CD64感染指數和降鈣素原在老年慢性阻塞性肺病急性加重患者細菌感染中的診斷價值

·呼吸·消化系統疾病·

CD64感染指數和降鈣素原在老年慢性阻塞性肺病急性加重患者細菌感染中的診斷價值

朱建俊1姚一楠周建婭周建英

(浙江大學醫學院附屬第一醫院呼吸內科，浙江杭州310003)

摘要〔〕目的探索CD64感染指數聯合降鈣素原(PCT)對老年慢性阻塞性肺病急性加重(AECOPD)患者細菌感染的診斷價值。方法66例AECOPD患者分為細菌感染組38例和非細菌感染組28例，另設健康對照組30例。采用流式細胞術檢測治療前后各組外周血中粒細胞表面CD64表達強度，獲得CD64 感染指數，并通過免疫熒光雙抗體夾心法測定血清PCT水平。結果細菌感染組CD64指數和PCT水平均顯著高于非細菌感染組和對照組(P<0.05)；非細菌感染組和對照組差異無統計學意義(P>0.05)；細菌感染組治療后CD64感染指數和PCT水平均顯著低于治療前(P<0.05)；治療后CD64感染指數和PCT水平與對照組差異無統計學意義(P>0.05)。結論CD64 感染指數聯合PCT可為老年AECOPD患者細菌感染的診斷和鑒別提供一定的依據，有助于指導抗菌藥物的合理應用。

關鍵詞〔〕慢性阻塞性肺疾病急性加重；CD64；降鈣素原

中圖分類號〔〕R563〔

基金項目：浙江省中醫藥科學研究基金資助(No.2011ZB068);教育部2012年度高等學校博士學科點專項科研基金項目(No.20120101110008)

通訊作者：周建英(1956-)，女，主任醫師，醫學碩士，主要從事重癥呼吸道感染、細菌耐藥及機制研究。

1杭州市余杭區第二人民醫院呼吸內科

第一作者：朱建俊(1981-)，男，主治醫師，在讀碩士，主要從事呼吸病感染學研究。

慢性阻塞性肺疾病急性加重(AECOPD)的誘因主要有上呼吸道病毒感染、氣管-支氣管感染及空氣污染等〔1～3〕，其中細菌感染占AECOPD發生的40%～50%〔4〕。由于病原學資料較滯后，臨床上對于AECOPD仍然以經驗抗感染治療〔5〕。因此，確定反映AECOPD患者存在細菌感染的標志物對于抗感染治療有一定的指導意義。目前臨床中常用的指標有白細胞計數(WBC)、中性粒細胞百分比(N%)、紅細胞沉降率(ESR)、C反應蛋白(CRP)和降鈣素原(PCT)等，除PCT外均為非特異性指標。PCT是目前常用的診斷AECOPD細菌感染的一個重要炎癥指標〔1，3〕。近年來研究發現細菌感染時中性粒細胞CD64 表達顯著增加，其特異性和敏感性高于其他炎性反應指標，在感染性疾病診斷中具有一定的應用價值〔6，7〕。PCT和CD64感染指數均可作為診斷感染性疾病的標志物，但兩者在臨床應用中的相互關系，尚缺少相關研究。本文通過測定老年AECOPD患者中CD64指數與PCT水平，探討兩者在AECOPD細菌感染中的診斷價值。

1資料與方法

1.1一般資料2013年1月至2014年1月我院66例老年AECOPD患者，COPD診斷和分期以中華醫學會呼吸病學分會制定的COPD診治指南〔8〕為標準。排除標準：①X線胸片檢查存在肺炎；②入選前4 w內使用抗生素；③COPD加重病程已>5 d；④呼吸系統以外的其他部位存在細菌感染。該研究獲得倫理委員會批準。男38例，女28例，平均年齡(66.5±3.5)歲，根據痰中下呼吸道潛在病原菌濃度≥107cfu/ml為AECOPD下呼吸道細菌感染的診斷標準〔9〕，分為感染組(外周血WBC≥10×109/L、中性粒細胞百分比≥75%)和非感染組(外周血WBC<10×109/L、中性粒細胞百分比<75%)；對照組為30例健康體檢者，男18例，女12例，平均年齡(65.3±6.2)歲。3組年齡、性別、吸煙均無差異(P>0.05)，感染組和非感染組肺功能無差異(P>0.05)。見表1。所有AECOPD患者入院時即刻采血、留痰，然后再給予吸氧、止咳化痰、抗感染等常規治療。

表1　各組一般資料比較 ± s)

FEV1：1 s用力呼氣容積；TVC：用力肺活量

1.2誘導痰處理采用超聲霧化吸入高滲氯化鈉溶液誘導痰液，對合格痰標本涂片(每個低倍視野白細胞>25個，鱗狀上皮細胞<10個)進行定量培養。

1.3CD64感染指數取流式檢測管2支，分別加入20 μl CD64-FITC單克隆抗體(美國貝克曼庫爾特有限公司)和同型對照，后加100 μl抗凝全血，混勻后于室溫暗處15 min，溶血10 min，置流式細胞儀檢測(美國貝克曼庫爾特Navios流式細胞儀)。每份樣本計數10 000個以上細胞，以淋巴細胞為內部陰性對照，進行 CD64 感染指數(粒細胞 CD64 平均熒光強度/淋巴細胞 CD64 平均熒光強度)的計算。

1.4PCT檢測采用免疫熒光雙抗體夾心法測定(試劑盒由廣州萬孚生物技術股份有限公司生產)，以0.5 ng/ml為PCT臨界值，大于臨界值為陽性。

1.5統計學方法采用SPSS19.0統計軟件進行χ2檢驗、t檢驗和方差分析。

2結果

2.1痰細菌學結果38例痰培養出病原菌，且痰中病原菌濃度≥107cfu/ml。流感嗜血桿菌9例、副流感嗜血桿菌和肺炎鏈球菌各7例、卡他莫拉菌5例、金黃色葡萄球菌4例、綠膿桿菌2例、肺炎克雷伯菌3例、鮑曼不動桿菌1例。

2.2治療前各組CD64感染指數和PCT水平感染組 CD64和PCT水平均顯著高于非感染組和對照組(P=0.003 4，0.004 2)；非感染組和對照組無差異(P>0.05)。見表2。

表2　各組治療前CD64感染指數和PCT水平

與非感染組、對照組相比:1)P<0.01

2.3感染組治療前、后CD64感染指數和PCT水平感染組治療后，CD64感染指數(1.338±0.151)和PCT水平(0.512±0.135)均顯著低于治療前(P=0.003 7、0.002 3)；治療后CD64感染指數、PCT水平與對照組無統計學差異(P>0.05)。

3討論

COPD主要特征為氣流受限，且氣流受限不完全可逆呈進行性發展〔10〕。AECOPD是指在COPD發展過程中出現的急性事件，其中以細菌感染為主，但仍有1/3的AECOPD患者急性加重的因素尚不明確，所以并不是所有的AECOPD患者需要進行抗菌治療〔11〕。臨床常規實驗室檢測指標WBC、ESR、CRP 等特異性不強，在感染性疾病、非感染性炎癥反應、自身免疫性等疾病中均可明顯升高，是非特異性炎癥指標；痰液細菌培養雖然比較準確，但是檢測過程耗費時間長，影響因素多，病原學資料難以獲取，不能成為衡量細菌感染的金標準。在實際臨床中，由于難以獲得準確的病原學資料來有效判斷是否有細菌感染，目前臨床上對于AECOPD仍然以經驗進行抗感染治療〔5〕。臨床上迫切需要尋找一個能夠準確判斷AECOPD患者是否存在細菌感染的生物學標志物，從而指導抗菌藥物合理使用。

PCT是一種無激素的糖蛋白，正常情況下其含量較少，由甲狀腺C細胞或其他內分泌細胞的前PCT水解產生；當發生細菌感染和膿毒血癥時，PCT 則由甲狀腺以外的器官組織產生，含量顯著升高，是有價值的炎癥標志物〔12〕。CD64是IgG Fc段的高親和受體，正常情況下CD64在中性粒細胞表面低水平表達，當受細菌細胞壁的成分脂多糖和粒細胞集落刺激因子及γ-干擾素等刺激后會導致其高表達〔13〕。研究〔14〕表明CD64在敗血癥發生后24 h之內即可明顯升高，對敗血癥的診斷具有較高的特異性和敏感性，可作為敗血癥早期診斷的檢測指標。Icardi等〔15〕研究指出在非感染性疾病及病毒感染時中性粒細胞CD64指數不高，而在細菌感染時明顯升高，是一種簡單而有效的識別細菌感染的臨床檢測指標。研究表明CD64在感染性疾病的診斷中有較高的敏感性(84%～97%)和特異性(78%～ 92%)〔16，17〕，但CD64指數的測定也和其他檢測方法一樣存在假陽性的問題，CD64指數不能完全替代其他實驗室檢測方法。本研究發現，在AECOPD細菌感染患者中，血清CD64和PCT均升高，都可以作為診斷細菌感染的標志，兩者聯合檢測，可能會提高診斷AECOPD細菌感染的準確率。

4參考文獻

1湯靜，賽雙橋，吳卓鴻，等.血清降鈣素原和C-反應蛋白對AECOPD細菌感染的診斷價值〔J〕.疑難病雜志，2013；12(10)：756-8.

2Sethi S.Pathogenesis and treatment of acute exacerbations of chronic obstructive pulmonary disease〔J〕.Semin Respir Crit Care Med，2005；26(2)：192-203.

3孫文舫，郭艷華，杜香提.血清降鈣素原在不同病原體肺感染患者外周血表達的差異及臨床意義〔J〕.疑難病雜志，2011；10(12)：940.

4常春，姚婉貞，陳亞紅，等.血清降鈣素原對慢性阻塞性肺疾病加重期患者下呼吸道細菌感染的診斷價值〔J〕.北京大學學報(醫學版)，2006；4(4)：389-92.

5周慶濤，賀蓓.慢性阻塞性肺疾病急性加重期的抗菌藥物應用COPD指南解讀〔J〕.中國藥物應用與監測，2011；8(2)：65-8.

6王賢，張葵，夏永泉.CD64指數對臨床細菌感染患者的診斷價值〔J〕.中華實用診斷與治療雜志，2011；25(10)：1035-6.

7陳雪禮，李觀華，湯金萍，等.流式細胞術檢測中性粒細胞CD64在感染性疾病中的診斷價值〔J〕.國際檢驗醫學雜志，2013；34(22)：2999-3000.

8中華醫學會呼吸病學分會慢性阻塞性肺疾病學組.慢性阻塞性肺疾病診治指南(2013年修訂版)〔J〕.中華結核和呼吸雜志，2013；36(4)：255-64.

9Vander Valk P，Monninkhof E，Vander Palen J，etal.Clinical predictors of bacterial involvement in exacerbations of chronic obstructive pulmonary disease〔J〕.Clin Infect Dis，2004；39：980-6.

10Vestbo J，Hurd SS，Agustí AG，etal.Global strategy for the diagnosis，management and prevention of chronic obstructive pulmonary disease：GOLD executive summary〔J〕.Am J Respir Crit Care Med，2013；187(4)：347-65.

11Butorac-Petanjek B，Parnham MJ，Popovic-Grle S.Antibiotic therapy for exacerbations of chronic obstructive pulmonary disease(COPD)〔J〕.J Chemother，2010；22(5)：291-7.

12Rutshmann OT，Cornur J，Poletti PA，etal.Should pulmonary embolism be suspected in exacerbation of chronic obstructive pulmonary disease〔J〕.Thorax，2007；62(2)：121-5.

13Tokman S，Schuetz P，Bent S.Procalcitonin-guided antibiotic therapy for chronic obstructive pulmonary disease exacerbations〔J〕.Exp Rev Anti Infect Ther，2011；9(6)：727-35.

14Faix JD.Established and novel biomarkers of sepsis〔J〕.Biomarker Med，2011；5(2)：117-30.

15Icardi M，Erickson Y，Kilborn S，etal.CD64 index provides simple and predictive testing for detection and monitoring of sepsis and bacterial infection in hospital patients〔J〕.J Clin Microbiol，2009;47(12)：3914-9.

16Daryapeyma A，Pedersen G，Laxdal E，etal.Neutrophils CD64 as a marker for postoperative infection：a pilot study〔J〕.Eur J Vase Endovase Surg,2009;38(1)：100-3.

17杜方兵，楊萬春，雷祖寶，等.中性粒細胞CD64指數檢測對AECOPD抗生素應用的指導價值〔J〕.安徽醫藥，2013;17(4)：596-8.

〔2014-02-15修回〕

(編輯苑云杰)