響水地區(qū)豬瘟疫苗免疫效果的監(jiān)測(cè)試驗(yàn)

文│單以軍（江蘇省響水縣畜牧獸醫(yī)總站）

響水地區(qū)豬瘟疫苗免疫效果的監(jiān)測(cè)試驗(yàn)

文│單以軍（江蘇省響水縣畜牧獸醫(yī)總站）

豬瘟俗稱為“爛腸瘟”，是一種急性、發(fā)熱、接觸性傳染傳染病，具有高度傳染性和致死性，是威脅養(yǎng)豬業(yè)的主要傳染病之一。對(duì)豬瘟的預(yù)防需要通過(guò)免疫接種，并適時(shí)開(kāi)展免疫效果的監(jiān)測(cè)。中國(guó)的豬瘟兔化弱毒疫苗已被公認(rèn)為一種安全性良好、免疫原性優(yōu)越、遺傳性穩(wěn)定的弱毒疫苗。但是由于對(duì)豬瘟免疫時(shí)間不準(zhǔn)確，經(jīng)常會(huì)發(fā)生免疫效果不理想的情況。本次試驗(yàn)就是對(duì)響水地區(qū)的豬進(jìn)行母源抗體、首免以及二免后抗體產(chǎn)生的效價(jià)進(jìn)行科學(xué)測(cè)定。

本次試驗(yàn)采用主動(dòng)監(jiān)測(cè)的方法，有針對(duì)性地對(duì)豬瘟抗體開(kāi)展定點(diǎn)監(jiān)測(cè)分析工作，科學(xué)評(píng)估免疫效果，降低疫病發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)，為免疫計(jì)劃的制定和實(shí)施提供基礎(chǔ)依據(jù)。

一、試驗(yàn)材料

1.試驗(yàn)動(dòng)物。本試驗(yàn)選用江蘇省響水縣響水鎮(zhèn)金鳳畜禽養(yǎng)殖場(chǎng)以及六套永順牧業(yè)提供的母豬免疫狀況良好、相同日齡、體重接近、健康狀況較好的10頭同群仔豬作為試驗(yàn)樣品。仔豬都是自繁自養(yǎng)，豬只及相應(yīng)血清樣品依次對(duì)應(yīng)編號(hào)為響水豬1～10、六套豬1～10。其中響水鎮(zhèn)金鳳畜禽養(yǎng)殖場(chǎng)提供的仔豬在響水縣北邊，而六套永順牧業(yè)提供的仔豬在響水縣的南邊。

2.疫苗與試劑。試驗(yàn)選用豬瘟活疫苗，為細(xì)胞源常溫苗，生產(chǎn)批號(hào)為141301，有效期至2016年5月。

表1 仔豬母源抗體檢測(cè)結(jié)果%

表2 仔豬首免后體內(nèi)抗體檢測(cè)結(jié)果%

試劑盒選用豬瘟ELISA抗體檢測(cè)試劑盒（IDEXX），批號(hào)為99-43220-C611，有效期至2015年5月31日。

試驗(yàn)儀器有各種不同規(guī)格的移液器、槍頭若干、抗原抗體反應(yīng)板、無(wú)離子水、加樣槽、RT-600酶標(biāo)儀、打印機(jī)等。檢測(cè)試驗(yàn)在響水縣畜牧獸醫(yī)總站血清學(xué)試驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行。

二、試驗(yàn)方法

仔豬飼養(yǎng)管理及試驗(yàn)過(guò)程均在相同的環(huán)境條件下進(jìn)，抗體監(jiān)測(cè)采用抗體阻斷ELISA血清學(xué)檢測(cè)方法。

試驗(yàn)方法及過(guò)程如下：

1.試驗(yàn)仔豬在28日齡未免疫時(shí)進(jìn)行一次豬瘟母源抗體的測(cè)定。

2.試驗(yàn)仔豬在30～35日齡時(shí)進(jìn)行一次豬瘟免疫，免疫劑量為1頭份/頭。

3.經(jīng)豬瘟疫苗免疫21天后，對(duì)所免疫的仔豬進(jìn)行豬瘟首次免疫抗體水平的測(cè)定。

4.對(duì)經(jīng)過(guò)首免的試驗(yàn)仔豬在65日齡再用豬瘟疫苗進(jìn)行再次強(qiáng)化免疫，免疫劑量仍然為1頭份/頭。

5.二次免疫后再經(jīng)過(guò)21天，采取仔豬二免后的血清樣品，再進(jìn)行免疫抗體的水平監(jiān)測(cè)。

三、試驗(yàn)結(jié)果

1.仔豬母源抗體的檢測(cè)數(shù)據(jù)（見(jiàn)表1）。本試驗(yàn)陰性對(duì)照“－”的平均OD值大于0.50，陽(yáng)性對(duì)照“＋”的阻斷率大于50%，試驗(yàn)成立，結(jié)果有效。本試驗(yàn)測(cè)定仔豬在30日齡時(shí)體內(nèi)所殘留的豬瘟母源抗體水平，檢測(cè)20份血清樣品，響水豬合格5份，合格率達(dá)50%；六套豬合格4份，合格率為40%。平均合格率為45%，

仍有55%的仔豬母源抗體阻斷率低于40%，抗體水平開(kāi)始不能對(duì)仔豬產(chǎn)生保護(hù)作用，但也有個(gè)別仔豬母源抗體水平還較高。

2.仔豬首免豬瘟疫苗后免疫抗體的檢測(cè)數(shù)據(jù)（見(jiàn)表2）。本試驗(yàn)陰性對(duì)照的平均OD值大于0.50，陽(yáng)性對(duì)照的阻斷率大于50%，試驗(yàn)成立，結(jié)果有效。本試驗(yàn)對(duì)經(jīng)豬瘟疫苗免疫21天后，對(duì)所免疫的仔豬進(jìn)行豬瘟首次免疫抗體水平的測(cè)定，檢測(cè)20份血清樣品，響水豬合格7份，合格率達(dá)70%；六套豬合格5份，合格率為50%。平均合格率為60%。仍有40%的仔豬首免抗體阻斷率低于40%，抗體水平不能對(duì)仔豬產(chǎn)生保護(hù)作用。

3.仔豬經(jīng)二免豬瘟疫苗后免疫抗體的檢測(cè)數(shù)據(jù)（見(jiàn)表3）。本試驗(yàn)陰性對(duì)照的平均OD值大于0.50，陽(yáng)性對(duì)照的阻斷率大于50%，試驗(yàn)數(shù)據(jù)成立，試驗(yàn)結(jié)果有效。本次試驗(yàn)是對(duì)經(jīng)豬瘟疫苗二次免疫21天后，對(duì)所免疫的仔豬進(jìn)行豬瘟二次免疫抗體增長(zhǎng)水平的測(cè)定，檢測(cè)20份血清樣品，響水豬合格10份，合格率達(dá)100%；六套豬合格9份，合格率為90%，平均合格率達(dá)到95%。

四、結(jié)論與討論

本試驗(yàn)是對(duì)豬瘟的母源抗體、首免抗體以及經(jīng)二免后所產(chǎn)生的豬瘟抗體的增長(zhǎng)效價(jià)的測(cè)定。

經(jīng)本試驗(yàn)數(shù)據(jù)分析，所得結(jié)論是仔豬的母源抗體在28日齡時(shí)有一半左右的開(kāi)始不能產(chǎn)生保護(hù)作用。秦香榮、伍少欽等對(duì)仔豬母源抗體的消減情況進(jìn)行過(guò)詳細(xì)的試驗(yàn)測(cè)定。

表3 仔豬二免后體內(nèi)抗體檢測(cè)結(jié)果%

他們的試驗(yàn)是選擇一個(gè)免疫狀況比較好的母豬群，仔豬的母源抗體在初期水平比較高，在30日齡左右時(shí)檢測(cè)有一半仔豬的母源抗體開(kāi)始失去了保護(hù)力，最長(zhǎng)的仔豬母源抗體能也持續(xù)到50日齡左右。

母源抗體的存在的確會(huì)對(duì)仔豬豬瘟疫苗的免疫有一定的干擾作用，但是小豬在經(jīng)過(guò)豬瘟疫苗免疫21天以后才能夠檢測(cè)出抗體，在免疫40天以后才能達(dá)到最佳的免疫效果。所以仔豬首次免疫必須在母源抗體沒(méi)有完全消失前進(jìn)行，此時(shí)是最好的首次免疫時(shí)期，也就是在30日齡左右。如果不及時(shí)免疫，會(huì)造成免疫抗體空白時(shí)段，會(huì)給仔豬造成感染的風(fēng)險(xiǎn)。

仔豬在首次免疫后21天，再對(duì)其進(jìn)行免疫抗體的測(cè)定。平均抗體達(dá)標(biāo)率為60%。這說(shuō)明仔豬在進(jìn)行豬瘟首次免疫后，抗體效價(jià)會(huì)較前有一定的增長(zhǎng)，但還不能達(dá)到所期望的免疫要求，還有相當(dāng)部分的仔豬存在感染豬瘟疫病的潛在風(fēng)險(xiǎn)，必須要對(duì)豬群進(jìn)行再次強(qiáng)化免疫。

對(duì)該群仔豬在65日齡后再次進(jìn)行豬瘟疫苗的免疫，免疫21天后進(jìn)行豬瘟抗體的測(cè)定，抗體平均合格率達(dá)到了95%，這達(dá)到了一個(gè)很好的免疫效果，基本消除了該批豬群感染豬瘟的風(fēng)險(xiǎn)。對(duì)一免和二免的豬瘟免疫效果進(jìn)行比較，不難看出，二免以后豬瘟抗體的增長(zhǎng)速度很快。所以，要想獲得良好的豬瘟免疫效果，必須要對(duì)豬進(jìn)行豬瘟二次免疫。

豬瘟對(duì)豬的危害十分嚴(yán)重，我國(guó)規(guī)定必須對(duì)豬實(shí)施豬瘟強(qiáng)制免疫。根據(jù)本次的試驗(yàn)結(jié)果，推薦響水地區(qū)的豬瘟免疫方案為：新生仔豬以及雖已免疫但已過(guò)免疫保護(hù)期的豬使用豬瘟活疫苗進(jìn)行免疫，對(duì)新生仔豬在25～35日齡時(shí)初免，60～70日齡加強(qiáng)免疫1次。散養(yǎng)豬由于免疫條件的限制，可在春季和秋季分別進(jìn)行1次集中免疫。經(jīng)免疫的豬可在免疫21天后進(jìn)行抗體效價(jià)的測(cè)定。