三溴乙醇對小鼠麻醉效果的研究

李莉　華再東　任紅艷　畢延震　劉西梅　肖紅衛(wèi)　張立蘋　鄭新民

摘要：為研究三溴乙醇對小鼠的麻醉效果，使用5組不同劑量三溴乙醇（200、350、500、800和1 000 mg/kg）分別腹腔注射小鼠，進(jìn)行小鼠麻醉。結(jié)果表明，200 mg/kg三溴乙醇腹腔注射小鼠，麻醉效果很差，小鼠未達(dá)到麻醉狀態(tài)而持續(xù)動彈，350～800 mg/kg三溴乙醇腹腔注射小鼠能達(dá)到很好的麻醉效果。

關(guān)鍵詞：三溴乙醇；麻醉；小鼠；效果

中圖分類號：Q95-33 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A 文章編號：0439-8114（2015）24-6328-02

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2015.24.060

Abstract： To study anesthetic effects of tribromoethanol on mice， the tribromoethanol were processed intraperitoncal injection with five groups of different dose gradients（200、350、500、800 and 1 000 mg/kg） respectively， and then the anesthesia onset time and duration time were compared. Results showed that the tribromoethanon at dosage of 200 mg/kg showed the worst anesthesia effect， the mice were unanesthetized and kept moving； intraperitoncal injection of tribromoethanol at dosage of 350～800 mg/kg had moderate anesthesia duration and adequate anesthesia depth， which were suitable anesthesia for mice.

Key words：tribromoethanol；anesthetic；mice；effect

由于小鼠繁殖力強(qiáng)、體小、飼養(yǎng)管理方便，具有很好的一致性和可比性，因此被廣泛用于動物試驗研究。“超級小鼠”的問世，將外源基因?qū)胄∈笈咛ゲ⒔⑥D(zhuǎn)基因小鼠技術(shù)，已成為探索生物發(fā)育、細(xì)胞分化、遺傳疾病基因表達(dá)調(diào)控等重要生命現(xiàn)象的主要分子生物學(xué)技術(shù)，并使轉(zhuǎn)基因技術(shù)成為研究熱點(diǎn)[1]。

隨著科學(xué)家們測序人類基因組和繪制小鼠基因圖，發(fā)現(xiàn)99%的小鼠基因都能在人體基因組中找到相對應(yīng)的基因。小鼠和人類基因組的高度同源，生理、生化及發(fā)育過程基本相同，對環(huán)境和藥物的反應(yīng)也極其相似，所以小鼠已經(jīng)成為構(gòu)建人類疾病相關(guān)模型及研究發(fā)病機(jī)制的最重要的試驗動物。筆者從20世紀(jì)80年代開始就致力于轉(zhuǎn)基因技術(shù)研究，先后制備了一系列轉(zhuǎn)基因小鼠和豬模型[2]。在轉(zhuǎn)基因試驗過程中，麻醉效果是決定移植成功的關(guān)鍵。因此，本研究旨在摸索不同劑量三溴乙醇對昆明小白鼠的麻醉效果，建立適宜、安全、有效的麻醉方案。

1 材料與方法

1.1 試驗動物及分組

SPF級昆明小白鼠100只，雌性，體重25～35 g，隨機(jī)分為5組，每組20只。劑量：第1組：200 mg/kg，第2組：350 mg/kg；第3組：500 mg/kg；第4組：800 mg/kg；第5組：1 000 mg/kg。試驗小鼠由湖北省疾病控制中心提供，動物合格證號SCXK（鄂）2015-0018。

1.2 藥品

三溴乙醇（SIGMA股份有限公司，批號T48402-25 g），與15.5 mL叔戊醇混合，常溫溶解2 h，配成1 600 mg/mL濃儲液，使用前用生理鹽水稀釋成20 mg/mL工作液，適度避光保存。

1.3 注射方式及劑量

麻醉時，左手抓住小鼠，使腹部向上，右手將注射針頭于左（或右）下腹部刺入皮下使針頭向前推0.5 cm左右，再以45°角穿過腹肌，固定針頭，緩緩注入藥液，為避免傷及內(nèi)臟，可使小鼠處于頭低位，使內(nèi)臟移向上腹。給藥時，稱取小鼠體重量，按5組不同劑量的三溴乙醇分別通過腹腔注射方式小鼠進(jìn)行麻醉。給藥后使小鼠保持仰臥狀態(tài)以利于觀察心跳、呼吸及復(fù)蘇反應(yīng)。

1.4 觀測指標(biāo)

麻醉起效時間：注射麻醉藥物至小鼠自然倒下，頭、四肢、尾巴、胡須無觸碰反應(yīng)，仰臥時心跳及呼吸均勻，肌肉松弛視為達(dá)到完全麻醉狀態(tài)時間。

麻醉維持時間：從達(dá)到完全麻醉狀態(tài)到有復(fù)蘇反應(yīng)的時間，小鼠的前肢或頭開始抖動即判定為開始復(fù)蘇。

2 結(jié)果與分析

不同劑量三溴乙醇麻醉效果見表1。除200 mg/kg三溴乙醇麻醉效果很差，小鼠未達(dá)到麻醉效果而持續(xù)動彈外，其余4組麻醉起效時間大約在3 min左右；350 mg/kg三溴乙醇腹腔注射小鼠，麻醉持續(xù)時間（58±7） min，鎮(zhèn)痛效果、肌肉松弛度較好；500 mg/kg三溴乙醇腹腔注射小鼠，麻醉持續(xù)時間（187±23） min，鎮(zhèn)痛效果、肌肉松弛度都很好，麻醉持續(xù)時間較長；800 mg/kg三溴乙醇腹腔注射小鼠，麻醉持續(xù)時間（507±46） min；以1 000 mg/kg三溴乙醇腹腔注射小鼠，（6±2） min死亡，而350～800 mg/kg三溴乙醇劑量麻醉零死亡。

3 小結(jié)與討論

試驗動物麻醉是動物試驗中的重要環(huán)節(jié)之一，選擇適宜、安全、有效的麻醉方法是試驗安全性及數(shù)據(jù)可靠性的重要基礎(chǔ)[3，4]。近年來，藥品來源困難，且靜脈注射操作不易掌握，而腹腔注射易致過量抑制呼吸中樞而死亡[5]。本試驗所用三溴乙醇曾被推薦作為轉(zhuǎn)基因鼠傳代有關(guān)的外科手術(shù)（如胚胎移植和輸精管切除術(shù)）的麻醉劑[6]，對昆明小白鼠采取腹腔注射，麻醉起效快，3 min后即可手術(shù)，簡便易操作。

影響試驗動物麻醉的因素很多，同種麻醉藥物在不同劑量濃度下會有不同的麻醉效果[7]，如低濃度下生效相對緩慢，對小鼠生理上不會造成太大影響，但劑量過低不能達(dá)到持續(xù)麻醉的效果，對時間較長的試驗還需追加注射，可能造成麻醉藥蓄積中毒[8]；高濃度雖然生效快，但同時也增大了麻醉的副作用和死亡率[9]。小鼠在麻醉期間代謝微弱，體溫下降明顯，在麻醉時做好保暖工作是必須的[10]。手術(shù)麻醉后復(fù)蘇期的妥善觀察與護(hù)理，可較大幅度減輕動物因體溫下降導(dǎo)致的寒顫，減少各種并發(fā)癥的發(fā)生[11]。在手術(shù)麻醉中，保溫措施可以明顯縮短深度麻醉期和麻醉后恢復(fù)自主期的時間[12]。動物手術(shù)麻醉中采取保溫措施，對試驗動物順利安全蘇醒有著重要的輔助作用。

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