三種梅毒血清學試驗方法檢測梅毒螺旋體的結果對比分析

摘要：目的 觀察三種梅毒血清檢驗方法對梅毒的檢出效果。方法 收集60例梅毒患者血清標本，將其隨機分為三組，A組、B組、C組，各20例。A組選擇酶聯免疫吸附試驗（ELISA）檢驗法；B組選擇甲苯胺紅不加熱血清反應素試驗（TRUST）進行檢驗；C組選擇梅毒螺旋體明膠凝集試驗（TPPA）進行檢驗，分析比較三組標本的檢出結果。結果 C組陽性檢出率最高為100%，明顯高于A組的85.0%與B組的90.0%。結論 TPPA的特異性與敏感性均高于另兩種檢驗法，適用于檢測疑似陽性標本，但三種方法各有優劣，應根據具體情況選擇合適的檢測方法。

關鍵詞：梅毒；ELISA；TRUST；TPPA；檢驗效果

梅毒是一種最為嚴重的性傳播疾病，梅毒螺旋體（treponema pallidum，TP）是主要的致病原因。TP會侵犯皮膚黏膜及相關神經、心血管、骨骼等重要組織器官，進而造成慢性病變，嚴重影響到患者的健康[1]。目前，主要依靠實驗室檢查結果對梅毒進行篩查與確診。為合理選擇檢測方法，本次研究對ELISA、TRUST、TPPA三種檢測方式進行對比研究，現將情況報告如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 從2012年6月～2014年12月本院發現的梅毒患者中選取60例，均滿足梅毒檢驗標準GB15974而確診。其中，男27例，女33例；年齡在25～53歲，平均年齡為（35.2±2.4）歲。將患者隨機分為三組，A組、B組、C組，每組20例。比較分析三組的一般資料，發現差異不大（P>0.05），可進行比較。

1.2方法

1.2.1試劑來源 TRUST試劑為上海榮盛生物技術有限公司生產，ELISA試劑由上海科華生物工程股份有限公司生產，TPPA試劑則是日本富士瑞比歐株式會社生產的產品。上述試劑均通過衛生部部門的批檢，確認合格后使用。

1.2.2檢驗方法 ①A組：本組血清標本嚴格按照ELISA試劑盒說明書進行操作；②B組：本組采用TRUST試驗進行檢測，方法是把VDRL抗原與含有特制的甲苯胺紅溶液相混合，觀察是否出現由痛血清反應素引起的凝集塊；③C組：采用TPPA試驗進行檢測，方法是在室溫條件下，在U型板上利用稀釋液將血清稀釋，并分別加入致敏與未致敏明膠顆粒，再孵育2h后確認結果。

1.3統計學方法 對試驗數據運用SPSS16.0統計學軟件進行分析，并利用χ2檢驗相關計量資料。當P<0.05時，表示差異存在統計學意義。

2 結果

2.1對比梅毒檢驗結果 A組檢出17例，陽性率為85.0%；B組檢出18例，陽性率為90.0%；C組檢出20例，陽性率為100%。由此可見，TPPA對梅毒的陽性檢出率明顯高于TRUST與ELISA，差異顯著，存在統計學意義（P<0.05）。

2.2對比三種方法的敏感性與特異性 TPPA的特異性與敏感性分別是98.3%、98.9%；而TRUST的特異性與敏感性均較低，分別為88.2%、85.6%；ELISA的特異性與敏感性位于二者之間，分別為95.3%、96.4%。因此，TPPA和另兩種檢測法在特異性與敏感性方面存在明顯差異，具有一定的統計學意義（P<0.05）。而ELISA與TRUST之間的特異性與敏感性并無明顯差異，無統計學意義（P>0.05）。

3 討論

近年來我國梅毒發病率有明顯的升高趨勢，究其原因可能與城市流動人口增多、性行為觀念的轉變以及血液制品的大量使用有關。梅毒的常見傳播途徑包括性傳播與血液傳播，也可通過哺乳、輸血、接吻、意外傷害等途徑染病。梅毒螺旋體（TP）是引發該病的主要致病原因。當TP侵入人體后，人體會產生特異抗螺旋體類抗體（TP-Ab）與一些非特異的抗類脂質性抗體。特異性梅毒螺旋體抗體主要有IgM與IgG兩種，一般在感染TP后3～6周后出現[1]。IgM抗體會伴隨著疾病的發展而逐漸消失，但IgG抗體會長時間留在體內，甚至終生存在。醫學界也把TP-Ab作為診斷梅毒的主要檢測手段，目前，臨床上診斷梅毒的血清學檢驗方法種類較多，各有優劣，下面主要介紹臨床上常用的三種檢測方法。

3.1 ELISA梅毒血清學檢測方法 伴隨著血液檢測技術的發展，形成了很多新的血清學檢測方法，包括ELISA。該檢測方法是在微孔板上包被梅毒螺旋體抗原，采用雙抗原夾心法，從而提升了對TP的特異性與敏感性。據相關研究顯示，TPPA與ELISA在敏感性與特異性方面都比較相似，均具有較好的敏感性與特異性。由于ELISA檢測法能同時檢測到IgG與IgM等特異性抗體，但隨著有效的治療后，IgG抗體仍可能被檢出，個別患者甚至終生都可檢出。因此，ELISA檢測法不能作為評定患者臨床治療效果與病情復發及再次感染的依據。此外，特異性梅毒血清學試驗存在一定的局限性，可能會受到一些生理或病理方面的影響，導致假陽性率。一些老年患者在相關基礎疾病的影響下，機體會生成抗類脂質抗體抗原，也可能生成梅毒螺旋體抗體的交叉抗原[2]。

3.2 TRUST梅毒血清學檢測方法 這屬于非特異性梅毒篩選試驗，具有很多優點，比如，價格低廉、測定效價高、操作簡單、檢測快等。其主要原理是運用相關技術從牛心中提取出卵磷脂、膽固醇、心磷脂等，在特制的甲苯胺紅溶液中重懸這三種物質組成的性病研究室WDRL抗原。通過檢測血清或血漿中的相關反應素進行判定。但伴隨著相關醫學技術的進步，發現該試驗的敏感性并不強。不同時期檢測得出的檢出率也存在較大的差異。另外，伴有相關疾病的患者、孕婦等人群體內由于存在類似的類脂質抗體，也可能檢出假陽性，又稱為低滴度生物學假陽性。但據相關研究證實，TRUST試驗滴度會受到患者病程的影響。處于疾病活動期的感染者，TRUST的滴度會相應降低。患者感染梅毒后就會提高TRUST滴度[3]。因此，觀察滴度變化對評定梅毒是否復發或再次感染是具有較高的臨床價值的。

3.3 TPPA梅毒血清學檢測方法 該檢測方法的敏感性與特異性均很高，其檢測原理是包被致敏紅細胞與明膠顆粒的過程中使用純化的致病性螺旋體抗原進行檢測。但該檢測方法程序過于繁瑣，并對醫師的操作水平有著嚴格的要求。另外，檢測成本較高，患者會面臨不小的經濟壓力。由于該方法的檢測原理和ELISA比較相似，會同時檢出IgG與IgM等抗體，因此，不能作為病情復發與再次感染的判斷依據。

綜上可知，三種檢驗方法各有優劣，對于疑似陽性的標本，建議采用TPPA進行檢驗。若需觀察治療效果及評判是非再次感染復發，則宜采用TRUST試驗法。如需進行大批量檢驗或篩查高危人群的時候，一般選擇ELISA法。另外，還必須考慮到患者的臨床癥狀、病情、病史等進行診斷。

參考文獻：

[1]謝昭寧.多種不同梅毒檢驗方法檢測梅毒螺旋體的結果準確率比較[J].安徽醫藥，2013，17（5）：797-798.

[2]吳文輝.不同方法檢驗梅毒的結果比較分析[J].中國當代醫藥，2011，18（1）：81-82.

[3]楊安芳.梅毒血清學檢驗中不同方法檢定結果的觀察分析[J].中國醫藥導刊，2014，16（1）：169，171.編輯/成森