2010～2014年岳麓區(qū)兒童細(xì)菌性腹瀉病原菌分布及耐藥性分析

摘要：目的 探討近5年來(lái)岳麓區(qū)兒童細(xì)菌性腹瀉病原菌分布及耐藥性情況。方法 回顧性分析我中心2010～2014年被臨床診斷為細(xì)菌性腹瀉病患兒的118例病原菌分布及耐藥性。結(jié)果 在5年中的568份腹瀉患兒糞便標(biāo)本中檢測(cè)出病原菌118株，總檢出率為20.77%，其中志賀菌21株，占17.79%，大腸埃希菌56株，占47.45%，沙門菌6株，占5.08%，副溶血性弧菌11株，占9.32%，其他菌24株，占20.33%。在分離到的118例菌株中，其中2～6歲檢出率均較高，2歲內(nèi)大腸埃希菌感染最顯著，各年齡組檢出病原菌差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。分離的腸道致病菌對(duì)四環(huán)素、氨芐西林的耐藥性均較高，對(duì)阿莫西林、環(huán)丙沙星、氯霉素耐藥性較低；不同菌屬有不同的耐藥譜。結(jié)論 細(xì)菌性腹瀉病原菌的耐藥性逐漸增強(qiáng)，其中大腸埃希菌是兒童敏感性的抗菌藥物能夠有效降低腸道細(xì)菌耐藥率。

關(guān)鍵詞：細(xì)菌性腹瀉；病原菌分布；耐藥性

兒童腹瀉病是消化系統(tǒng)常見(jiàn)疾病，持續(xù)性腹瀉易導(dǎo)致?tīng)I(yíng)養(yǎng)不良，治療不當(dāng)或者病情嚴(yán)重者可致患兒死亡[1]。引起兒童腹瀉的因素較多，主要致病因素可分為兩大類：感染性因素和非感染性因素，臨床常見(jiàn)多為感染性腹瀉，因其發(fā)病率高，影響較廣[2]。感染性腹瀉基本均由致病菌引起，因此抗生素是治療其的有效措施之一[3]。此外，抗生素的耐藥性存在明顯的區(qū)域差異，明確本區(qū)域兒童感染性腹瀉的常見(jiàn)致病菌種類和其耐藥性情況非常必要。本研究對(duì)2010～2014年在我中心診斷的細(xì)菌性腹瀉病患兒病歷進(jìn)行回顧性分析，并對(duì)568份兒童細(xì)菌性腹瀉病糞便標(biāo)本進(jìn)行了病原菌檢測(cè)。

1 資料與方法

1.1一般資料 2010～2014年5～11月我中心共收集到568份糞便標(biāo)本，患兒均來(lái)自于岳麓區(qū)，以嘔吐或腹瀉等消化道癥狀為主因就診的24 h腹瀉≥3次，糞便性狀異常（稀便、水樣便、黏液便或膿血便等）且未服用抗生素及其他化學(xué)品的腹瀉患兒便標(biāo)本，通過(guò)Cary-Blair半固體培養(yǎng)基保存，并送至檢驗(yàn)科檢測(cè)。男306例，女262例，男：女為1.16：1，年齡在0～7歲，平均年齡為（2.54±1.23）歲。

1.2試劑 大腸埃希菌、沙門菌、志賀菌診斷血清由寧波天潤(rùn)提供，培養(yǎng)基均購(gòu)于中國(guó)陸橋技術(shù)有限公司，所用藥敏紙片為CLSI-2012版推薦，選用英國(guó)Oxoid公司產(chǎn)品。質(zhì)控用金黃色葡萄球菌ATCC25923、宋內(nèi)志賀菌CMCC（B）51105、副溶血性弧菌ATCC 27519、腸炎沙門菌ATCC 14208、大腸埃希菌ATCC25922購(gòu)自廣東環(huán)凱微生物科技有限公司。

1.3方法 按《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》進(jìn)行不同菌屬病原菌的分離培養(yǎng)和生化鑒定。用麥康凱平板和SS平板接種糞便標(biāo)本，篩選出病原菌后應(yīng)用三糖鐵培養(yǎng)基和血清學(xué)等進(jìn)一步鑒定到血清型，上述分離培養(yǎng)基上挑取可疑菌落涂片進(jìn)行革蘭染色，并做氧化酶試驗(yàn)和觸酶試驗(yàn)，選用相應(yīng)的API生化板條做系統(tǒng)生化鑒定，結(jié)果用APILAB PLUS軟件判定。生化鑒定后用玻片凝集法對(duì)上述菌株進(jìn)行血清分型。每次實(shí)驗(yàn)均用標(biāo)準(zhǔn)菌株做平行對(duì)照進(jìn)行質(zhì)控血清學(xué)試驗(yàn)采用玻片凝集法。藥敏試驗(yàn)采用K-B法，以CLSI標(biāo)準(zhǔn)為結(jié)果判斷依據(jù)。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS18.0統(tǒng)計(jì)軟件包，計(jì)量數(shù)據(jù)行χ2檢驗(yàn)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。

2 結(jié)果

2.1病原菌的種類及分布 在5年中的568份腹瀉患兒糞便標(biāo)本中檢測(cè)出病原菌118株，總檢出率為20.77%，其中志賀菌21株，占17.79%，大腸埃希菌56株，占47.45%，沙門菌6株，占5.08%，副溶血性弧菌11株，占9.32%，其他菌24株，占20.33%。各年度間檢出率差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=3.77、3.09、1.56、0.158，P=0.052、0.079、0.211、0.691），見(jiàn)表1。

2.2不同年齡、性別組病原菌分布與構(gòu)成 在分離到的118例菌株中，年齡40d～7歲，其中3～6歲檢出率均較高，2歲內(nèi)大腸埃希菌感染最顯著，各年齡組檢出病原菌差別不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。不同性別病原菌差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但女性病原菌檢出率更高，見(jiàn)表2。

2.3病原菌藥敏情況 把分離的腸道致病菌對(duì)四環(huán)素、氨芐西林的耐藥性均較高，對(duì)阿莫西林、環(huán)丙沙星、氯霉素耐藥性較低；不同菌屬有不同的耐藥譜，見(jiàn)表3。

3 討論

由多種因素引起的以大便性狀改變與大便次數(shù)增多為特點(diǎn)的綜合征，統(tǒng)稱為腹瀉病（diarrheal disease）。腹瀉病是多病因、多因素引起的一組疾病，是兒童時(shí)期發(fā)病率最高的疾病，臨床上許多重癥的發(fā)育障礙和營(yíng)養(yǎng)不良兒童均有長(zhǎng)期的腹瀉疾病史[4]。腹瀉病的致病因素可分為感染性和非感染性兩類，其中最常見(jiàn)的致病原為細(xì)菌和病毒[5]。臨床常見(jiàn)的腹瀉致病菌多為大腸埃希菌、志賀菌、沙門菌及條件致病菌；而病毒性腹瀉以輪狀病毒最為常見(jiàn)病原，其次是腸道病毒，其他病毒也可引起感染性腹瀉[6]。研究小兒腹瀉病將會(huì)降低腹瀉病的患病率和提高治療成功率，增強(qiáng)小兒體質(zhì)。

本次研究收集了2010～2014年岳麓區(qū)568份腹瀉患兒糞便標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果分析顯示，岳麓區(qū)細(xì)菌性感染性腹瀉檢出率為20.77%[7]，引起岳麓區(qū)兒童細(xì)菌性腹瀉的病原菌發(fā)布較為廣泛，其中以大腸埃希菌為主要流行型，志賀菌位居第二。從年齡分布看，2歲以內(nèi)以大腸埃希菌感染為主，大腸埃希菌隨年齡增長(zhǎng)而下降，2～6歲組以大腸埃希菌和志賀菌感染為主，沙門菌在5～6歲小兒中檢出為多。大腸桿菌是常見(jiàn)細(xì)菌，在各種生活用品中可有少量存在，兒童活動(dòng)較為廣泛，可能在不經(jīng)意間接觸大腸桿菌，兒童免疫力較低，所以容易造成感染[8]。志賀菌感染主要發(fā)生在兒童攝食過(guò)程中，兒童處于認(rèn)識(shí)事物階段，食物的辨別能力較差，可能會(huì)攝入污染的食物。隨著年齡的增長(zhǎng)，兒童認(rèn)識(shí)事物能力上升，發(fā)生感染的情況減少。

腸道病原菌的藥敏結(jié)果顯示，近年來(lái)腸道病原菌對(duì)阿莫西林、青霉素類、頭孢一代、二代、復(fù)方磺胺類抗生素普遍耐藥，因此不可作為細(xì)菌性腹瀉的常用藥。除了大腸埃希菌外，腸道病原菌對(duì)第三代頭孢的耐藥率較低，其中對(duì)頭孢他啶耐藥率最低，故是非大腸埃希菌感染的細(xì)菌性腹瀉治療首選藥物。耐藥的產(chǎn)生，與抗生素的濫用密切相關(guān)，也與細(xì)菌本身因素相關(guān)，但主要是由于產(chǎn)ES-BLs菌株出現(xiàn)，ESBLs的產(chǎn)生通過(guò)質(zhì)粒介導(dǎo)，同時(shí)頭孢菌素可誘導(dǎo)ESBLs的產(chǎn)生，攜帶ESBLs的質(zhì)粒也可同時(shí)攜帶多種抗生素等抗菌藥物的耐藥基因，產(chǎn)生ESBLs菌株可表現(xiàn)為對(duì)其他抗菌藥物的多重耐藥性。

綜上所述，細(xì)菌耐藥日趨嚴(yán)峻，兒童腹瀉致病菌的耐藥性不斷提高，因此臨床醫(yī)師在選擇治療藥物時(shí)，藥敏試驗(yàn)監(jiān)測(cè)尤為重要。

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編輯/倪冰冰