針刺對哮喘模型大鼠呼吸功能的影響

針刺對哮喘模型大鼠呼吸功能的影響

孫娜崔建美劉慧娟林清高秀娟

(河北聯(lián)合大學(xué)中醫(yī)學(xué)院，河北唐山063000)

摘要〔〕目的觀察針刺大椎、風(fēng)門、肺俞對哮喘模型大鼠呼吸功能的影響。方法用卵蛋白誘導(dǎo)哮喘大鼠模型，針刺組針刺大椎、風(fēng)門、肺俞,隔日1次；假針刺組針刺只刺入皮下1 mm，不予行針。2 w后，用卵蛋白激發(fā)氣道高反應(yīng)性，測定大鼠肺功能變化。結(jié)果針刺組大鼠肺順應(yīng)性、彈性阻力、每分通氣量與呼吸率均有所改善，而假針刺組無明顯改善。結(jié)論針刺大椎、風(fēng)門、肺俞能有效減慢呼吸頻率,改善呼吸功能,對哮喘大鼠有明顯的治療作用，而僅刺入皮下的假針刺組則無此效果。

關(guān)鍵詞〔〕針刺；哮喘大鼠模型；肺順應(yīng)性；彈性阻力

中圖分類號〔〕R246.1〔

基金項目：河北省中醫(yī)藥管理局科研計劃項目(2014191；201340701)；河北省自然科學(xué)基金資助項目(C2010001797)

通訊作者：崔建美(1978-)，女，博士，副教授，主要從事針灸教學(xué)及針灸效應(yīng)的研究。

第一作者：孫娜(1981-)，女，碩士，講師，主要從事針灸的基礎(chǔ)與臨床研究。

哮喘是臨床最常見的慢性氣道非特異性炎癥性疾病，發(fā)病原因尚不清楚，從哮喘發(fā)病機(jī)制上尋找特異性防治和根治哮喘的方法一直是人們努力的方向。中醫(yī)尤其是針灸防治哮喘的大量臨床報道療效肯定了其對哮喘的治療作用〔1，2〕。本實驗觀察針刺大椎、風(fēng)門、肺俞對哮喘大鼠肺順應(yīng)性、彈性阻力、每分通氣量、呼吸率的影響。

1實驗材料

1.1實驗動物清潔級雄性SD大鼠40只，體重(120±10)g，由天津市山川紅實驗動物科技有限公司提供〔(SCXK(津)2009-0001)〕;飼養(yǎng)于河北聯(lián)合大學(xué)實驗動物中心，屏障環(huán)境動物實驗設(shè)施中〔(SYXK(冀)2010-0038)〕，環(huán)境溫度20℃～25℃，濕度60%～70%，通風(fēng)良好。飼料由北京華阜康生物科技股份有限公司提供〔(SCXK(京)2009-0008)〕，飲水為超濾系統(tǒng)處理的無菌水。實驗動物采取“3R”原則進(jìn)行飼養(yǎng)及使用，并給予人道主義的關(guān)懷。

1.2實驗儀器及試劑medlab生物信號采集處理系統(tǒng)(南京美易科技有限公司)；TDL-5-A型離心機(jī)(上海安亭科學(xué)儀器廠)；華佗牌0.35 mm×25 mm毫針。卵蛋白(Sigma公司，批號A5378)； Al(OH)3凝膠(天津歐博凱化工有限公司，批號：20110711)。

1.3分組實驗大鼠隨機(jī)分為空白對照組(A組)、哮喘模型組(B組)、針刺組(C組)、假針刺組(D組)共4個實驗組，每組10只。

1.4哮喘模型制作與針刺方法B組、C組、D組一次性腹腔注射含卵蛋白1 mg和Al(OH)310 mg的生理鹽水1 ml,2 w后B組、C組、D組于頸外靜脈內(nèi)注射卵蛋白(5 mg/kg)激發(fā)哮喘發(fā)作〔3〕。C組自造模之日起,針刺大椎、肺俞(雙側(cè))、風(fēng)門(雙側(cè)),用75%酒精消毒后刺入8 mm，平補(bǔ)平瀉，每次留針20 min,每隔5 min行針1次(以200次/min捻轉(zhuǎn)速度捻針20次為行針1次),隔日針刺1次,共針刺7次。D組針刺穴位同C組，只刺入皮下1 mm，不予行針，留針20 min。

1.5呼吸功能的檢測大鼠腹腔注射10%的水合氯醛(3.5 ml/kg)麻醉后，用橡皮筋捆綁四肢后仰臥位固定于實驗臺上，剪開頸部皮膚,暴露左側(cè)頸外靜脈，用靜脈留置針行頸靜脈穿刺并固定,用于注射卵蛋白。暴露氣管和食管,剪斜口,插入氣管插管和食管插管,用手術(shù)線扎緊固定,連接呼吸流量測定儀和血壓換能器,連接計算機(jī),打開medlab生物信號采集處理系統(tǒng)，準(zhǔn)備測定。各組大鼠穩(wěn)定5 min后,連續(xù)采樣3 min，將其平均值作為激發(fā)前正常數(shù)據(jù)，然后以5 mg/kg體重為標(biāo)準(zhǔn)，B組、C組、D組于頸外靜脈內(nèi)注射卵蛋白，進(jìn)行激發(fā)。激發(fā)后，連續(xù)采樣30 min,由計算機(jī)系統(tǒng)分析計算肺順應(yīng)性、氣道彈性阻力、每分通氣量與呼吸率。

1.6統(tǒng)計學(xué)方法采用SPSS13.0軟件進(jìn)行獨(dú)立樣本t檢驗、單因素方差分析及LSD檢驗。

2結(jié)果

2.1 大鼠哮喘模型的復(fù)制結(jié)果見圖1、圖2。卵蛋白激發(fā)前，A組與B組肺順應(yīng)性(P=0.605)與氣道彈性阻力(P=0.05)無明顯差異。卵蛋白激發(fā)后,B組大鼠氣道彈性阻力上升(P=0.00)、肺順應(yīng)性下降(P=0.00)。

2.2針刺對哮喘大鼠肺順應(yīng)性、氣道彈性阻力、每分通氣量與呼吸率的影響見表1。B組與C組相比肺順應(yīng)性(P=0.00)、每分通氣量(P=0.00)增加，氣道彈性阻力(P=0.00)減小，呼吸率(P=0.00)減慢。C組與B組相比肺順應(yīng)性(P=0.20)、氣道彈性阻力(P=0.90)、每分通氣量(P=0.14)、呼吸率(P=

0.91)無明顯改變。針刺大椎、風(fēng)門、肺俞能有效減慢呼吸頻率,改善呼吸功能,對哮喘大鼠有明顯的治療作用，而假針刺組則無此明顯改變。

-3、-1表示卵蛋白激發(fā)前3 min和1 min，下圖同 圖1　卵蛋白激發(fā)對哮喘模型大鼠肺順應(yīng)性的影響

圖2　卵蛋白激發(fā)對哮喘模型大鼠氣道彈性阻力的影響

組別肺順應(yīng)性(ml/cmH2O)彈性阻力(cmH2O/ml)每分通氣量(ml)呼吸率(次/min)A組9.497±0.3150.267±0.0130.129±0.01878.1±3.9B組6.363±0.4991)0.546±0.0131)0.086±0.0111)3)130.1±5.11)C組8.4±0.3372)0.277±0.0132)0.126±0.0232)81.9±2.22)D組6.975±0.4371)3)0.572±0.0091)3)0.085±0.0111)3)129.9±5.21)3)F/P值122.330/0.00089.94/0.00021.788/0.000452.007/0.000

與A組比較：1)P<0.05，與B組比較：2)P<0.05；與C組比較：3)P<0.05

3討論

支氣管哮喘屬中醫(yī)的哮證,喘證,咳嗽,肺脹等范疇，發(fā)病機(jī)制復(fù)雜,但廣泛氣道狹窄是產(chǎn)生哮喘臨床癥狀最重要的基礎(chǔ)，其主要表現(xiàn)為氣道阻力增加和肺順應(yīng)性下降。針刺選取大椎、風(fēng)門、肺俞3個穴位,大椎為督脈、手足三陽經(jīng)交會穴位,風(fēng)門系足太陽膀胱經(jīng)和督脈交會穴，肺俞為足太陽膀胱經(jīng)之背俞穴。 三穴在治療哮喘時常配伍應(yīng)用且屢收奇效〔4〕。本實驗結(jié)果說明針刺可以改善哮喘大鼠的呼吸道狹窄情況，為針刺治療哮喘的機(jī)制之一。假針刺對于哮喘大鼠無治療效果，說明針刺得氣是針灸起到治療作用的關(guān)鍵，其機(jī)制有待于進(jìn)一步研究。

4參考文獻(xiàn)

1韓健.針刺魚際穴對支氣管哮喘患者肺功能的影響及即刻平喘效應(yīng)觀察〔J〕.中國針灸，2012；32(10)：891-4.

2譚程，趙吉平，張昶.近十年針刺治療支氣管哮喘的臨床及實驗研究現(xiàn)狀〔J〕.針刺研究，2011；36(4)：302-12.

3崔龍?zhí)O,楊永清,馬淑蘭,等.過敏性哮喘大鼠模型的制備〔J〕.上海實驗動物科學(xué),2000；20(2):69-71.

4邵素菊，權(quán)春分，邵素霞，等.一腔熱血育桃李，妙手回春濟(jì)黎民〔J〕.中國針灸，2010；30(8)：687-91.

〔2013-11-06修回〕

(編輯趙慧玲/曹夢園)