清火梔麥片的穩定性研究

清火梔麥片的穩定性研究

黃竹英，李淑如，覃仁安

(廣州白云山和記黃埔中藥有限公司，廣東 廣州 510515)

摘要：目的探討清火梔麥片的穩定性。方法采用高效液相色譜法測定清火梔麥片在一定的溫度和濕度下放置不同時間后，其主要有效成分梔子苷、穿心蓮內酯和脫水穿心蓮內酯的含量。結果經加速穩定性試驗，放置6個月之后，梔子苷含量無顯著差異，穿心蓮內酯和脫水穿心蓮內酯含量則均下降。結論該方法測定結果準確，精密度和重現性較好，清火梔麥片質量較為穩定。

關鍵詞：清火梔麥片；梔子苷；穿心蓮內酯；脫水穿心蓮內酯

作者簡介：黃竹英，女，主管中藥師，研究方向：工藝制劑研究，E-mail：842277341@qq.com。

中圖分類號：R927.11文獻標識碼：A

Study on stability of Qinghuozhimai Tablets

HUANGZhu-ying,LIShu-ru,QINRen-an

(HutchisonWhampoaGuangzhouBaiyunshanChineseMedicineLimitedCompany，Guangzhou510515，China)

Abstract：ObjectiveTo investigate the stability of Qinghuozhimai Tablets.MethodsUsing high performance liquid chromatography determination of Qinghuozhimai Tablets placed at different times in a certain temperature and humidity,the content of its main effective component geniposide,andrographolide and dehydroandrographolide.ResultsThrough accelerated stability test,after storing for 6 months,the content of geniposide had no significant difference and the contents of andrographolide and dehydroandrographolide were descended.ConclusionThe method was accurate,precise and reproducible.The quality of Qinghuozhimai Tablets was stable.

Key words:Qinghuozhimai Tablets；Geniposide;Andrographolide；Dehydroandrographolide

清火梔麥片收載于《中國藥典》2010年版(一部)，由穿心蓮、梔子、麥冬3味藥組成，具有清熱解毒，涼血消腫功效。用于肺胃熱盛所致的咽喉腫痛、發熱、牙痛、目赤。穿心蓮、梔子是清火梔麥片的主要藥味，其主要成分在制劑中的穩定性對該藥品的質量穩定性及藥效起著極其重要的作用。本文通過HPLC測定法和《中國藥典》2010年版附錄二的加速穩定性試驗考察法，考察清火梔麥片中梔子苷、穿心蓮內酯和脫水穿心蓮內酯的含量變化，以了解該制劑的穩定性及對儲存條件的要求，為以后的生產、銷售儲存提供參考數據。

1儀器與試藥

1.1儀器Dionex Summit P680高效液相色譜儀(ASI-100TM自動進樣器，PDA-100二極管陣列檢測器，變色龍色譜工作站)。

1.2試藥清火梔麥片(廣州白云山和記黃埔中藥有限公司)；梔子苷(批號：110749-200309)、穿心蓮內酯 (批號：110797-200307)、脫水穿心蓮內酯(批號：0854-200204)對照品均購自中國藥品生物制品檢定所；乙腈(色譜純，Fisher)；甲醇(色譜純，Fisher)；二次重蒸水；其余試劑均為分析純。

2方法與結果

2.1色譜條件梔子苷：伊利特Hypersil ODS2(4.6 mm×250 mm，5 μm)；流動相：乙腈-水(15∶85)；流速：1 mL·min-1；檢測波長：梔子苷為238 nm；進樣量：10 μL；柱溫：25 ℃。穿心蓮：伊利特Hypersil ODS2(4.6 mm×250 mm，5 μm)；流動相：甲醇-水(55∶45)；流速：1 mL·min-1；檢測波長：穿心蓮內酯為230 nm；脫水穿心蓮內酯為250 nm；進樣量：10 μL；柱溫：25 ℃。

2.2測定方法

2.2.1穿心蓮以十八烷基硅烷健合硅膠為填充劑；以甲醇-水(55∶45)為流動相；穿心蓮內酯檢測波長為230 nm，脫水穿心蓮內酯檢測波長為250 nm。理論板數按穿心蓮內酯峰和脫水穿心蓮內酯峰計算均應不低于2 000。

對照品溶液的制備[1]：取穿心蓮內酯對照品、脫水穿心蓮內酯對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1 mL含穿心蓮內酯、脫水穿心蓮內酯各20 μg的混合溶液，即得。

供試品溶液的制備[1]：取本品10片，除去包衣，精密稱定，研細，取0.3 g，精密稱定，置50 mL量瓶中，加甲醇適量，超聲處理(功率250 W，頻率33 kHz)30 min，放冷，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，取續濾液，即得。

測定法：分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10 μL，注入液相色譜儀，測定，即得。圖譜見圖1～4。

圖1　穿心蓮內酯對照品圖譜 a.穿心蓮內酯；b.脫水穿心蓮內酯

圖2　清火梔麥片樣品中穿心蓮內酯圖譜 a.穿心蓮內脂；b.脫水穿心蓮內酯

圖3　脫水穿心蓮內酯對照品圖譜 a.穿心蓮內酯；b.脫水穿心蓮內酯

圖4　清火梔麥片樣品中脫水穿心蓮內酯圖譜 a.穿心蓮內酯；b.脫水穿心蓮內酯

2.2.2梔子苷以十八烷基硅烷健合硅膠為填充劑；以乙腈-水(15∶85)為流動相；檢測波長為238 nm[2]。理論板數按梔子苷峰計算應不低于2 000。

對照品溶液的制備：取梔子苷對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1 mL含30 μg的溶液，即得。

供試品溶液的制備：同“2.2.1”項下。

測定法：分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10 μL，注入液相色譜儀，測定，即得。圖譜見圖5、6。

圖5　梔子苷對照品圖譜

圖6　清火梔麥片樣品中梔子苷圖譜

2.3方法學驗證[3～5]

2.3.1線性梔子苷：以梔子苷對照液(濃度為0.031 9 mg·mL-1)分別進樣1、2、4、6、8、10、12、15、20 μL，按梔子苷試驗方法測定，結果見表1。

表1　梔子苷線性考察

以進樣量(μg)為橫坐標，峰面積為縱坐標，繪制標準曲線，結果表明，梔子苷在0.031 9～0.382 8 μg的范圍內，其進樣量與峰面積呈良好的線性關系，Y=1.246 4X-0.137 2，r=0.999 9。如果進樣量超出0.382 8 μg則進樣量與峰面積線性關系很差。

穿心蓮：以穿心蓮內酯(濃度為0.021 4mg·mL-1)和脫水穿心蓮內酯對照液(濃度為0.019 9 mg·mL-1)分別進樣2、4、6、8、10、12、15、20 μL，按穿心蓮試驗方法測定，結果見表2。

表2　穿心蓮內酯線性考察

以進樣量(μg)為橫坐標，峰面積為縱坐標，繪制標準曲線，結果表明，穿心蓮內酯在0.042 8～0.428 μg的范圍內，其進樣量與峰面積呈良好的線性關系，Y=0.876 7X-0.072 9，r=0.999 9。脫水穿心蓮內酯在0.039 8～0.398 μg的范圍內，其進樣量與峰面積呈良好的線性關系，Y=1.529 1X-0.213 8，r=1。

2.3.2精密度試驗取穿心蓮內酯對照液(濃度為0.0220 mg·mL-1)、脫水穿心蓮內酯對照液(濃度為0.020 7 mg·mL-1)、梔子苷對照液(濃度為0.031 9 mg·mL-1)分別進樣5次，按上述試驗方法項下的色譜條件測定，結果見表3。

表3　穿心蓮內酯、脫水穿心蓮內酯、梔子苷精密度考察

從上述結果可以看出，儀器測定具有良好的精密度。

2.3.3穩定性試驗取清火梔麥片按“2.2”項下條件測定其穿心蓮內酯、脫水穿心蓮內酯、梔子苷的峰面積，每隔1 h測定1次，連續5次，其測定結果見表4。

表4　穿心蓮內酯、脫水穿心蓮內酯、梔子苷穩定性考察

結果表明，樣品具有良好的穩定性，符合要求。

2.3.4重復性試驗取同批清火梔麥片按上述條件提取5份，按含量測定項下的方法分別制備供試液并測定，結果見表5。

表5　穿心蓮內酯、脫水穿心蓮內酯、梔子苷測定重復性考察

結果表明，樣品測定具有良好的重復性。

2.3.5回收率試驗取已知含量的清火梔麥片約0.3 g(穿心蓮內酯含量為5.67 mg·g-1，脫水穿心蓮內酯含量為7.29 mg·g-1，梔子苷含量為11 mg·g-1)，精密稱定，分別精密加入等量的對照品，按上述供試品的制備方法制備，一式5份，結果見表6。

表6　穿心蓮內酯、脫水穿心蓮內酯、梔子苷回收率考察

結果表明，本方法穿心蓮內酯、脫水穿心蓮內酯、梔子苷的平均回收率和RSD值都符合規定。

3加速穩定性試驗

按藥物穩定性試驗指導原則要求，取本品3批樣品，在溫度為(40±2)℃，相對濕度75%±5%的條件下放置6個月，在試驗期間第1、2、3、6個月末取樣1次，考察本品的含量質量指標。將3批樣品平均含量測定結果與0月平均含量比較，確定本品的質量穩定性。

結果表明，本品3批樣品在上市銷售包裝條件下，經溫度(40±2)℃，相對濕度為75%±5%條件下進行加速試驗6個月考察，結果表明：本品經6個月加速試驗，清火梔麥片中梔子苷的含量無顯著變化，而穿心蓮內酯和脫水穿心蓮內酯的含量則發生了一些變化，穿心蓮內酯和脫水穿心蓮內酯總量有所下降，但在合格范圍內。

4討論

據文獻報道，梔子藥材的有效成分梔子苷是比較穩定的[6,7]。而穿心蓮藥材的有效成分穿心蓮內酯和脫水穿心蓮內酯是不穩定的，且久儲后穿心蓮內酯含量降低，脫水穿心蓮內酯含量升高[8,9]。穿心蓮藥材作為清火梔麥片的君藥，其有效成分含量穩定性直接關系到藥品的質量穩定性。

本試驗采用高溫高濕環境，對清火梔麥片中穿心蓮內酯和脫水穿心蓮內酯的含量變化進行考察。試驗結果表明，清火梔麥片在溫度(40±2)℃，相對濕度為75%±5%條件下考察6個月，穿心蓮內酯和脫水穿心蓮內酯的含量都發生了變化。其中每放置一個月，穿心蓮內酯含量相應降低，6月與0月相比平均含量降低了17.7%。脫水穿心蓮內酯含量則隨著放置時間的延長先增加而后趨于平緩，但其增加的量與穿心蓮內酯降解的量并不成正比，提示在高溫下，穿心蓮內酯可能一部分轉換成脫水穿心蓮內酯。制劑清火梔麥片中穿心蓮內酯和脫水穿心蓮內酯平均總量6月與0月相比降低了10%左右，提示清火梔麥片不適宜存放于高溫高濕環境。

參考文獻：

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