彭州地區295例住院患兒呼吸道病毒檢測分析＊

游 莉，廖 均，王有良，張福蓉，劉 瑤，張 亞，劉國會

彭州市人民醫院（彭州 611930）

急性呼吸道感染（acute respiratory infection，ARI）是兒科最常見的疾病之一，其90%以上都是由病毒感染引起［1］。本研究應用呼吸道病毒七聯檢試劑盒測定彭州市人民醫院住院患兒病毒感染情況，旨在分析彭州地區住院患兒呼吸道病毒感染情況，為本地患兒預防保健提供依據。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

選取2014年11月至2015年3月因急性呼吸道感染在我院住院的彭州各鄉鎮社區患兒共295例，其中，男170例，女125例，年齡4d～13歲。所有患兒均符合《諸福棠實用兒科學》第7版診斷標準。患兒各年齡組分布為＜1歲組共91例，1～3歲組共152例，3～7歲組共33例，≥7歲組共19例；患兒各病種分布為急性上呼吸道感染組90例，急性支氣管炎組25例，毛細支氣管炎組10例，肺炎組170例。

1.2 方法

由臨床醫生按規范采集患兒鼻咽部拭子，置入含生理鹽水的加蓋試管中，并于24h內送檢。咽拭子標本合格的判斷標準：樣本的質量取決于其中所含上皮細胞的數量，通過在放大倍數200倍下不同視野進行觀察來評價樣本的質量。合格樣本要求每個視野下至少有2個上皮細胞。陰性結果為在至少含有20個柱狀上皮細胞的樣本中無熒光染色。如果樣本中上皮細胞少于20個則為樣本不合格，此類樣本的檢測結果被視為無效，需重新采樣再進行檢測。

呼吸道七聯檢試劑盒由美國Diagnostic Hybrids公司提供，經過美國FDA和中國CFDA雙重認證，可以檢測7種呼吸道病毒抗原：腺病毒（adenovirus，ADV）、呼吸道合胞病毒（respiratory syncytial virus，RSV）、甲型流感病毒（influenza A，IA）、乙型流感病毒（influenza B，IB）和副流感病毒1、2、3型（parainfluenza 1、2、3，PIV1、PIV2、PIV3）。嚴格按照試劑盒說明書操作。在實驗過程中，不加特異性抗體的待測標本作為自身陰性對照，將陽性質控與自身陰性對照進行相同處理，以防止假陽性和假陰性。

1.3 結果判斷

200 倍顯微鏡下每個視野找到≥2個綠色熒光細胞即為陽性，否則為陰性。陰性細胞被Evans Blue染成紅色。

1.4 統計學方法

采用SPSS 11.5統計軟件對數據進行處理，定性資料以例數結合率描述，對各樣本陽性率進行χ2檢驗。檢驗水準α設定為0.05。

2 結果

2.1 不同疾病患兒病毒檢出情況

295例患兒病毒檢出陽性總數102例，總陽性率34.58%，RSV檢出率最高，急性上呼吸道感染及急性支氣管炎以IB為主，毛細支氣管炎及肺炎以RSV檢出為主。

90例急性上呼吸道感染患兒中病毒陽性21例，陽性率23.33%；25例急性支氣管炎患兒病毒陽性10例，陽性率40.00%；10例毛細支氣管炎患兒病毒陽性6例，陽性率60.00%；170例肺炎患兒病毒陽性65例，陽性率38.24%。不同疾病患兒病毒總陽性率比較，差異有統計學意義（χ2＝9.350，P＝0.025）（表1）。

2.2 不同年齡患兒病毒檢出情況

1歲以下組患兒病毒陽性43例，陽性率47.25%；1～3歲組病毒陽性47例，陽性率30.92%；3～7歲組病毒陽性9例，陽性率27.27%；7歲以上組患兒病毒陽性3例，陽性率15.79%，不同年齡段患兒病毒總陽性率比較，差異有統計學意義（χ2＝9.860，P＝0.002）（表2）。

表1 295例不同疾病患兒呼吸道病毒檢測結果比較

表2 不同年齡段呼吸道病毒檢測結果比較

3 討論

急性呼吸道感染是兒科常見病，其中，下呼吸道感染占兒科住院患兒24.50%～65.20%［2］，多由病毒感染引起。

目前，有多種檢測呼吸道病毒感染的方法，如病毒分離法、電鏡直接檢測病毒顆粒法、病毒核酸檢測法和病毒特異性IgG抗體、IgM抗體檢測等，分離培養技術是公認的病原學檢測的“金標準”，但其耗時較長，尤其對病毒檢測耗時費力，因此美國CDC推薦抗原和核酸檢測為呼吸道病毒感染的主要檢測手段。電鏡操作復雜且設備昂貴，極少被用于臨床；病毒核酸檢測易污染且通量低，有其臨床局限性［3］。人體感染呼吸道病毒后，特異性抗體會不會出現或出現時間受很多因素影響，通常抗體在感染的1～2周才會達高峰，且半衰期較長，至少2個月才會消失［4］，因此抗體檢測不適合用于病毒早期診斷及療效監測。直接免疫熒光法可以檢測病毒抗原，由于具有較高的敏感性和特異性，操作簡單方便，使其在病毒早期診斷中具有無可比擬的優越性，本研究即用該實驗方法對7種呼吸道病毒進行檢測。

本研究發現，呼吸道感染的患兒中，病毒陽性總數102例，總陽性率34.58%，其中，RSV感染陽性率 最 高，達 20.68%，其 次 為 IB（6.10%）、IA（2.71%）、PIV3（2.03%）、ADV（1.69%）、PIV1（1.02%），另有1例為雙重感染（IB和 RSV），PIV2無檢出。RSV檢出最多，與丁金龍及張旭光等［5－6］報道相似。

病毒總感染率在不同年齡組差異均有統計學意義（P＜0.05），＜1歲、1～3歲、3～7歲和≥7歲組病 毒 感 染 總 陽 性 率 分 別 為 47.25%、30.92%、27.27% 和 15.79%，其 中，RSV 陽 性 率 分 別 為35.16%、19.08%、0.00% 和 0.00%，IA 陽性率 分別為2.20%、2.63%、3.03%和5.26%，IB 陽性率分別為2.20%、5.26%、18.18%和10.53%。可見，隨著年齡增加，病毒總感染率逐漸下降，RSV陽性率也逐漸下降，與陸小梅等［7］研究結果相似。PIV1及PIV3在3歲以下患兒陽性率明顯高于3歲以上患兒，可能與患兒的免疫力隨年齡增加而逐漸增強，不易受病毒感染有關；但IA、IB陽性率卻逐漸上升，可能與患兒在學校期間的群體性流感相關，這與肖生平等［8］報道的IA多發生于嬰幼兒且IB在整個年齡段內分布相對均勻結果不同，可能與研究對象存在地域差異以及納入研究的病例數量和季節有關。ADV在3歲以下及3歲以上陽性率差異無統計學意義。

流感病毒分為甲、乙、丙3種類型，乙型流感起病急驟，畏寒發熱，體溫在數小時內可達39～40℃，甚至更高，主要臨床表現有咽干喉痛、干咳、咽部充血和軟腭有濾泡等，可見其主要表現為上呼吸道感染，本試驗結果與之相符，也是以IB感染為主，且集中在3歲以上患兒。RSV是單股負鏈RNA病毒，屬于副黏病毒科肺病毒屬，是引起嬰幼兒下呼吸道疾病中最常見的病原體［9］，嬰幼兒癥狀較重，可有高熱、鼻炎、咽炎及喉炎，以后表現為毛細支氣管炎和肺炎。有研究［10－11］證實，呼吸道合胞病毒是毛細支氣管炎最常見的病原體，本研究也證實，RSV集中于3歲以內患兒，且均為毛細支氣管炎及肺炎。

不同病原體感染的治療藥物選擇是不同的。如果不加鑒別盲目使用藥物，就會導致不合理的抗生素使用，從而導致細菌耐藥增加。呼吸道病毒陽性患兒在對癥治療的同時，加用有針對性的抗病毒藥物，對于病情好轉有明顯作用，因此，早期快速檢測病毒可為臨床提供抗病毒治療的依據，降低患兒痛苦、縮短病程、減少治療費用和對患兒不必要的傷害，同時對于防止抗生素的濫用也有重要意義。在以后的研究中，將增大標本量，同時采樣時間涵蓋一年，以進一步了解本地區兒童上呼吸道疾病病原體情況，掌握兒童病毒感染的病原學流行趨勢，為本地區兒童預防保健工作提供更有力的依據。

［1］倪語星，尚紅.臨床微生物學檢驗［M］.第5版.北京：人民衛生出版社，2012：331.

［2］Yang YH，Jiang ZF，Chen XN，et al.Countercurrent immunoelectrophoresis for diagnosis of acute bacterial pneumonia in Chinese children［J］.Chin Med J，1993，106（2）：105－109.

［3］陸小梅，黎四平，何月敬，等.呼吸道感染患兒1256例多種呼吸道病毒抗原檢測結果分析［J］.實用兒科臨床雜志，2012，27（22）：1733－1735.

［4］王藍鴿.兒童急性呼吸道感染的病原體檢測［J］.中華醫院感染學雜志，2013，23（21）：5360－5361.

［5］丁金龍，應群華，樓秀敏.兒童7項呼吸道病毒感染的病原學分析［J］.中國衛生檢驗雜志，2013，23（15）：3131－3132.

［6］張旭光，盧仕仰，黃從付，等.兒童急性下呼吸道感染2368例病原學分析［J］.中國中西醫結合兒科學，2014，6（6）：543－544.

［7］陸小梅，黎四平，何月敬，等.呼吸道感染患兒1256例多種呼吸道病毒抗原檢測結果分析［J］.實用兒科臨床雜志，2012，27（22）：1733－1735.

［8］肖生平，付四毛，陳燕輝.兒童呼吸道感染病原中病毒的分布［J］.中國感染控制雜志，2013，12（6）：404－408.

［9］陳翊，朱冰，連廣琬，等.2009－2010年廣州地區兒童呼吸道合胞病毒感染分析［J］.廣東醫學，2011，32（10）：1297－1300.

［10］季偉，陳正榮，郭紅波，等.蘇州兒童醫院住院兒童呼吸道病毒的流行特點及與氣候因素的相關性研究［J］.中華預防醫學雜志，2011，45（3）：205.

［11］張海瓊，俞小珍.3496例下呼吸道感染住院兒童的病毒病原學分析［J］.現代預防醫學，2015，42（3）：437－444.