功能性消化不良患者胃黏膜肥大細胞及5—羥色胺變化的研究

摘要：目的 初步探討胃黏膜肥大細胞及5-羥色胺的變化在功能性消化不良患者發病機制中的作用。方法 選擇符合功能性消化不良患者診斷標準的患者作為實驗組，取健康志愿者作為對照組。應用免疫組化法檢測胃黏膜肥大細胞含量。應用高效液相電化學檢測法測定胃黏膜5-羥色胺濃度，結合臨床資料數據對照比較。結果 ①從本研究中可以看出實驗組和對照組在胃黏膜肥大細胞含量及胃黏膜5-羥色胺濃度都有顯著性差異（P<0.05）。②從本研究中可以看出實驗組患者胃黏膜5-羥色胺濃度與胃黏膜肥大細胞數目、胃黏膜肥大細胞脫顆粒比率之間有明顯相關性（P<0.05）。結論 胃黏膜肥大細胞含量增高及胃黏膜5-羥色胺濃度的異常在功能性消化不良發病機制中起一定的作用。

關鍵詞：功能性消化不良；肥大細胞；5-羥色胺

Clinical Study on the Changes of Gastric Mucosal Mast Cells and 5- in Patients with Functional Dyspepsia

LIU Tao，ZHANG Huan，CHEN Jie

（Affiliated Hospital of Jiangxi TCM University，Nanchang 330006，Jiangxi，China）

Abstract：Objective To investigate the effect of the changes of gastric mucosal mast cells and 5-HT in the pathogenesis of functional dyspepsia.Methods Patients with functional dyspepsia patients were selected as the experimental group， taking healthy volunteers as the control group. Detection of mast cell in gastric mucosa by immunohistochemical method. Application of high efficiency liquid phase electrochemical detection method for the determination of 5- concentration in gastric mucosa， and the comparison of clinical data.Results ① from the present study， we can see that there is a significant difference between the experimental group and the control group in the gastric mucosal mast cell content and gastric mucosal 5-HT serotonin concentration （P < 0.05）.②from the present study， we can see that there is a significant correlation between the concentration of 5-HT in the gastric mucosa of the experimental group and the number of mast cells in gastric mucosa， and the percentage of mast cells in gastric mucosa （P<0.05）.Conclusion Gastric mucosal mast cells increased and 5-HT concentration of gastric mucosa in the pathogenesis of functional dyspepsia.

Key words：Functional dyspepsia； Mast cell； 5-HT

功能性消化不良是臨床上消化科門診中最為常見的功能性疾病之一，占消化內科門診大約為50%左右[1-2]。功能性消化不良病因復雜，對其發病機制目前尚未研究清楚，初步發現可能是多種因素及病因對功能性消化不良的發病起到了協同作用[3]，本研究是初步探討胃黏膜肥大細胞及胃黏膜5-羥色胺含量在功能性消化不良患者發病機制中的作用。

1 資料與方法

1.1一般資料 收集在江西中醫藥大學附屬醫院消化內科就診的門診及住院病人作為研究對象。選擇符合功能性消化不良患者診斷標準[4]的患者32例作為實驗組，來自本院體檢中心的健康志愿者16例作為對照組。

1.2方法

1.2.1胃黏膜肥大細胞含量及脫顆粒比率的測定

1.2.1.1標本采集和處理 所有研究對象均接受胃鏡檢查，取胃竇粘膜 2 塊，用固定液固定，常規脫水，石蠟包埋，做連續切片，切片厚度 6 um。

1.2.1.2胃黏膜肥大細胞含量的測定 利用顯微鏡下查看肥大細胞的形態并計數，在高倍視野（×400）下隨機取5個視野，計數肥大細胞數并取平均值。肥大細胞計數以平均每高倍視野的肥大細胞個數表示。

1.2.1.3 胃黏膜肥大細胞脫顆粒比率的測定 利用顯微鏡下查看每張切片隨機選5個高倍視野（×400），計數肥大細胞總數及脫顆粒肥大細胞數。肥大細胞脫顆粒比率則以脫顆粒肥大細胞數占總肥大細胞比值表示。

1.2.2 5-羥色胺檢測

1.2.2.1用0.5%磺基水楊酸0.1 ml與黏膜組織一起于玻璃勻漿器中勻漿，勻漿液于離心機中4℃下15000轉/min離心10 min，取上清液20 ul進行分析。

1.2.2.2高效液相電化學法測定：流動相：0.1 mol/L NaH2PO4溶液，內含0.1 mmol/L EDTA-Na2，5 mmol/L庚烷磷酸鈉，磷酸調pH至4.5，7%乙腈。使用前脫氣處理。色譜柱：Spherisorb ODS（C18）柱，250×4.6（id）m，dp 5 um。流速0.8 ml/min，工作電壓0.75 V，柱溫30℃。上清液20 ul直接進樣測定5-羥色胺。以保留時間定性與外標法（峰面積）定量，方法的準確度、精密度、重現性均符合要求。

1.2.2.3 5-羥色胺結果判定 高效液相電化學法最終結果為黏膜所含的5-羥色胺質量，5-羥色胺質量與粘膜質量相比，即為5-羥色胺濃度（ng/g粘膜組織）。

1.3統計學方法 統計學處理采用SPSS 15.0軟件包。兩個樣本均數之間的比較采用t檢驗，多個樣本均數之間的比較采用單因素方差分析（one-way ANOVA），肥大細胞含量、5-HT濃度之間關系采用Pearson直線相關分析，統計學差異顯著定義為P<0.05。

2結果

2.1胃黏膜肥大細胞含量及脫顆粒比率的測定的結果 從本研究中可以看出實驗組和對照組在胃黏膜肥大細胞含量及脫顆粒比率上有顯著性差異（P<0.05），見表1。

2.2胃黏膜5-羥色胺濃度檢測的結果 從本研究中可以看出實驗組和對照組在5-羥色胺檢測上有顯著性差異（P<0.05），見表2。

2.3胃黏膜5-羥色胺濃度與胃黏膜肥大細胞數目、胃黏膜肥大細胞脫顆粒比率之間的關系：從本研究中可以看出胃黏膜5-羥色胺濃度與胃黏膜肥大細胞數目、胃黏膜肥大細胞脫顆粒比率之間有明顯相關性（P<0.05），見表3。

3討論

3.1胃黏膜肥大細胞與功能性消化不良發病的關系 肥大細胞廣泛分布于皮膚、淋巴組織、子宮、膀胱、呼吸道和消化道黏膜、黏膜下毛細血管和淋巴管周圍的結締組織中，肥大細胞表面有多種受體表達，當細胞受體與其識別的特異性抗原結合時，可被激活而發生特征性化學和形態改變，稱為過敏性脫顆粒，能引起生物活性介質的通道開放，釋放生物活性介質[5]。肥大細胞釋放的生物活性介質[6]包括：生物胺、酶、花生四烯酸及代謝產物、腺苷、神經肽、細胞因子等，其中有預先合成在刺激后立即釋放的介質，如5-羥色胺、各種蛋白酶、神經肽以及某些細胞因子，也有受刺激后新合成介質，如花生四烯酸代謝物（前列腺素、白三烯）。早在1990年Matter對功能性消化不良患者胃竇部肥大細胞的研究中發現，大約有13%的患者每個高倍鏡視野有11個或更多的肥大細胞，同時伴有脫顆粒比率明顯增多。本研究發現功能性消化不良患者的胃黏膜肥大細胞計數及脫顆粒比率明顯增多，與許多國內外的研究結果基本相似[7]。提示胃黏膜肥大細胞與功能性消化不良存在一定的相關性。

3.2胃黏膜5-羥色胺與功能性消化不良發病的關系 5-羥色胺是廣泛存在于中樞神經系統和胃腸道的一種單胺類神經遞質，具有多種生物學功能，參與胃腸運動、攝食、睡眠、情緒、認知及生殖等在內的多種生理功能調控。人體內總的5-羥色胺約95%存在于胃腸道中，其余的5%存在于人腦之中。功能性消化不良主要表現為胃腸動力異常、內臟感覺過敏和精神心理異常。相關研究認為可能與5-羥色胺的下列功能有關[8]：①調節胃腸運動功能：5-羥色胺既可使胃腸道平滑肌收縮，又可使之松弛[9]，但更多的是先舒張后收縮的雙向反應，引起胃腸的分節運動。②調節內臟感覺：5-羥色胺1～3受體在介導外周痛覺中起重要作用。③與精神情志密切相關：5-羥色胺是廣泛存在于中樞神經系統和胃腸道的神經遞質，它在中樞內水平的改變可導致精神行為障礙。本研究發現功能性消化不良患者的胃黏膜5-羥色胺濃度明顯升高，提示胃黏膜5-羥色胺濃度與功能性消化不良存在一定的相關性。

3.3胃黏膜5-羥色胺濃度與肥大細胞之間的關系 目前的研究認為，肥大細胞很可能是在神經和免疫機制之間擔當溝通作用的重要免疫細胞，而5-羥色胺是一種廣泛存在于中樞神經系統和胃腸道的重要神經遞質。本研究表明，功能性消化不良患者胃黏膜5-羥色胺濃度與胃黏膜肥大細胞數目、胃黏膜肥大細胞脫顆粒比率之間具有正相關性，提示對功能性消化不良胃黏膜5-羥色胺濃度影響可能與腸粘膜肥大細胞含量增加及誘導消化道的肥大細胞脫顆粒這一機制有關。

參考文獻：

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編輯/肖慧