濮陽市高危型人乳頭瘤病毒感染狀況及分布特征

劉大寧

濮陽市高危型人乳頭瘤病毒感染狀況及分布特征

劉大寧

目的 了解河南省濮陽地區(qū)女性高危型人乳頭瘤病毒（HPV）感染狀況及分布情況，為防治HPV感染和宮頸癌提供科學(xué)依據(jù)。方法采用熒光定量PCR方法，對我院初次進行13種高危型HPV檢查的2 170名婦女檢查結(jié)果進行分析。結(jié)果 2 170例標本中高危型HPV陽性為219例，總感染率為10.09%；多重感染12例，占總感染標本5.48%。其中16、58、52及68型感染最多。且31～40歲組分布高危型HPV感染率較高，為10.99%。結(jié)論 河南濮陽地區(qū)HPV流行整體符合亞洲人群分布規(guī)律，感染年齡高峰在31～40歲，主要為單基因型感染。

人乳頭瘤病毒；熒光定量PCR；亞型分布

宮頸癌（SCC）是一種常見腫瘤，在所有危害女性健康的惡性腫瘤內(nèi)位居第二。臨床研究發(fā)現(xiàn)：持續(xù)的高危型HPV感染是引發(fā)SCC與癌前病的主要危險因素［1］。而HPV感染存在地域性差異，且差異很強；感染人群因種族、國家與地區(qū)不同，HPV感染率、型別分布具有差異［2］。本研究了解本地區(qū)高危型HPV感染狀況及型別分布特點，對防治HPV感染及宮頸癌早期預(yù)防有重要作用。

1 資料與方法

1.1 資料選取

2015年1～9月濮陽市人民醫(yī)院婦科門診及住院的2 170名婦女進行HPV篩查，年齡21～70歲，所有患者研究前均未接受過HPV篩查，篩查前6個月未行宮頸與陰道手術(shù)，檢查前3 d未行性生活與陰道用藥。用宮頸取樣器刷取宮頸脫落細胞，置于無菌玻璃管中，密閉送檢。4℃保存，3 d內(nèi)檢測。

1.2 儀器與試劑

采用ABI7300熒光定量PCR儀，對16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59及68型HPV的特異性DNA核酸片段進行檢測。

1.3 方法

將無菌生理鹽水1 ml放入標本試管內(nèi)，震蕩并搖勻，吸取液體移到1.5 ml離心管內(nèi)，行5 min 13 000 rpm離心。沉淀加無菌生理鹽水1 ml混勻，13 000 rpm離心5 min，再洗滌1次。沉淀加入100 μl核酸提取液混勻，沸水浴10 min，13 000 rpm離心5 min，取上清4 μl作為PCR反應(yīng)模板。取36 μl HPV檢測混合液與0.4 μl Taq酶，振蕩混勻，3 000 rpm離心數(shù)秒。將配制好的混合液分別置于PCR反應(yīng)管中，將標本、陽性對照品、H2O（陰性對照）的處理上清液4 μl分別加入PCR反應(yīng)管，行PCR擴增反應(yīng)。PCR擴增循環(huán)參數(shù)：94℃×2 min；93℃×10 sec，62℃×31 sec，循環(huán)40次；單點熒光檢測在62℃。擴增曲線呈典型S型，為陽性。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

SPSS 19.0統(tǒng)計軟件進行分析。采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 高危型HPV總感染

2170例標本中陽性標本219例，2 170例標本中高危型HPV陽性為219例，總感染率為10.09%，多重感染為12例，占總感染標本的5.48%。

2.2 高危型HPV各亞型分布

13種高危型HPV均被檢出，陽性檢出標本：16型86例，56型15例，18型5例，45型9例，35型6例，59型12例，39型12例，51型10例，58型23例，52型21例，31型6例，33型8例，68型20例；其中16、58、52及68型感染最多，總檢出率分別為3.96%、1.06%、0.97%、0.92%，在高危型HPV陽性標本中所占比率為39.27%，10.50%，9.59%，9.13%。

2.3 高危型HPV感染的年齡分布

陽性檢出例數(shù)：21～30歲39例，31～40歲71例，41～50歲80例，51～60歲21例，61～70歲8例，高危型HPV感染率分別為10.03%（39/389）、10.99%（71/646）、9.51%（80/841）、9.68%（21/217）、10.38%（8/77）。31～40歲組高危型HPV感染率較高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。

3 討論

目前，臨床已鑒定出100多種亞型HPV，其中約40多種HPV和生殖道感染有關(guān)［3］。臨床依據(jù)HPV病毒致病力分為高危型、低危型，高危型HPV種類多，易引發(fā)宮頸癌、喉癌、肉瘤及膀胱癌等多種惡性腫瘤［4］，危害患者健康及生命安全。

臨床研究表明［5］，HPV16是全世界HPV感染類型中最為常見的一種；而HPV33、HPV56多見于亞洲地區(qū)，HPV58多發(fā)于南美洲，HPV31是歐洲常見類型。有研究顯示［6］，河南地區(qū)HPV感染率較高的是HPV16、58、52與33型，HPV18型感染率較低。本研究顯示，濮陽地區(qū)HPV16、58、52及68型感染最多，前3種與中國最常見HPV感染一致。

部分研究顯示［7］，經(jīng)濟落后地區(qū)、發(fā)展中國家的HPV感染年齡呈U型分布曲線。而李晨等研究表明：隨著人們年齡的增長，總HPV感染率與高危亞型感染率不斷增多，尤其是HPV16［8］。本研究顯示，31～40歲年齡組感染高危型HPV高于其他年齡組，可能與當代社會性生活過早及多性伴侶現(xiàn)象的出現(xiàn)有關(guān)。

HPV在普遍存在于人群內(nèi)，多數(shù)為一過性的HPV，35歲以后持續(xù)的高危型HPV感染是造成宮頸癌的直接因素，特別表現(xiàn)為基因亞型同一的持續(xù)感染，發(fā)生宮頸癌風(fēng)險大。通過對本地區(qū)高危HPV分型的檢測和分析，可為HPV感染的預(yù)防診斷和宮頸癌的防治提供參考。在后期研究中，需對標本量進行進一步擴大，為流行病學(xué)研究HPV疫苗提供科學(xué)依據(jù)。

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［3］ 張靖，高波，康赟，等. 中國女性宮頸人乳頭瘤病毒感染型別分布區(qū)域性特征的Meta分析［J］. 中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志，2014，34（12）：913-920.

［4］ 李世君，王芳. 1803例女性人乳頭瘤病毒基因分型檢測及感染情況分析［J］. 內(nèi)蒙古醫(yī)學(xué)雜志，2016，48（1）：46-48.

［5］ 李晨，程玉峰，李愛祿. 婦科門診女性人乳頭瘤病毒感染型別分布特征及臨床分析［J］. 山東大學(xué)學(xué)報（醫(yī)學(xué)版），2015，53（11）：73-76.

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［7］ 何彩華，曾祥興. 人乳頭瘤病毒基因型檢測及其人群分布特征［J］. 國際免疫學(xué)雜志，2014，37（6）：549-553.

［8］ 李晨，程玉峰，李愛祿. 婦科門診女性人乳頭瘤病毒感染型別分布特征及臨床分析［J］. 山東大學(xué)學(xué)報（醫(yī)學(xué)版），2015，53（11）：73-76.

The Infection Status and Distribution Characteristics of High-risk Human Papillomavirus in the Puyang City

LIU Da'ning Clinical Laboratory，The People's Hospital of Puyang City，Puyang He'nan 457000，China

【Abstract】

Objective To understand the infection status and distribution characteristics of female high-risk human papillomavirus in the puyang city of he’nan province，to provide the scientific basis for prevention and cure of HPV infection and cervical cancer. Methods We used the fluorescence quantitative PCR for analysis of the inspection result of 2 170 women inspected by HPV inspection of 13 high risk HPV examination of the first time at our hospital. Results The positive of high-risk hpv was 219 cases of the 2 170 cases of specimens，the total infection rate was 10.09%. The multiple infections was 12 cases，which was accounted for 5.48% of the total infection specimens，the maximum was 16，58，52 and 68-type among them. And the distribution of group of 31～ 40 years old was higher of high-risk hpv，that was 10.99%. Conclusion The entirety of hpv popular of the puyang in he’nan that was meeting the distribution regularity of asian people，the peak of infection age was 31～40 years old，and the mainly was single genotype infection.

Human papilloma virus，F(xiàn)luorescent quatititive PCR，Subtype distribution

R373

A

1674-9316（2016）15-0016-02

10.3969/j.issn.1674-9316.2016.15.009

濮陽市人民醫(yī)院檢驗科，河南 濮陽 457000