線粒體型天門冬氨酸氨基轉移酶同工酶試劑檢測性能初步評價

葉華春

(永修縣人民醫院檢驗科，江西九江 330304)

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·論著·

線粒體型天門冬氨酸氨基轉移酶同工酶試劑檢測性能初步評價

葉華春

(永修縣人民醫院檢驗科，江西九江 330304)

摘要:目的利用CLSI EP 10-A2文件初步評價線粒體型天門冬氨酸氨基轉移酶同工酶(mAST)試劑的臨床應用性能。方法按照美國臨床實驗室標準化協會(CLSI)頒布的EP10-A2文件，連續5天按特定順序測定高、中、低濃度mAST樣本，計算測定結果的偏差、總不精密度，對截距、斜率、非線性、攜帶污染和漂移進行多元回歸分析。結果低、中、高濃度mAST樣本偏差分別為-0.6、-0.4和0.6 U/L，總不精密度分別為3.33%、1.10%和0.92%，截距、斜率、非線性、攜帶污染、漂移分別為-1.040、1.011、-0.196、0.000和-0.073，其t值分別為-3.215、1.060、-0.191、0.217和-0.569，差異均無統計學意義(P>0.01)。結論mAST試劑盒測定結果準確度、精密度良好，線性良好，攜帶污染率較低，穩定性好，能滿足臨床應用要求。

關鍵詞:線粒體型天門冬氨酸氨基轉移酶同工酶；EP 10-A2；初步評價

線粒體型天門冬氨酸氨基轉移酶同工酶(mitochondria aspartate aminotransferase，mAST)廣泛存在于人體各組織細胞中，經研究，心、肝疾病患者血清mAST都有不同程度的升高，升高程度與疾病的嚴重程度有關，血清mAST的活力測定有助于臨床對心肌、肝細胞破壞的評估，可預示病情的發展趨勢，評價療效和判斷疾病預后[1-3]，具有重要的臨床意義。本文參照美國臨床實驗室標準化協會(CLSI)頒布的《定量臨床檢驗方法的初步評價：批準指南EP10-A2》文件，對其偏差、總不精密度、截距、斜率、非線性、攜帶污染和漂移進行分析， 初步評價其是否適用于臨床檢驗工作[4-6]。

1材料與方法

1.1材料

1.1.1儀器與試劑7600全自動生化分析儀：購自日本日立公司；mAST試劑盒：購于寧波美康生物科技股份有限公司， 批號： 20140512。

1.1.2測定樣本使用寧波美康生物科技股份有限公司生產的質控血清。低值樣本：選擇美康公司質控血清(批號20140622，濃度：22.3 U/L)；高值樣本：選擇美康公司質控血清(批號20140622，濃度：150.2 U/L)；中值樣本：將上述低值樣本與高值樣本按1∶1等比例混合。各濃度樣本分裝成6管，置-20 ℃冰凍保存。

1.2方法

1.2.1測定前準備參數設置和操作程序嚴格按照試劑盒說明書進行。測定前樣本室溫放置30 min，使用前充分混勻。

1.2.2樣本測定根據 CLSI EP 10-A2，每天按中、高、低、中、中、低、低、高、高、中的順序測定各濃度樣本一批，連續測定5 d。第一個樣本作為灌注系統用，不做統計。每批測定為連續測定，在測定過程中無論何種原因，如果后面的9個數據中的任何一個被拒絕、丟失或沒有報告，整個過程就必須重做。

1.2.3繪圖，數據處理以樣本的靶值(X)作為橫坐標、實測值與靶值差值(Y-X)為縱坐標作圖作偏差圖，以標準品的靶值(X)作為橫坐標、實測值(Y)為縱坐標作圖作散點圖，觀察有無離群點和線性情況；計算偏差、總不精密度，偏差允許范圍設定為靶值的±5%，總不精密度的允許范圍設定為5%；對截距、斜率、非線性、攜帶污染、漂移作回歸分析。

1.3統計學處理采用Excel統計軟件進行數據處理，校正回歸值作t檢驗，當t>4.6或t<-4.6時，P<0.01，差異有統計學意義。

2結果

2.1繪圖、目測離群點和線性mAST試劑盒的偏差圖和線性趨勢圖見圖1、2，目測各濃度樣本測定結果無離群點，精密度良好，實測值與靶值間線性良好。

圖1　　mAST試劑盒實測值與靶值偏差圖

圖2　　mAST試劑盒實測值與靶值線性趨勢圖

2.2數據分析按照NCCLS EP10-A2文件所設計的數據處理表格中要求進行計算，得出最后統計結果。

2.2.1偏差評估以各濃度5 d的測定結果均值與其對應靶值之差計算偏差，偏差均未超過設定的±5%范圍，臨床均可接受，見表1。

項目低值中值高值121.4±0.986.3±0.5151.4±1.0221.5±0.986.0±1.3150.9±0.4321.3±0.885.9±0.9151.7±1.8422.4±0.685.8±0.9151.2±1.0521.7±0.785.2±0.9149.0±0.6總均值(Y)21.785.9150.8靶值(X)22.386.3150.2偏差(Y-X)-0.6-0.40.6允許偏差±1.1±4.3±7.5可接受性評價可接受可接受可接受

表2　　mAST試劑盒不精密度分析結果

2.2.2總不精密度分析按照 EP10-A2文件提供的方法，計算總不精密度。各濃度總精密度均未超過允許誤差， 臨床均可接受，結果見表2。

2.2.3測定結果多重回歸分析表：每天結果回歸分析，計算每天測定結果的截距、斜率、非線性、攜帶污染、漂移，結果見表3。結果顯示，截距、斜率、非線性、攜帶污染、漂移均無統計學意義(-4.60.01)。

表3　　mAST試劑盒多元回歸分析匯總

3討論

研究顯示，mAST在心肌梗死患者血清的升高幅度明顯大于其他心肌疾病，是診斷心肌梗死最有價值的指標之一，不同的肝病患者血清mAST均有不同程度的升高，與其他指標聯合檢測可為臨床具體疾病提供依據，具有重要的臨床意義[1-3]。我們參照EP10-A2對其進行了初步評估，以探討其在臨床的應用價值。偏差評價結果顯示低、中、高濃度的絕對偏差均在允許偏差范圍之內，故其偏差是可接受的，并且多元回歸總結分析結果顯示斜率、截距的t值均在-4.6～4.6，其差異均無統計學意義(P>0.05)，說明試劑測定的準確度較好。總不精密度評價中，低、中、高濃度的總不精密度均小于最大允許總不精密度，說明其總不精密度也可以接受。多元回歸總結分析結果顯示攜帶污染、非線性的差異均無統計學意義(P>0.05)，試劑線性能力良好，攜帶污染率低，能較好地滿足臨床常規檢測要求。

參考文獻

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Preliminary evaluation on detection performance of mitochondria aspartate aminotransferase isoenzyme reagent

YeHuachun

(DepartmentofClinicalLaboratory,YongxiuCountyPeople′sHostipal,Jiujiang,Jiangxi330304,China)

Abstract:ObjectiveTo preliminarily evaluate the clinical application performance of mitochondria aspartate aminotransferase (mAST) isoenzyme reagent by using the EP 10-A2 document of the Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI).MethodsAccording to the EP10-A2 document promulgated by CLSI,the high,middle and low concentrations of mAST samples were measured by the specific order for continuous 5 d.The bias and the total imprecision of the detection results were calculated,the intercept,slope rate,non-linearity,carryover contamination and drift were performed the multiple regression analysis.ResultsThe biases of the low,middle and high concentrations of mAST samples were -0.6,-0.4,0.6 U/L respectively,the total imprecisions were 3.33%,1.10% and 0.92% respectively,the intercept,slope rate,non- linearity,carryover contamination and drift were -1.040,1.011,-0.196,0.000 and -0.073 respectively,their t values were -3.215,1.060,-0.191,0.217 and -0.569 respectively,the difference showing no statistical significance(P>0.01).ConclusionThe detection of mAST reagent kit shows good accuracy,good precision and good linearity,low carryover contamination rate and good stability,which can meet clinical application requirement.

Key words:mitochondria aspartate aminotransferase isoenzyme;EP 10-A2;preliminary evaluation

(收稿日期：2015-09-28)

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.01.014

文獻標識碼：A

文章編號：1673-4130(2016)01-0033-02

作者簡介：葉華春，女，主任技師，主要從事臨床生物化學與檢驗研究。