肺炎支原體抗體分型檢測和被動顆粒凝集檢測結果比較

摘要：目的 分析肺炎支原體抗體分型與被動顆粒凝集檢測的相關性。方法 選取本院2013年3月～2015年3月收治的276例疑似肺炎支原體感染患者，依次開展肺炎支原體抗體分型檢測與被動顆粒凝集檢測，分別將其檢測結果進行比較，分析二者的相關性與一致性。結果 以被動顆粒凝集檢測結果為準，抗體分型檢測的陽性符合率為87.7%，陰性符合率為75.3%，總符合率為83.7%，兩種檢測方法具有良好的一致性。隨著滴度的增加，IgM、IgA及亞型組合IgM/G/A陽性比例也逐漸增加（P<0.05），而各組間IgG亞型的陽性率差異無統計學意義（P>0.05）。結論 肺炎支原體抗體分型與被動顆粒凝集檢測結果具有良好相關性，可為肺炎支原體感染診斷提供有效作用。

關鍵詞：肺炎支原體抗體分型；被動顆粒凝集檢測；臨床比較

目前，對于肺炎支原體感染的檢測多通過血清學檢查進行，其中以抗體分型檢測和被動顆粒凝集檢測最為常見，兩者可分別檢測血清各亞型（如特異性IgM、IgG、IgA抗體）的水平及各類型抗體水平的總和，從而反映是否發生肺炎支原體感染及其嚴重程度[1，2]。本研究選取我院收治的肺炎支原體感染者276例行抗體分型檢測和被動顆粒凝集檢測，對比分析兩種方法的一致性及相關性，以期為肺炎支原體感染的檢測提供理論依據[3]。

1資料與方法

1.1一般資料 選取2013年3月～2015年3月于我院呼吸科、兒科等因咳嗽、發熱且經門診治療無效者入院治療的疑似肺炎支原體感染276例為研究對象，所有患者均符合以下條件：①咳嗽、發熱等臨床癥狀持續1w以上，且經自行服藥或者門診治療無效者；②各患者均參照肺炎支原體感染的診斷標準確診；③患者入院后服用抗生素，病情有所緩解者；④所有患者均自愿簽署知情同意書。納入研究的276例患者中男142例，女134例，年齡2～76歲，平均（30.2±14.7）歲。

1.2研究方法 276例患者自初診時收集血液樣本，-20℃保存備用，分別進行抗體分型檢測和被動顆粒凝集檢測。

1.2.1抗肺炎支原體抗體分型檢測 對于抗體分型檢測采用酶聯免疫吸附試驗（ELISA）進行，包括IgM、IgG、IgA抗體的檢測，所用亞型抗體的檢測所使用的檢測試劑盒均由以色列Savyon Diagnostics公司生產，實驗操作參照試劑盒說明書進行。其中IgM、IgG、或IgA種亞型出現1項陽性者，即定義為ELISA結果陽性。

1.2.2被動顆粒凝集檢測 凝集試驗采用日本FUJIREBIO株式會社生產的SERODIA-MYCOⅡ檢測試劑盒進行，設立陽性、陰性對照，具體操作按照試劑盒說明書實施。試驗結果以滴度表示，以1：160作為閾值判斷結果是否呈陽性。

1.3統計學處理 所有實驗數據均采用SPSS19.0統計學軟件進行處理，其中兩種檢測方法的符合率采用百分比表示，結果一致性分析行Kappa檢驗，相關性分析采用Spearman相關系數進行；此外，對于不同滴度、不同年齡的抗體亞型陽性率對比行Kruskal Wallis秩和檢驗，均以P<0.05為差異有統計學意義。

2結果

2.1兩種檢測方法的一致性比較 抗體分型檢測及被動顆粒凝集檢測的結果見表1，以被動顆粒凝集檢測結果為準，抗體分型檢測的陽性符合率為87.7%，陰性符合率為75.3%，總符合率為83.7%。兩種檢測方法的一致性檢驗發現，Kappa系數為0.705，P<0.05，表明兩種檢測方法具有良好的一致性，且采用Spearman相關性分析發現兩者間存在相關性（r=0.683，P<0.05）。

2.2不同滴度組特異性抗體亞型陽性的分布 按照被動顆粒凝集試驗的結果，將患者按照滴度的差異分為低滴度組（1：160～1：320）、中滴度組（1：1640～1：1280）、高滴度組（1：2560），各組特異性抗體亞型陽性的分布情況見表2。隨著滴度的增加，IgM、IgA及亞型組合IgM/G/A陽性比例也逐漸增加（P<0.05），而各組間IgG亞型的陽性率差異無統計學意義（P>0.05）。

2.3不同滴度組與病程的相關性 一般地，抗體分型能夠反映感染發生的進程，血清檢測存在IgM陽性者表示為早期感染；而僅存在IgG抗體陽性則為既往感染；若存在IgM/G/A 3者均為陽性，或者IgM、IgG陽性或IgA、IgG陽性，則表示初次感染或現癥感染。以此為依據，低、中、高滴度組患者中現癥感染者的比例分別為76.9%、60.6%、97.6%。此外，在高滴度組41例患者中有38例患者確診為肺炎支原體感染。

3討論

目前檢測方法主要包括病原菌培養、PCR診斷技術及血清學檢測，其中，病原菌培養最為可靠，但其有耗時長、影響因素較多、陽性率低等缺點，不能滿足臨床快速診斷的需要；而PCR方法的應用雖然提高了檢測的敏感性和特異性，但假陽性、假陰性結果偏高，也難以取得較為理想的結果。因此，目前仍多通過檢測肺炎支原體抗體進行肺炎支原體感染的診斷。

對不同滴度組的抗體分型檢測結果顯示，被動顆粒凝集檢測陽性者中以IgG亞型最為常見。對于IgM而言，其陽性例數隨著滴度的增加而顯著增加，低滴度組患者的IgM陽性率僅為10.6%，因此，被動顆粒凝集檢測用于肺炎支原體感染檢測可能導致假陽性結果增加，這也一定程度上解釋了現階段肺炎支原體血清學檢測陽性率較實際感染率偏高。此外，在對被動顆粒凝集檢測結果與病程的相關性分析發現，僅高滴度組患者的病程情況與抗體分型檢測結果相一致，這可能與個體差異、是否具有感染病史、年齡等因素有關，在臨床診斷現癥感染時須同時進行抗體IgM、IgG和IgA亞型的檢測。

參考文獻：

[1]張健，李莉，王文龍，等.肺炎支原體抗體分型檢測和被動顆粒凝集檢測結果比較[J].中華檢驗醫學雜志，2012，35（7）：12-14.

[2]王建紅.肺炎支原體不同原理檢測方法及其實用性探討[J].臨床肺科雜志，2014，19（6）：1139，1141.

[3]程云華.被動凝集法檢測肺炎支原體抗體的臨床應用及流行病學分析[J].醫學美學美容：中旬刊，2014，23（1）：95-96.

編輯/孫杰