聯用化療和自體DC-CIK過繼免疫療法治療兒童急性白血病的效果研究

張 睿 高石磊 王 娟 馬洪玉 趙 芳

（1 河北省滄州市中心醫院血液內一科 河北 滄州 061001；2 滄州醫學高等專科學校護理系 河北 滄州 061001;3 河北省滄州市中心醫院血液內一科 河北 滄州 061001；4 河北省滄州市中心醫院血液內一科 河北 滄州 061001；5 河北省滄州市中心醫院血液內一科 河北 滄州 061001）

兒童急性白血病是一種致死率極高的惡性腫瘤[1]，臨床上可將該病分為急性髓系白血病（AML)和急性淋巴細胞白血病(ALL)兩種類型。目前，臨床上常采用化療的方法治療該病，但該病患兒的預后質量往往較差，并且其病情的復發率較高[2]。DC(dendriticcell)是一種樹突狀細胞，CIK(cytokine-in-duced killer)是一種細胞因子誘導的殺傷細胞。自體DC-CIK過繼免疫療法是指將DC細胞和CIK細胞共同培養，然后將其輸入急性白血病患兒的體內，以提高對白血病細胞的殺傷力，從而減輕患兒的臨床癥狀。研究證實，急性白血病患兒對這種療法的耐受性較好[3]。在本次研究中，為了探討分析聯用化療和自體DC-CIK過繼免疫療法治療兒童急性白血病的臨床效果，筆者進行了以下研究。

1 資料與方法

1.1 一般資料 本文的研究對象是2011 年 7 月至2015 年7 月間我院血液內科收治的98 例急性白血病患兒。我們按照知情同意的原則將其隨機分為對照組（48例）和實驗組（50例）。兩組患兒在一般資料方面的差異均不具有統計學意義（P＞0.05），具有可比性。詳情見表1。

表1 兩組患兒一般資料的比較

1.2 研究對象的入選標準和排除標準 研究對象的入選標準是：①臨床表現進行各項檢查的結果符合ICD-10急性白血病診斷標準[4]的患兒。②年齡在1～18歲之間的患兒。③患兒家長均同意參與本次研究，并簽署了知情同意書。研究對象的排除標準是：①患有非原發性急性白血病的患兒。②不能配合完成化療及免疫治療的患兒。③合并傳染性疾病的患兒。④近期接受過大型手術治療的患兒。⑤對生物制品過敏的患兒。⑥存在嚴重凝血功能障礙的患兒。⑦患有其他免疫性疾病的患兒。⑧存在心、腎、肝等重要臟器功能不全的患兒。

1.3 方法 采用ALL/AML-XH-99方案[5]為對照組患兒進行化療，進行化療的具體步驟應嚴格按照規范的化療流程執行，化療藥物的使用劑量應根據患兒的具體情況而定。為實驗組患兒在進行化療的基礎上進行自體DC-CIK過繼免疫治療。進行自體DC-CIK過繼免疫治療的具體方法是：

1.3.1 DC-CIK細胞的分離與培養 ①在患兒被確診患有急性白血病后，抽取其外周血12ml，然后將血液進行分離凍存處理。②將血液的細胞密度調整為 1×1011/L，然后將其進行凍融處理。③用過濾膜對血液進行過濾，制備抗原。④進行 DC-CIK 細胞培養。

1.3.2 DC-CIK細胞的回輸 ①對培養、擴增后的DC-CIK細胞進行病原微生物檢測及細胞活性檢測，符合標準后（進行病原體檢測的結果呈陰性、細胞的活性＞95%）方可將其回輸至患兒的體內。②將DC-CIK 細胞懸液進行離心后去除上清液，然后將其混入100 ml的生理鹽水中為患兒進行回輸。③分 4 次為患兒進行回輸治療，每次進行回輸治療的時間間隔為24 h。④保證每例患兒每個療程接受DCCIK細胞回輸的總數＞7×109。

1.4 觀察指標 ①兩組患兒的臨床療效[6]。臨床療效的判定等級分為完全緩解（CR）、部分緩解（PR）和未緩解（NR）三個等級。②實驗組患兒的不良反應發生情況。

1.5 統計學分析 將本次研究的數據經過整理后錄入spss13.0中進行進一步的統計分析，計量資料用均數±標準差（±s）表示，并采用T檢驗，計數資料以（n，%）表示，當P＜0.05時視為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組患兒臨床療效的比較 在實驗組50例患兒中，臨床療效判定等級為CR、PR和NR的患兒分別有30例、12例和8例，治療的總有效率為60%；在對照組48例患兒中，臨床療效判定等級為CR、PR和NR的患兒分別有20例、10例和18例，治療的總有效率為41.6%。實驗組患兒的臨床療效明顯優于對照組患兒，差異具有統計學意義（P＜0.05）。詳情見表2。

表2 兩組患兒臨床療效的比較

2.2 實驗組患兒的不良反應發生情況 在實驗組50例患兒中，有6例患兒發生了非感染性發熱的情況，有8例患兒發生了肌痛的情況，有5例患兒出現了皮疹的癥狀。這19例患兒的不良反應均較為輕微，經對癥治療后均完全緩解。

3 討論

近年來，我國兒童白血病的發病率逐年升高。目前，臨床上常采用化療的方法對白血病患兒進行治療。這種療法雖然能改善該病患兒的臨床癥狀，但在治療的初期極易導致患兒發生出血、感染等不良反應，從而大大降低了治療的效果。CIK細胞具有 T 淋巴細胞的抗瘤活性以及自然殺傷(NK)細胞的殺瘤作用。DC 細胞可誘導T細胞增殖及活化，并激活NK細胞，是人體內發生免疫反應的啟動者和參與者。研究證實，將DC細胞和CIK細胞共同培養，可起到顯著的協同效應[7,8]。本次研究的結果顯示，實驗組患兒的臨床療效明顯優于對照組患兒，差異具有統計學意義。兩組患兒均未發生任何嚴重的并發癥。

綜上所述，用化療聯合自體DC-CIK過繼免疫療法治療兒童急性白血病的臨床效果十分顯著，并且安全性較高、無毒副作用，此療法值得在臨床上推廣應用。

[1] 周東風，孟浦，林雯，等.極限稀釋定量PCR法動態監測兒童急性淋巴細胞性白血病 MRD[J].華中科技大學學報：醫學版，2002，31(4)：400－ 402.

[2] Foster A E，Brenner MK,Dotti G.Adoptive T-cell immunotherapy of chronic lymphocytic leukaemia[J].Best Pract Resclin Haematol，2008，21（3）：375-389.

[3] Chen R，Deng X，Wu H.Combined immunotherapy with dend ritic cells and cytokine-induced killer cells for malig nant tumors: a sys-tematic review and meta-analysis [J]Int Immunopharmacol，2014，22( 2) : 451-464.

[4] Linn YC, Hui KM. Cytokine-induced killer cells: NK-like T cells with cytotolytic specificity against leukemia [J].Leuk Lymphoma, 2003,44(9): 1457-162.

[5] 顧龍君,孫桂香,盧新天等.小兒急性淋巴細胞白血病診療建議(第二次修訂草案)[J].中華兒科雜志,2009,3 7( 5 ):305-307.

[6] 顧龍君，李娟，薛惠良等.ALL-XH-99方案治療兒童急性淋巴細胞白血病158例療效分析[J].中華 血 液 學 雜 志，2004，25(1)：1-4.

[7] Zhan HL，Gao X，Pu XY，et al. A randomized controlled t rialof postoperative tumor lysate-pulsed dendritic cells and cytokine induced killer cells immunotherapy in pati ents with localized and locally advanced renal cell carc inoma [J] . ChinMed J ( Engl) ，2012，125 ( 21) :3771-3777.

[8] Shi SB Ma TH，Li CH，et al. Effect of maintenance thera py with dendritic cells: cytokine － induced killer cells in patientswith advanced non － small cell lung cancer[J]. Tumori，2012，98 ( 3) : 314 - 319.