細菌培養法與聚合酶鏈式反應法對細菌性陰道炎輔助診斷的價值

鄧波，邱振華，葉小媚

（1.廣東省高州市人民醫院 檢驗科，廣東 高州 525200；2.廣東省高州市第二人民醫院 檢驗科，廣東 高州 525200）

細菌性陰道炎是婦科臨床上十分常見的病癥類型，陰道菌群失調導致其他致病菌大量繁殖是該病癥的主要治病原因。曾有相關研究顯示該病癥臨床發病率較高，若未能得到有效控制則極有可能導致炎癥入侵子宮或盆腔，甚至會導致患者不孕[1]。盡早確診并予以積極治療是提高該病癥治療效果的關鍵。本次研究將以隨機選取本院2013年12 月-2015 年5月接受治療的120例細菌性陰道炎患者為研究對象，探究細菌培養法與PCR法對細菌性陰道炎的輔助診斷價值，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

隨機選取本院2012年12月-2015年5月接受治療的120例細菌性陰道炎患者為研究對象，所有患者經臨床確診為細菌性陰道炎，均進行陰道分泌物采集，對120例患者分別采用細菌培養檢驗法和聚合酶鏈式反應（polymerase chain reaction, PCR）檢驗法。患者年齡22～43歲，年齡中位數32.5歲。所有患者均存在白帶增多、異味以及外陰瘙癢等臨床癥狀。排除標準：處于妊娠期或哺乳期的患者；存在嚴重其他臟器疾病的患者；半個月內曾進行過抗感染治療的患者；半個月內有過性生活的患者以及不能配合醫護人員完成本次研究的患者。

1.2 方法

細菌培養法：將待檢標本取出，放置到專用培養基內，在37℃二氧化碳（CO2）孵箱內培養48 h。待菌落長成后，將其中呈半透明、滴露狀及灰色并光滑的菌群取出。并依據相關檢測標準進行生化鑒定。

聚合酶鏈式反應檢驗法：采集1 000 μl含有無菌鹽水的陰道分泌物，將其放置在離心管內進行離心處理，離心時間為10 min，采用12 000 r/ min。離心處理完成后則可將上清液去除，之后把堿性裂解液加入到沉淀當中，震蕩混勻，放置在干式金屬恒溫儀內進行孵育，干式金屬恒溫儀穩定設定為60℃，孵育時間控制在10～15 min，之后采用12 000 r/min的轉速進行離心，離心時間為10 min。將上清液取出制作脫氧核糖核酸（deoxyribonucleic acid, DNA）模板，并進行PCR擴增，在進行擴增過程匯總要進行陰性對照。向其中加入雙蒸餾水、反應緩沖劑、引物及DNA模板等，反應條件設定為94℃ 60 s，37℃ 60 s，72℃ 120 s。之后采用PCR儀進行循環。

1.3 判斷標準

①細菌培養陽性評定標準：培養基上有典型菌落，生化鑒定為目的菌落則為陽性；②PCR法陽性評定標準：條帶寬度＜1 mm，邊緣整齊，在預期堿基大小范圍內，背景上無藥斑及引物二聚體，若出現超出預期堿基大小范圍的其他條帶均為假陽性[2]。陽性率=有病例數/總病例數×100%。

1.4 統計學方法

本次研究中所涉及數據均應用SPSS 19.0軟件進行統計學分析。計數資料以百分比（%）表示，組間比較采用χ2檢驗；等級資料采用Wilcoxon秩和檢驗，兩兩比較采用Nemenyi法。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組患者檢查結果陽性率比較

PCR法檢出陽性率明顯優于細菌培養法，兩種方法檢測陽性率比較差異有統計學意義（P＜0.05），見表1。

表1 兩組患者檢查結果陽性率比較 例

2.2 兩種檢驗方法所得陽性菌分布情況比較

兩種檢測方法所得陽性菌中尤以陰道加德納菌的檢出率最高，見表2。

表2 兩種檢驗方法所得陽性菌分布情況比較 例（%）

3 討論

健康女性陰道內存在多種正常菌群，若陰道內pH值出現異常（低于3.8或超過4.4）則可能致使菌群失調，從而導致正常菌群成為致病菌。相關臨床研究顯示導致女性出現陰道感染最為常見的致病菌通常為腸球菌、陰道加德納菌、葡萄球菌以及鏈球菌等[3]。本次研究結果也顯示陽性菌中尤以陰道加德納菌的檢出率最高。早期進行檢測確定病菌群對提高細菌性陰道炎的臨床治療效果、改善患者預后質量均具有積極意義。目前臨床用于細菌性陰道炎輔助診斷的方法多以細菌培養法、PCR法為主。

細菌培養法曾是臨床診斷細菌性陰道炎的金標準，但該種檢測方法操作復雜且對檢驗環境的要求較高，檢驗時間較長，故近年來逐漸被PCR法所取代。大量臨床研究結果證明PCR法的檢驗靈敏度及特異性更高，且操作簡單，檢驗時間短，更具臨床推廣應用價值[4-5]。上述研究結果在本次研究中也有明顯體現，本次研究結果顯示PCR法的臨床檢出陽性率為81.67%明顯高于細菌培養法。上述研究結果證明細菌培養法與PCR法中后者的檢驗準確率更高，其對于細菌性陰道炎病的輔助診斷價值更為理想，且該種檢測方法更為方便快捷，值得在細菌性陰道炎的臨床診斷工作中加以推廣應用。

[1]劉雪梅, 唐正宇, 謝良依. 應用多重PCR檢測細菌性陰道炎支原體[J]. 當代醫學, 2013, 29(12): 147-148.

[2]景曉敏. PCR檢驗法和細菌培養法在陰道細菌檢驗中的對比研究[J]. 醫藥論壇雜志, 2014, 35(10): 84-85.

[3]鄧石雄, 劉映云. 細菌培養法與PCR法對細菌性陰道炎輔助診斷的價值[J]. 海南醫學, 2015, 9(14): 2164-2165.

[4]姚虹, 呂治, 閻東輝. 實時熒光定量PCR檢測陰道加德納菌的方法及其臨床應用[J].中國醫刊, 2013, 48(11): 70-72.

[5]華玲. PCR檢驗法和細菌培養法用于陰道細菌檢驗的效果對比 [J]. 中外醫學研究, 2015, 17(2): 50-51.