乳腺癌組織中HPA蛋白的表達及其與ER、PR、HER-2、P53表達的相關性

宋慧琴，李道明，金家巖

(1.河南大學第一附屬醫院病理科，河南 開封 475001；2.鄭州大學第一附屬醫院病理科，河南 鄭州 450052)

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乳腺癌組織中HPA蛋白的表達及其與ER、PR、HER-2、P53表達的相關性

宋慧琴1，李道明2，金家巖1

(1.河南大學第一附屬醫院病理科，河南 開封 475001；2.鄭州大學第一附屬醫院病理科，河南 鄭州 450052)

[摘要]目的探討乙酰肝素酶(heparanase，HPA)蛋白在乳腺癌組織中表達的臨床意義及其與雌激素受體(ER)、孕激素受體(PR)、人類表皮生長因子受體2(HER2)、P53表達的關系。方法采用免疫組化S-P法檢測78例乳腺癌組織中HPA蛋白的表達。結果HPA蛋白在乳腺癌組織中的陽性表達率為69.2%。HPA蛋白在乳腺癌組織中的表達與乳腺癌患者年齡、腫瘤大小無關(P>0.05)，與淋巴結轉移、臨床分期有關(P<0.05)。HPA蛋白在乳腺癌組織中的表達與ER、PR蛋白的表達無明顯相關性(r=0.178、0.056，P>0.05)，與HER-2、P53蛋白表達呈正相關關系(r=0.436、0.310，P<0.05)。結論HPA蛋白可能與乳腺癌疾病進展有關，且與HER-2、P53蛋白表達呈正相關關系。

[關鍵詞]乳腺癌；乙酰肝素酶；雌激素；孕激素；HER-2；P53；免疫組化

乳腺癌是危害婦女健康的最常見惡性腫瘤之一，近年其發病率也逐年上升。在乳腺癌的發生、發展過程中有許多基因發生改變，對這些基因及其產物的檢測，有助于乳腺癌的術前診斷、治療指導及預后判斷。本研究采用免疫組化技術檢測乳腺癌組織中乙酰肝素酶(heparanase，HPA)在蛋白水平的表達，探討HPA蛋白在乳腺癌組織中表達的臨床意義及其與雌激素受體(estrogen receptor，ER)、孕激素受體(progesterone receptor，PR)、人類表皮生長因子受體2(human epidermal growth factor receptor-2，HER2)、P53蛋白表達的關系。

1材料與方法

1.1臨床資料收集我院2012年1月至2014年12月乳腺非特殊型浸潤性癌根治術切除標本共78例，其中女性患者77例，男性患者1例；年齡33～70歲，中位年齡54歲，其中≥50歲44例，<50歲34例；腫塊≤2 cm 22例，腫塊>2 cm 56例；有淋巴結轉移36例，無淋巴結轉移42例；TNM分期：Ⅰ~Ⅱ期49例，Ⅲ~Ⅳ期29例。所有患者術前均未接受化、放療。

1.2檢測方法及結果評估所有組織標本均經質量分數4%中性甲醛固定，常規石蠟包埋，3 μm連續切片，并采用免疫組化S-P法檢測HPA蛋白表達。HPA蛋白免疫反應以細胞漿呈現棕黃色顆粒為陽性細胞。結果評估：HPA以每張切片腫瘤區域計數10個高倍視野，陽性細胞數>10%定義為陽性，≤10%定義為陰性。

1.3統計學處理采用SPSS 10.0處理數據，率的比較采用四格表資料χ2檢驗，相關性檢驗用Spearman相關分析，檢驗水準α=0.05。

2結果

2.1HPA蛋白的表達與乳腺癌臨床病理特征的關系HPA蛋白在乳腺癌組織中的陽性表達率為69.2%(圖1、2)，其表達與乳腺癌臨床病理特征的關系見表1。

圖1　HPA在浸潤性導管癌

2.2乳腺癌組織中HPA蛋白表達與ER、PR、HER-2、P53蛋白表達的相關性乳腺癌組織中HPA蛋白的陽性表達率為69.2%，ER蛋白的陽性表達率為70.5%(55/78)，兩者無明顯相關性(r=0.178，P>0.05)；PR蛋白的陽性表達率為70.5%(55/78)，與HPA蛋白無明顯相關性(r=0.056，P>0.05)；HER-2的陽性表達率為74.4%，與HPA蛋白呈正相關關系(r=0.436，P<0.05)；P53蛋白的陽性率為60.3%，與HPA蛋白呈正相關關系(r=0.310，P<0.05)。見表2。

表1HPA蛋白的表達與乳腺癌臨床病理特征的關系

臨床病理特征nHPA陽性陰性陽性率/%χ2P年齡/歲 ≥5044291565.9 <503425973.50.5230.470腫塊大小/cm ≤222121054.5 >256421475.03.1020.078淋巴結轉移 無42251759.5 有3629780.64.0250.045臨床分期 Ⅰ~Ⅱ期49301961.2 Ⅲ~Ⅳ期2924582.83.9660.046

表2乳腺癌組織中HPA蛋白

表達與ER、PR、HER-2、P53蛋白表達的相關性

指標HPA陽性陰性rPER 陽性4114 陰性13100.1780.119PR 陽性3916 陰性1580.0560.625HER-2 陽性4711 陰性7130.4360.000P53 陽性389 陰性16150.3100.006

3討論

3.1HPA與乳腺癌的浸潤轉移HPA分布于胎盤、胸腺、脾臟、淋巴結等正常組織中。Harley等[1]發現鼠的惡性黑色素瘤腦轉移患者血清中HPA水平明顯升高。本研究結果顯示，與無淋巴結轉移及TNM分期Ⅰ~Ⅱ期乳腺癌比較，HPA蛋白在有淋巴結轉移及TNM分期Ⅲ~Ⅳ期乳腺癌組織中呈高表達，提示HPA在乳腺癌的浸潤轉移過程中發揮了作用。HPA是一種可以降解硫酸乙酰肝素蛋白多糖(heparan sulfate proteoglycan，HSPG)的酶。HSPG是細胞外基質的主要成分，而HPA可以降解HSPG，從而破壞組織屏障[2]。HPA自身可促進血管內皮細胞的芽生和侵襲性生長[3]?？傊?，HPA可能通過破壞組織屏障和誘導血管生成，促進腫瘤的浸潤轉移。

3.2HPA與HER-2HER-2是眾所周知的癌基因。HER-2在伴有轉移的乳腺癌組織中呈高表達，并且預后較差[4]。HER-2可以上調相關血管生成因子，促進乳腺癌的淋巴結轉移[5]。本研究發現，乳腺癌組織中HPA蛋白的表達與HER-2蛋白的表達呈正相關關系，提示HPA與HER-2在腫瘤細胞轉移的過程中發揮了協同作用。

3.3HPA與P53P53突變型的高表達與乳腺癌的分化程度、臨床分期、淋巴結轉移等預后因素關系密切，P53突變型陽性，往往提示患者預后較差[6]。研究[7]證實，P53野生型能與HPA啟動子結合，從而抑制其活性，而P53突變型不能與HPA啟動子結合，并可上調HPA的表達。本研究發現乳腺癌組織中HPA蛋白的表達與P53蛋白的表達呈正相關關系，提示HPA蛋白的高表達可能為P53突變型上調HPA的結果。

3.4HPA與乳腺癌靶向治療的靶點HPA可以作為乳腺癌靶向治療的一個靶點進行研究，通過對HPA抑制劑的研究可為乳腺癌浸潤轉移的治療提供科學依據。Marchetti等[8]認為抗寄生蟲藥舒拉明及其類似物可抑制HPA的活性，并抑制HPA的血管誘導生成作用，從而抑制腫瘤細胞浸潤轉移。

總之，HPA蛋白可能與乳腺癌疾病進展有關，且與HER-2、P53蛋白表達呈正相關關系，提示HPA與后兩者在乳腺癌的疾病進展中可能具有協同作用。HPA可以作為乳腺癌靶向治療的一個靶點選擇。

參考文獻：

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[2]Hasengaowa,Kodama J,Kusumoto T,et al.Loss of basement membrane heparan sulfate expression is associated with tumor progression in endometrial cancer[J].Eur J Gynaecol Oncol,2005，26(4):403-406.

[3]Kodama J,Shinyo Y,Hasengaowa,et al.Loss of basement membrane heparan sulfate expression is associated with pelvic lymph node metastasis in invasive cervical cancer[J].Oncol Rep,2005,14(1):89-92.

[4]Schippinger W,Regitnig P,Bauernhofer T,et al.The course of serum HER-2/neu levels as an independent prognostic factor for survival in metastatic breast cancer[J].Oncol Rep,2004，11(6):1331-1336.

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[7]Baraz L,Haupt Y,Elkin M,et al.Tumor suppressor p53 regulates heparanase gene expression[J].Oncogene,2006,25(28):3939-3947.

[8]Marchetti D,Reiland J,Erwin B,et al.Inhibition of heparanase activity and heparanase-induced angiogenesis by suramin analogues[J].Int J Cancer,2003,104(2):167-174.

Expression of HPA Protein and the Correlations with ER,PR,HER-2,P53 Protein Expressions in the Breast Cancer

Song Huiqin1,Li Daoming2,Jin Jiayan1

(1.DepartmentofPathology,theFirstAffiliatedHospitalofHenanUniversity,Kaifeng475001,China;2.DepartmentofPathology,theFirstAffiliatedHospitalofZhengzhouUniversity,Zhengzhou450052,China)

[Abstract]ObjectiveTo investigate the expression of heparanase (HPA) and the correlations with estrogen receptor (ER),progesterone receptor (PR),human epidermal growth factor receptor-2 (HER-2),P53 protein expressions in the breast cancer.MethodsThe expressions of HPA protein were detected in the 78 cases of breast cancer by immunohistochemistry S-P method.ResultsThe positive expression rate of HPA protein was 69.2% in the breast cancer.The expression of HPA protein was not correlated with the age of patient and size of mass in the breast cancer (P>0.05); but was correlated with the lymph node metastasis and the clinical stage of breast cancer (P<0.05).There were no correlations between the expression of HPA protein and the expression of ER or PR protein (r=0.178,0.056; P>0.05); The expression of HPA protein was positively correlated with the expression of HER-2 and P53 protein (r=0.436,0.310; P<0.05).ConclusionHPA protein is correlated with progression of breast cancer,and is positively correlated with the HER-2 and P53.

[Key words]breast cancer; heparanase; estrogen receptor; progesterone receptor; human epidermal growth factor receptor-2; P53; immunohistochemistry

(收稿日期：2015-05-03)

[中圖分類號]R737.9；R730.23

[文獻標識碼]A

[文章編號]1673-5412(2016)01-0015-03

DOI:10.3969/j.issn.1673-5412.2016.01.004

作者簡介：宋慧琴(1975-)，女，碩士，主治醫師，主要從事病理診斷及腫瘤病理研究。E-mail:shq757@126.com