欖香烯聚氰基丙烯酸正丁酯納米粒子對SHG-44腦膠質瘤的抑制作用

李英夫　宣兆博　王　鶴　廉曉宇

(佳木斯大學附屬第一醫院，黑龍江　佳木斯　154002)

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欖香烯聚氰基丙烯酸正丁酯納米粒子對SHG-44腦膠質瘤的抑制作用

李英夫宣兆博王鶴廉曉宇

(佳木斯大學附屬第一醫院，黑龍江佳木斯154002)

目的探究欖香烯聚氰基丙烯酸正丁酯納米粒子(Gd-PBCA-NP)對SHG-44腦膠質瘤的抑制作用。方法提取大鼠的腦膠質瘤細胞SHG-44，并對其進行體外培養實驗，將這些腦膠質瘤細胞SHG-44按照隨機的原則分為干預組與對照組，對照組為空白，干預組則嚴格按照Gd-PBCA-NP濃度進行分組，然后采用MTT比色法，對欖香烯不同濃度體外培養下的腦膠質瘤細胞SHG-44的抑制作用給予有效的檢測，然后借助流式細胞儀測定干預組的腦膠質瘤細胞SHG-44中的細胞凋亡情況。結果欖香烯的濃度不同，其對SHG-44腦膠質瘤體的抑制作用也有著一定的區別。10.0 mol/L濃度的Gd-PBCA-NP對SHG-44腦膠質瘤的抑制作用明顯優于2.50 mol/L濃度，且干預組的腦膠質瘤細胞SHG-44的存活率明顯低于對照組(P<0.05)；Gd-PBCA-NP濃度越高，其對腦膠質瘤細胞SHG-44的抑制作用就越強。結論Gd-PBCA-NP對SHG-44腦膠質瘤有著明顯的抑制作用，能夠在一定程度上抑制腦膠質瘤SHG-44細胞的凋亡與增殖，而且能夠增強細胞抗腫瘤活性，具有一定的安全性。

欖香烯；聚氰基丙烯酸正丁酯納米粒子；SHG-44；腦膠質瘤

作為一種萜系類化合物，欖香烯聚氰基丙烯酸(PBCA)在臨床醫學中得到了廣泛應用，其主要組成成分為β欖香烯及PBCA，能夠有效抑制細胞毒性，在腦膠質瘤的治療中有著明顯的治療效果〔1〕。本文探究欖香烯PBCA正丁納米粒子(Gd-PBCA-NP)對SHG-44腦膠質瘤的抑制作用。

1　資料與方法

1.1材料與試劑試劑為大連華立金港藥業有限公司提供的Gd-PBCA-NP與細胞培養基，然后提取大鼠血清及四甲基偶氮唑鹽供比色，所用試劑由上海拜力生物科技有限公司提供，腦膠質瘤細胞SHG-44則由上海素爾生物科技有限公司提供〔2〕。

1.2方法首先取適量的腦膠質瘤細胞SHG-44，在細胞培養基中加入10%的大鼠血清，需要注意的是培養基要保持適宜的溫度，一般以37℃為宜，并將其置于5%的CO2培養箱環境中，對腦膠質瘤細胞SHG-44進行培養及傳代。經過欖香烯PBCA對腦膠質SHG-44細胞的充分作用，采用四甲基偶唑鹽比色法對其細胞增殖的抑制作用進行測定〔3〕，在這個過程中，要將細胞培養液充分移除，然后加入0.25%胰酶，使貼壁細胞能夠完全消化，然后在其中加入10 ml的細胞培養液，根據實際情況，合理調整細胞的濃度，對培養板進行有效鋪整，將細胞培養液的濃度設置為不同的數值，將腦膠質瘤細胞置于100 L的細胞培養液中進行有效的培養，培養基的溫度應保持在37℃左右，并在培養箱中加入5%的CO2。然后每個孔分別加入25 L的四甲基偶氮唑鹽〔4〕，經過培養，將細胞培養液充分移出。對欖香烯PBCA吸光度及細胞增殖的抑制效率進行計算。采用四甲基偶氮唑鹽比色法對細胞增殖的抵抗作用進行有效測定，在每個孔中分別加入腦膠質瘤SHG-44細胞，測定其吸光度。然后采用流式細胞儀對欖香烯PBCA對SHG-44的細胞凋亡與增殖的抵抗作用進行測定，整個測定過程中是在24孔平皿培養板中進行的，且采用的是不同濃度的欖香烯PBCA培養方法，對SHG-44的膠質瘤細胞凋亡與增殖情況進行檢測〔5〕。

1.3統計學方法采用SPSS16.0統計學軟件進行χ2檢驗，t檢驗。

2　結　果

對照組、0.15、0.25、0.35、0.50、2.50、5.00、10.00 mol/L欖香烯PBCA對SHG-44細胞的抑制率分別為92.0%、90.2%、89.9%、89.7%、90.0%、79.1%、66.6%、39.2%。欖香烯PBCA濃度對大鼠的腦膠質瘤細胞SHG-44的抑制作用也有著明顯的變化，10.00 mol/L濃度的欖香烯PBCA對腦膠質瘤細胞SHG-44的抑制作用明顯優于5.00 mol/L濃度。干預組腦膠質瘤細胞SHG-44的存活率與對照組相比明顯偏低(P<0.05)。且欖香烯PBCA濃度越高，其對腦膠質瘤細胞SHG-44的抵抗與抑制作用就越強。

3　討　論

神經膠質瘤多采用手術的方式醫治，盡管能夠在一定程度上使患者的病情得到控制，然而復發率比較高〔6，7〕。治療腫瘤的新興化療藥物的出現為臨床醫學中腫瘤的治療提供了更多的可能性，當然也存在不能徹底穿透患者血腦屏障的局限性，必須對其進行有效的改進。Gd-PBCA-NP對腫瘤細胞具有一定的抑制作用，在肝癌、胃癌、腦癌等惡性腫瘤的治療中得到廣泛應用。其主要成分為膽固醇、磷酸氫二鈉及聚氰基丙烯酸等，能夠有效降低腫瘤細胞的分裂能力，抑制腫瘤細胞的增殖，促進腫瘤細胞凋亡。據有關調查研究表明，Gd-PBCA-NP能夠對患者的細胞膜產生作用，促進腫瘤細胞分裂，進而改變腫瘤細胞的免疫原性〔8〕。Gd-PBCA-NP對正常細胞的影響不大，其毒副作用幾乎可以忽略不計，這也是臨床醫學中選用欖香烯進行化療的重要原因之一〔9〕。

綜上，Gd-PBCA-NP對腦膠質瘤細胞SHG-44具有明顯的抑制作用，而且能夠在一定程度上增強抗瘤活性。

1袁子民,王靜,王博,等.β-欖香烯聚氰基丙烯酸正丁酯納米粒凍干粉針的制備及理化性質研究〔J〕.時珍國醫國藥,2013;24(3):650-1.

2崔玉瓊,楊海城.中藥活性成分抗腦膠質瘤作用機制研究進展〔J〕.中醫藥信息,2013;30(3):140-4.

3郭建忠,吉宏明,張剛利,等.β-欖香烯抑制膠質瘤兔角膜移植模型血管生成的實驗研究〔J〕.中國現代醫學雜志,2014;24(14):38-41.

4陳進才,佘軍軍,王光輝,等.β-欖香烯對體外培養人直腸癌細胞株Colo320的放射增敏作用〔J〕.西安交通大學學報(醫學版),2013;34(3):346-8,356.

5申紅麗,趙盼盼,張濤,等.欖香烯與含鉑類化療方案聯合治療晚期非小細胞肺癌的Meta分析〔J〕.現代腫瘤醫學,2013;21(8):1783-8.

6王博,程嵐,袁子民.β-欖香烯聚氰基丙烯酸正丁醋納米粒包封率和載藥量的測定〔J〕.中國醫藥導刊,2010；12(12):2186-7.

7丁華,趙洪瑜,王燕,等.欖香烯對人源性腦膠質細胞瘤SHG-44細胞系放射增敏實驗研究〔J〕.中華放射腫瘤學雜志,2009；18(3):236-7.

8Chen-Long L,Liang C,Lin G,etal.β-elemene induces caspase-dependent apoptosis in human glioma cells in vitro through the upregulation of Bax and Fas/ FasL and downregulation of Bcl-2〔J〕.Asian Pac J Cancer Prev,2014;15(23):10407-12.

9Hui-Qin G,Guan-Nan Z,Yi-Jun W,etal.β-Elemene,a compound derived from Rhizoma zedoariae,reverses multidrug resistance mediated by the ABCB1 transporter〔J〕.Oncol Reports,2014；31(2):858-66.

〔2015-02-11修回〕

(編輯苑云杰)

廉曉宇(1964-)，男，主任醫師，主要從事膠質瘤研究。

李英夫(1979-)，男，碩士，主治醫師，主要從事膠質瘤研究。

R318

A

1005-9202(2016)16-3917-02；doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2016.16.021