、CK7、Wr－l 等抗體均購于自基因公司，染色過程中嚴格按照試劑盒說明書進行。

1.3 診斷標準 陽性:CK7、CEA 在胞漿或胞膜上呈現棕黃色;WT－1 在胞核呈現棕黃色顆粒;Calretinin 在胞漿、胞膜或胞核上呈現黃色;間皮細胞或腺癌細胞達10%以上。

1.4 統計學方法 采用SPSS 17.0 統計學軟件進行數據處理分析，定性資料的組間比較采用χ2檢驗，P ＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

觀察組和對照組患者胸腔積液的陽性檢出率分別為100.0%、76.0%，細胞塊切片結合免疫組化陽性率明顯高于常規細胞學涂片，差異有統計學意義(P ＜0.05)。抗體表達分析顯示，CK7、MOC－31、CD15、TTF－1、BerEP4、CEA 是肺腺癌較為特異性的抗體，而Calretinin、Desmin、CK5/6、WT－1 是間皮性腫瘤較為特異性的抗體，各抗體在腺癌細胞和間皮性腫瘤細胞均有交叉表達。見表1。

表1 兩組患者病理診斷結果對比(n)

3 討論

胸腔積液在細胞病理學診斷中始終具有至關重要的臨床意義。由于轉移性癌和漿膜腔原發性間皮性腫瘤的細胞形態比較相似，所以細胞涂片法無法對其進行準確區分，而病理結果是臨床治療方案選擇的關鍵。胸腔積液細胞塊切片在適當的抗體組合下與免疫組化染色相聯合，可有效鑒別肺腺癌和惡性間皮病變。免疫組化染色法是利用已標記的特異性抗體來檢測細胞內未知抗原。并通過酶所產生的著色反應來顯示細胞的活性、定位及其分布。此方法操作易于掌握，陽性物質定位準確、特異性強。同時，細胞塊的應用彌補了傳統細胞涂片方法單一的缺點，使細胞標本得以保存，具有了連續切片的性質，更利于進行多項檢查。該組研究結果顯示，細胞塊切片結合免疫組化陽性率明顯高于常規細胞學涂片，差異有統計學意義(P ＜0.05)。CK7、MOC－31、CD15、TTF－1、BerEP4、CEA 是肺腺癌較為特異性的抗體，而Calretinin、Desmin、CK5/6、WT－1是間皮性腫瘤較為特異性的抗體，說明細胞塊切片聯合免疫組化染色可顯著提高胸腔積液診斷的陽性率，為臨床治療提供一定的參考依據。

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