體外診斷試劑臨床試驗方案的設計要求

王嘉明　雷孝鋒　李爾華　高旭年

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體外診斷試劑臨床試驗方案的設計要求

王嘉明雷孝鋒李爾華高旭年★

作者單位：中山大學達安基因股份有限公司產品注冊與知識產權部，廣東，廣州510065

隨著體外診斷技術的不斷發展，越來越多的新技術被應用于體外診斷試劑。新型體外診斷試劑若要面向市場，得到臨床應用，均要通過臨床試驗（少數特殊類型可以免臨床），只有臨床試驗驗證合格的試劑盒，才能最終被食品藥品監督管理部門批準注冊，走向市場。

要開展臨床試驗，設計臨床試驗方案是必要的，合格的臨床試驗方案需結合國家食品藥品監督管理總局（下稱“國家局”）最新發布的《體外診斷試劑臨床試驗技術指導原則》（下稱《指導原則》）的體外診斷試劑臨床試驗方案的設計要求以及結合產品特點、臨床預期用途來制定。本文根據《指導原則》的要求再結合一般體外診斷試劑的特點，總結出臨床試驗方案常采用的設計要求。

1　臨床試驗方案內容

1．1倫理方面

法規指出體外診斷試劑的臨床試驗（包括與已上市產品進行的比較研究試驗）是指在相應的臨床環境中，對體外診斷試劑的臨床性能進行的系統性研究。也即方案要以試劑盒臨床性能評估考核為主，檢測結果不對病人發布，且不作為臨床診治依據為宗旨設計。

方案中應提及：臨床試驗必須符合赫爾辛基宣言的倫理學準則，必須獲得臨床試驗機構倫理委員會的同意。研究者應考慮臨床試驗用樣本，如血液、羊水、胸水、腹水、組織液、胸積液、組織切片、骨髓等的獲得或試驗結果對受試者的風險性，應提交倫理委員會的審查意見及受試者的知情同意書。對于例外情況，如客觀上不可能獲得受試者的知情同意或該臨床試驗對受試者幾乎沒有風險，可經倫理委員會審查和批準后免于受試者的知情同意。受試者的權益、安全和健康必須高于科學和社會利益。為受試者保密，尊重個人隱私。防止受試者因檢測結果而受到歧視或傷害。臨床前研究結果支持進行臨床試驗。是否符合倫理要求是決定臨床試驗能否開展的關鍵。

1．2試驗要求方面

法規要求：申請人應在符合相關資質要求的臨床單位開展，在滿足臨床試驗最低樣本量要求的前提下，根據產品臨床預期用途、相關疾病的流行率和統計學要求，制定能夠證明其臨床性能的臨床試驗方案。所以設計方案時必須考慮這幾點：符合要求的臨床單位、滿足臨床試驗最低樣本量、臨床預期用途、相關疾病的流行率和統計學要求。

1．2．1符合要求的臨床單位

應根據產品特點及其預期用途，綜合不同地區人種、流行病學背景、病原微生物的特性等因素選擇獲得國家局資質認可的臨床試驗機構。就是要求要在有符合試劑盒檢測用的樣本的地區的醫院開展。例如檢測登革熱病毒的試劑盒，樣本要感染登革熱患者的血液樣本，就應該選擇登革熱高發地區的醫院。臨床試驗機構資質可在國家局網站數據查詢里查到。

1．2．2滿足臨床試驗最低樣本量

要求樣本量要滿足能正常開展臨床試驗，樣本量不能太少。各臨床試驗機構樣本量和樣本分布應相對均衡。例如：按《指導原則》要求，屬第三類的產品，臨床研究的總樣本數至少為1 000例。其中陽性病例數視各臨床單位實際收治患者情況確定，但應滿足統計學要求。

1．2．3臨床預期用途

應該涵蓋試劑盒的檢測方法、檢測物，說明試劑盒的用途。例如：試劑盒采用XX方法，可對XX標本中XX進行檢測。

1．2．4相關疾病的流行率

可在臨床試驗方案的背景里提及，每一份方案都應該有一個臨床試驗背景來描述相關疾病、目前主流檢測方法等等，相關疾病的流行率可簡單敘述。

1．2．5統計學要求

國家局有發布相關試劑技術審評指導原則的，可以根據指導原則要求來制定統計學內容，沒有特定統計要求的一般可以統計Kappa值、符合率、相關系數、線性等常規的統計。合理的統計學設計是十分重要的，統計分析是證明臨床性能的有力數據支持。

除以上幾點外，設計方案還應考慮臨床試驗采用的操作方法、試驗樣本入選要求以及試驗持續時間等。例如：試驗采用盲法、對比試驗設計，采用對照試劑和考核試劑同時進行盲法檢測，試驗結束后揭盲，對不符標本進行復檢；根據對照試劑檢測結果將受試標本分為病例組（陽性組）和對照組（陰性組）等；試驗樣本主要選取何種病例作為入選病例、樣本類型為何種、臨床試驗持續時間幾個月等。

2　臨床試驗方案具體格式

2．1試驗背景

試驗背景可以涵蓋被測物質的介紹，通過背景可以了解被測物質的基本情況，還可以介紹目前檢測用的主要方法，這樣可以體現試劑盒使用的方法處于怎樣的水平。尤其對于申報創新產品，由于運用了新的技術方法，更應突出產品具有顯著的臨床應用價值，例如更便捷、更靈敏、更省時、成本更低等等。此外，還可以提及產品的應用前景等。

2．2預期用途

可以算作是對背景的總結，可用簡短的一段話來概括。

2．3試驗的方法，內容和目的

例如臨床試驗采用XX方法的試驗設計。將樣本編碼，采用對照試劑和考核試劑同時進行檢測，對不符標本進行復檢。根據對照試劑檢測結果將標本分為陽性組和陰性組，將考核試劑檢測結果與其進行比較分析，用以評價考核試劑的臨床應用性能，并對有效性及安全性提供重要的依據。

2．4整個試驗過程

介紹整個試驗流程，例如檢測指標→試驗對象入選要求→研究樣本→數量及分組方法→樣本跟蹤研究→選取的對照試劑→質控→結果的統計分析方法。

2．5試劑盒性能評價和統計分析

要用數據來支持試劑盒的性能，包括普遍采用的包括靈敏度、特異度、準確度、Kappa值、相關系數、線性回歸分析、可靠性、效益評價等。

2．5．1試劑盒性能評價

2．5．1．1靈敏度又稱陽性符合率，取值范圍在0%～100%之間，其值越接近100%，真實性愈大。

2．5．1．2特異度又稱陰性符合率，取值范圍在0%～100%之間，其值越接近100%，真實性愈大。

2．5．1．3準確度又稱總符合率，取值范圍在0% ～100%之間，其值越接近100%，與對照方法符合程度越高。

2．5．1．4Kappa值用于2種試劑盒測值一致性的評價。又稱吻合度系數，Kappa值在0～＋1間判斷一致性才有意義。Kappa值越大，表示一致性越好，吻合度越高。一般認為Kappa值≥0．75，說明已經取得相當滿意的一致程度。若Kappa值＜0．4，則說明一致程度不夠理想。

2．5．1．5相關系數r代表2種試劑盒測定結果的相關程度，越接近于1表明考核試劑盒與對照試劑盒檢測結果的相關程度越好。

2．5．1．6線性回歸分析評價2種試劑盒測定結果的線性程度?？己嗽噭┖械慕Y果與對照試劑盒結果所呈現的圖越接近于一條直線，表明考核試劑與對照試劑測值所呈的線性越好。

2．5．1．7可靠性即檢測陰陽性質控，結果應符合要求。

2．5．1．8效益評價就是對整個試驗的操作、結果分析、質量控制等過程做的綜合評價，表明試劑盒的臨床應用價值。

2．5．2統計分析

應結合試劑盒性能評價中的評價指標進行統計分析，用于支持試劑盒性能評價。統計分析靈敏度、特異度、準確度、Kappa值、相關系數、線性回歸等指標見表1。

表1　臨床試驗結果的統計分析Table 1　Statistical analysis of clinical trial results

用下列公式計算：

靈敏度＝A／（A＋C）×100%

特異度＝D／（B＋D）×100%

準確度＝（A＋D）／（A＋B＋C＋D）×100%

Kappa值、相關系數、線性回歸等通過SPSS 15．0統計軟件進行分析計算。

只有當這些評價指標的結果符合相關要求時，才能表明試劑盒的性能評價符合臨床應用需求，達到了臨床試驗的目的。

3　結論

綜上所述，符合要求的臨床試驗方案，應當包括充分的背景介紹、試驗機構和樣本的選擇、詳實的試驗流程、充分的性能評價、合理的統計分析等。試驗方案設計的好壞，直接關系到整個產品臨床評價的質量及注冊申請的審評審批進度，繼而影響到試劑能否快速有效地推向市場。所以，臨床試驗方案設計的合理、規范、全面，才能充分的驗證試劑的臨床性能，提升可信度，使臨床試驗機構和審批部門更認可整個臨床試驗過程的質量，還可以指導整個臨床試驗過程有序、快速、準確地開展下去，對推動產品更快的走向市場起到極其重要的作用。

通訊作者：★高旭年，E-mail：gaoxunian＠126．com

基金項目：“863”計劃重點項目（2011AA02A101）；廣州市科技計劃（2014Y2－00220）