離子色譜法測定可溶性焦磷酸鐵中檸檬酸、焦磷酸的含量

鐘春華　陳剛勝　李孝壁　姜濤　胡春勇

【摘要】目的建立了一種離子色譜法測定可溶性焦磷酸鐵中檸檬酸、焦磷酸含量的分析方法。方法采用陰子交換色譜柱ionex IonPac AS114mm×250mm），10mmol/L氫氧化鈉溶液為流動相，流速為1.0mL/min，電導檢測，柱溫為30%，檢測器溫度為35℃。結果檸檬酸在0.05～3.06μg/mL范圍線性關系良好，相關系數r=0.9995（n=6），精密度試驗的RSD為<0.39%（n=6）；焦磷酸在0.06～4.48μg/mL范圍線性關系良好，相關系數r=0.9999（n=6），精密度試驗的RSD為<0.39‰（n=6）。結論該方法操作簡單、環境好，靈敏度高，測定結果準確、可靠，能滿足可溶性焦磷酸鐵中檸檬酸、焦磷酸的測定。

【關鍵詞】離子色譜；可溶性焦磷酸鐵；檸檬酸；焦磷酸

【中圖分類號】R943 【文獻標識碼】B 【文章編號】2095-0616（2015）21-54-03

可溶性焦磷酸鐵（ferric pyrophosphate）為焦硫酸鈉、檸檬酸二鈉或檸檬酸三鈉或檸檬酸、硫酸鐵水合物組合的混合物，是由Rockwell Medical Inc研發的一種鐵離子吸收調節劑，主要用于接受透析治療的慢性腎病患者的缺鐵性貧血，商品名為Triferic。該產品中規定焦磷酸鹽（按焦磷酸鈉計）含量應為10.0%～20.0%，檸檬酸鹽（按檸檬酸鈉計）的含量應為14.0%～30.0%，鐵含量應為7.0%～11.0%，對于鐵的含量測定采用其他方法進行測定，本文不做研究，主要針對可溶性焦磷酸鐵中的焦磷酸鹽和檸檬酸鹽的含量進行研究。離子色譜法作一種特殊的液相色譜方法，已經應用在食品、藥品、化工、化妝品、臨床檢測等多個行業，作為檢測陰離子、陽離子及部分有機酸和有機胺等測定手段，已使用的越來越來廣泛。離子色譜法在國外藥典中早被采用，2010中國藥典中也首次將離子色譜法收入附錄，有許多藥物本身含量或有關物質無法采用常規液相方法，而逐漸采用離子色譜方法進行測定，在質量控制方面取得了很好的成果。

本研究根據焦磷酸鐵中主要成分檸檬酸、焦磷酸等的相關特性，建立了離子色譜測定可溶性焦磷酸鐵中檸檬酸鹽、焦磷酸鹽的測定方法，該方法操作簡單、環境污染小，靈敏度高，測定結果準確、可靠，能滿足可溶性焦磷酸鐵中檸檬酸、焦磷酸的測定。

1實驗器材

電子分析天平，梅特勒XS105；熱電DIONEX ISC-2100離子色譜，Dionex CERS500抑制器，DS6 Heated Conductivity Cell電導檢測器；CHROMELEON 6.8化學工作站；采用陰子交換色譜柱ionex IonPac AS114mm×250mm。

試劑：所有化學試劑均為分析純，檸檬酸鈉（含量大于99.0%，國藥集團化學試劑股份有限公司）；焦磷酸鈉（含量>98.0%，國藥集團化學試劑股份有限公司）；氫氧化鈉（含量>99.0%，南京化學試劑公司）；水為娃哈哈純凈水。

2方法與結果

2.1色譜條件

采用陰子交換色譜柱（DIONEX IonPac AS114mm×250mm）；采用以10mmol/L氫氧化鈉溶液作為洗脫液，流速為分1.0mL/min；柱溫設置為30℃，采用抑制性電導檢測器，檢測器的溫度設置為35℃。

2.2系統適用性

本品主要成分為檸檬酸、焦磷酸、鐵，但本方法不研究鐵，只對檸檬酸、焦磷酸進行研究，焦磷酸有可能降解會產生一定量的磷酸，故此將檸檬酸、焦磷酸、磷酸按進行混合考查系統適用性。從表1和圖1中可以看出三個組分離子分離良好，說明該方法的系統適用性很好。

2.3檢測限、定量限

精密稱取檸檬酸、焦磷酸適量，用水溶解，配制成一系列溶液，分別進樣至信噪比（峰高/基線噪聲）（3±1）為檢測限，至信噪比（10±2）為定量限，見表2。

2.4線性關系試驗

按照標準限度濃度配制線l生試驗溶液，檸檬酸鈉在0.05～3D6μg/mL，焦磷酸鈉在0.06～4.48μg/mL，以濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標進行線性回歸，線性回歸方程分別為：A=0.6930C-0.0251、A=0.7274C+0.0046，相關系數分別為r=0.9995、r=0.9999，說明本方法線性良好，見表3～4。

2.5精密度

精密稱取檸檬酸鈉、焦磷酸鈉適量，用水溶解并定量逐漸稀釋成每1mL中含檸檬酸鈉、焦磷酸鈉各約1.5μg、2.2μg的溶液，平行進樣6次，記錄色譜圖，計算峰面積的平均值和相對標準偏差，見表5～6。

由表5～6的數據顯示，6次進樣，檸檬酸、焦磷酸的峰面積的平均值分別為1.0224、1.6489，RSD分別為0.39%、0.32%，表明方法的精密度很好。

3討論

焦磷酸、檸檬酸采用常規的液相方法無法進行控制和檢測，通過文獻查閱和試驗，最終選擇了離子色譜方法進行研究和檢測，本文選擇抑制性電導檢測器，采用離子色譜法對可溶性焦磷酸鐵中的焦磷酸鹽和檸檬酸鹽的含量方法進行了研究。由于焦磷酸在溶液狀態長期放置時，可能會產生一定量的磷酸，會對焦磷酸鐵中焦磷酸鹽和檸檬酸的測定有一定的干擾，故此將磷酸也加入到了專屬性試驗中，通過對焦磷酸鹽和檸檬酸、磷酸根的專屬性考察，說明分離度能夠滿足要求，且焦磷酸可能降解產生的磷酸鹽不會干擾測定，說明所建立的方法有很好的專屬性。

通過檢測限、定量限的研究，說明該方法有較高的響應靈敏度，足以滿足檢測靈明度的要求，另通過對焦磷酸和檸檬酸在一定濃度范圍的線性、含量測定精密度等項目的研究，說明方法能有效、準確的測定可溶性焦磷酸鐵中焦磷酸鹽和檸檬酸的含量。endprint