香蕉皮多酚與辛伐他汀對高脂血癥大鼠血脂水平的影響

香蕉皮多酚與辛伐他汀對高脂血癥大鼠血脂水平的影響

朱開梅趙文鵬趙磊駱彩珍顧生玖

(桂林醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院，廣西桂林541004)

摘要〔〕目的以高脂血癥大鼠為模型比較香蕉皮多酚、辛伐他汀降血脂及抗氧化作用。方法雄性SD大鼠灌胃給予高脂飼料制備高脂血癥大鼠模型。造模的同時,給予香蕉皮多酚、辛伐他汀,連續(xù)給藥40 d后測定總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、丙二醛(MDA)的含量,超氧化物歧化酶(SOD)的活性。結(jié)果當(dāng)香蕉皮多酚濃度低于60 mg/kg，辛伐他汀降低血清中的TC、TG的能力、抗氧化能力顯著優(yōu)于香蕉皮多酚組(P<0.05)，當(dāng)香蕉皮多酚濃度達到120 mg/kg，香蕉皮多酚降低血清中的TC的能力顯著優(yōu)于辛伐他汀組，抗氧化能力顯著優(yōu)于辛伐他汀(P< 0.05)。結(jié)論香蕉皮多酚對高脂血癥模型大鼠具有降低血脂及抗氧化的雙重作用。

關(guān)鍵詞〔〕香蕉皮多酚；辛伐他汀；高脂血癥；抗氧化

中圖分類號〔〕R969〔文獻標(biāo)識碼〕A〔

基金項目：廣西科技特派員專項(129825-21)；廣西教育廳項目(201202ZD065)；桂林市科技攻關(guān)項目(20110106-5；20120105-5;20120105-16;20120105-8)

通訊作者：顧生玖(1965-), 男，博士，教授，碩士生導(dǎo)師，主要從事心血管病理學(xué)及藥物防治研究。

第一作者：朱開梅(1967-)，女，碩士，教授，碩士生導(dǎo)師，主要從事天然藥物分析的研究。

高脂血癥可導(dǎo)致動脈粥樣硬化(AS)，繼而引發(fā)冠心病、腦卒中、心肌梗死等病癥，是危害人類健康的頭號殺手。從植物中尋找具有降血脂作用的天然化合物，并研究其作用機制對于防治高脂血癥具有重要意義〔1～3〕。目前公認(rèn)的最有效降血脂藥物為辛伐他汀，因具有對肝臟和肌肉的毒副作用限制了它的應(yīng)用。研究表明，植物多酚具有抗腫瘤、抗氧化、抗AS、防治冠心病與腦卒中等心腦血管疾病以及抗菌等多種生理功能〔4，5〕，可提高機體內(nèi)紅細胞超氧化物歧化酶(SOD)的活性，降低血清中脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物丙二醛(MDA)的水平，并可降低總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)含量，促進高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)的生成，減少脂質(zhì)在血管內(nèi)膜的沉積，增加自由基清除及機體抗氧化能力，繼而抑制血管內(nèi)膜的增生及斑塊的形成，發(fā)揮抗AS的作用。香蕉皮多酚作為一種植物多酚，可能在調(diào)節(jié)血脂方面具有重要作用，但香蕉皮多酚是否能降低心血管病發(fā)病風(fēng)險國內(nèi)外研究較少。本研究通過采用高脂飼料法建立大鼠高脂血癥模型,探討香蕉皮多酚對高脂血癥的影響及其機制。

1材料與方法

1.1實驗動物選用桂林醫(yī)學(xué)院實驗動物中心提供的健康SPF級雄性SD大鼠60只，體重(190±20)g，實驗動物生產(chǎn)許可證號：SCXK桂2007-0001。實驗環(huán)境溫度(22±2)℃，相對濕度(50±10)%。

1.2高脂飼料配方3%膽固醇，10%豬油，0.2%丙基硫氧嘧，0.5%膽酸鈉，3.3%白糖，83%基礎(chǔ)飼料。由桂林醫(yī)學(xué)院實驗動物中心制備。

1.3藥品與試劑香蕉皮多酚由本實驗室從香蕉皮中提取〔6〕。TG試劑盒(批號650340-01)，TC試劑盒(批號645487-01)，HDL-C試劑盒(批號648783-01)，均由上海羅氏診斷產(chǎn)品有限公司提供； LDL-C試劑盒(批號11-09089)，由北京九強生物技術(shù)股份有限公司提供，辛伐他汀片(批號20120319)，由廣東彼迪藥業(yè)有限公司提供， SOD測試盒(批號200011916)、T-AOC(批號200011420)、MDA測試盒(批號20011703),均為南京建成生物工程研究所提供；丙硫氧嘧啶(批號100901)，由南通精華制藥股份有限公司生產(chǎn)。

1.4儀器Cobas501全自動生化分析儀(上海羅氏診斷產(chǎn)品有限公司)；BT423S型電子天平(Sartorius AG,德國賽多利斯股份公司)；LegendRT-Plus型臺式離心機(美國Thermo Fisher Sorvall)。

1.5方法

1.5.1動物分組與給藥SD大鼠先適應(yīng)性飼養(yǎng)1 w，隨機分為6組,每組10只，正常對照組、模型組、辛伐他汀組、香蕉皮多酚低劑量組，香蕉皮多酚中劑量組、香蕉皮多酚高劑量組。正常對照組喂食普通飼料，其余5組每天給予高脂飼料造模，造模的同時給藥干預(yù)。給藥劑量分別為辛伐他汀組10 mg/kg，低、中高劑量香蕉皮多酚組給予高脂飼料，并灌胃給予香蕉皮多酚(30,60,120 mg/kg)，每天給藥1次，灌胃前后1 h禁食禁水，連續(xù)給藥40 d。

1.5.2血液和組織樣本的采集末次給藥和給予高脂飼料后，所有大鼠禁食不禁水過夜，然后眼眶靜脈取血立即離心分離10 min(3 000 r/min)，取血清，用酶比色法測定相關(guān)指標(biāo)。將麻醉后的大鼠仰臥固定于固定板上，沿大鼠腹部中部剖開，小心分離主動脈弓、胸、腹主動脈，冷生理鹽水沖洗，然后將與心臟連接的升主動脈、主動脈弓(包括主動脈弓三大主要分支近段)及降主動脈段、腹主動脈段立即放入10%的中性甲醛溶液中固定。

1.5.3血清TC、TG 、HDL-C的測定TG檢測：GPO-PAP法；TC檢測：COD-CE-PAP法；HDL-C檢測：PTA-Mg2+沉淀法，按試劑盒操作說明測定，試劑盒為中生北控生物科技股份有限公司生產(chǎn)。

1.5.4動脈血管組織病理學(xué)觀察將動脈血管組織取出，流水沖洗24 h。然后按常規(guī)方法進行70%～100%梯度酒精脫水、二甲苯透明、石蠟包埋、切片(切片厚度5 μm)、貼片、烤片后，用二甲苯脫蠟、100%～70% 梯度酒精復(fù)水、蘇木精染色、70%鹽酸酒精分色、伊紅復(fù)染后，70%～100%梯度酒精脫水、二甲苯透明、中性樹膠封片，最后鏡檢動脈血管組織結(jié)構(gòu)病變。

1.6統(tǒng)計學(xué)方法采用SPSS18.0軟件進行單因素方差分析。

2結(jié)果

2.1香蕉皮多酚、辛伐他汀對大鼠血脂影響與正常對照組比較,模型組大鼠血清中T G、TC 及LDL-C含量顯著升高(P< 0.05),而HDL-C 含量顯著降低(P< 0.05),說明大鼠高脂血癥模型造模成功。與模型組比較,香蕉皮多酚組、辛伐他汀組TG、TC 及LDL-C 含量顯著降低(P<0.05),而HDL-C含量顯著升高(P<0.05)。香蕉皮多酚組與辛伐他汀組比,香蕉皮多酚組能顯著降低血清中TG 、TC、LDL-C 含量(P<0.05);而HDL-C含量顯著升高(P<0.05)。見表1。

組別TG(mmol/L)TC(mmol/L)HDL-C(mmol/L)LDL-C(mmol/L)SOD(U/ml)T-AOC(U/ml)MDA(mmol/ml)正常對照組0.56±0.132.09±0.201.16±0.221.74±0.18188.94±7.8711.29±0.6822.89±0.76模型組1.14±0.211)3.06±0.241)0.89±0.111)2.97±0.121)150.09±11.521)7.40±0.711)31.61±2.251)辛伐他汀組0.79±0.101)2)2.56±0.231)2)1.06±0.131.97±0.171)2)180.36±6.821)2)8.80±0.801)2)24.96±0.501)2)香蕉皮多酚低劑量組0.98±0.151)2)2.90±0.251)0.92±0.141)2.45±0.361)2)168.87±6.781)2)7.93±0.651)27.58±0.771)2)香蕉皮多酚中劑量組0.81±0.131)2)2.62±0.261)2)1.07±0.172)1.95±0.201)2)169.44±3.511)2)9.47±0.871)2)24.88±0.471)2)香蕉皮多酚高劑量組0.61±0.172)2.15±0.222)1.37±0.331)2)1.44±0.241)2)196.98±11.161)2)12.11±0.861)2)20.00±0.881)2)

與正常對照組比較：1)P<0.05；與模型組比較：2)P<0.05

2.2大鼠動脈血管壁HE染色光鏡觀察結(jié)果見圖1，正常對照組大鼠動脈血管壁結(jié)構(gòu)清晰，內(nèi)壁光滑，厚度適中，內(nèi)皮細胞及平滑肌細胞排列規(guī)則，輪廓清晰，未見病理改變；模型組大鼠動脈血管內(nèi)膜局部增厚不連續(xù)，有皺褶，部分可見脫落，中層平滑肌細胞增生，排列紊亂，形態(tài)多樣，并可見泡沫細胞形成；與模型組相比，低、中劑量香蕉皮多酚組大鼠動脈血管壁病變較輕，可見脂質(zhì)沉積，內(nèi)膜稍增厚，平滑肌增生，高劑量香蕉皮多酚組大鼠動脈血管壁已基本正常，平滑肌細胞輕度增生，排列較為整齊，未見泡沫細胞形成與內(nèi)皮損傷。

2.3香蕉皮多酚、辛伐他汀對大鼠抗氧化能力的影響與正常對照組比較，模型組大鼠血清中MDA 含量顯著升高(P< 0.05)，血清SOD 、T-AOC活性顯著降低(P< 0.05);與模型組比較，香蕉皮多酚各劑量組的SOD 與模型組呈顯著差異(P<0.05)；香蕉皮多酚各劑量組與正常對照組之間也存在顯著差異(P<0.05)，說明香蕉皮多酚可以有效提高SOD的活性，并且隨著香蕉皮多酚劑量的增加SOD 酶活力、T-AOC活性呈上升趨勢，并且劑量越高，效果越好。香蕉皮多酚各劑量組與模型組之間也存在顯著差異(P<0.05)，隨著香蕉皮多酚劑量的增加，MDA含量呈下降趨勢，說明香蕉皮多酚各劑量組可以有效降低大鼠血清中MDA 的含量，并且劑量越高，效果越好。與模型組相比，辛伐他汀組亦能顯著地降低大鼠血清中MDA含量，升高血清中SOD 、T-AOC活性。各香蕉皮多酚組兩兩比較，除外低、中劑量組SOD值無差異(P>0.05)，余者差異均顯著(P<0.05)。見表1。

正常對照組(×400)

模型組(×200)

辛伐他汀組(×200)

香蕉皮多酚低劑量組(×200)

香蕉皮多酚中劑量組(×400)

香蕉皮多酚高劑量組(×200)

圖1香蕉皮多酚對大鼠動脈血管壁組織病變的影響(HE)3討論

植物多酚是多羥基酚類化合物的總稱，主要存在于植物體的皮、根、葉、殼和果肉中。大量的流行病學(xué)研究表明，植物多酚具有多種生理功能，如抗氧化以、抗菌消炎、抗腫瘤、調(diào)節(jié)血脂、抗AS等方面的作用〔7〕，其中石榴皮多酚〔8〕、葡萄籽多酚〔9〕、茶多酚〔10〕等均可改善脂質(zhì)代謝紊亂，提高機體內(nèi)SOD的活性，降低血清中TC、TG、LDL-C含量，促進HDL-C的生成。王振宇等〔11〕從蘋果多酚調(diào)節(jié)脂肪代謝的角度研究其減肥降脂預(yù)防AS發(fā)生的功能及可能的機制。結(jié)果表明：蘋果多酚可以降低血清TC、TG 和LDL-C含量，提高HDL-C的含量，具有降血脂預(yù)防AS發(fā)生的功能，蘋果多酚還可以提高機體SOD 活性，降低MDA 的含量。

高脂血癥是AS發(fā)生的主要危險因素，也是誘發(fā)心腦血管疾病的重要因素，血清中TC、TG 和LDL-C 含量升高，HDL-C 含量降低，可導(dǎo)致動脈內(nèi)膜損傷，通透性增高，加速脂質(zhì)在血管內(nèi)皮下沉積，而血脂升高時，氧自由基大量產(chǎn)生，脂質(zhì)過氧化作用增強，產(chǎn)生大量的MDA，使SOD 活性降低，促進AS的發(fā)生和發(fā)展〔1〕。辛伐他汀為新型調(diào)血脂藥，目前在臨床上廣泛用于高脂血癥、冠心病等的治療〔12〕，香蕉皮的降血脂只見本實驗室前期報道〔6〕，但辛伐他汀與香蕉皮多酚降血脂及抗氧化能力的比較研究鮮見報道。說明當(dāng)香蕉皮多酚的濃度達到一定劑量時，香蕉皮多酚具有良好的降血脂和抗氧化的能力。

綜上所述，香蕉皮多酚可能通過提高機體內(nèi)抗氧化酶SOD的活性，來降低血清TC、TG、LDL-C 的含量，促進HDL-C的生成，減少脂質(zhì)在血管內(nèi)膜的沉積，增加自由基清除及增加機體抗氧化能力，通過調(diào)節(jié)脂肪代謝，在防治高脂血癥及動脈硬化的發(fā)生，具有良好的應(yīng)用前景。香蕉皮多酚是從常見可食水果香蕉皮中提取出來的，安全、無毒，所以其有望成為一種新型廣泛使用的調(diào)血脂，預(yù)防AS的保健食品。

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〔2013-06-15修回〕

(編輯趙慧玲)