李洪,王光棟,陳乙萱,鄭淋,黎其朝
(瓊海市人民醫院檢驗科,海南 瓊海571400)
全自動尿液有形成分分析儀細菌檢測對尿路感染診斷價值的探討
李洪,王光棟,陳乙萱,鄭淋,黎其朝
(瓊海市人民醫院檢驗科,海南 瓊海571400)
目的 探討UF-1000i全自動尿液有形成分分析儀細菌信息對臨床尿路感染(UTI)診斷的應用價值。方法 收集216例臨床疑似尿路感染患者尿液樣本,分別采用UF-1000i全自動尿液有形成分分析儀和尿液細菌培養及鑒定,比較兩者結果。結果 216例臨床診斷為尿路感染患者的UF-1000i全自動尿液有形成分分析儀細菌數量檢測陽性率為38.0%(82/ 216),細菌培養陽性率為31.0%(67/216),兩種方法檢測結果經統計無顯著性差異(P>0.05)。UF-1000i全自動尿液有形成分分析儀細菌檢測診斷尿路感染的敏感度為69.0%、特異性為82.9%、假陽性率為17.1%、假陰性率為31.0%、陽性預測值為73.2%、陰性預測值為79.8%、診斷符合率為77.3%。結論 UF-1000i全自動尿液有形成分分析儀檢測簡易、快速,細菌檢測有助于及時輔助尿路感染臨床診斷,可作為臨床篩查的手段。
全自動有形成分分析儀UF-1000i;細菌培養;尿路感染;菌尿
尿路感染(UTI)是一種臨床常見病,指的是腎、尿管、膀胱、尿道上發生的非特異性炎癥,大部分是由大腸埃希菌感染引起的,細菌從外尿道口侵入,沿尿道上行,引起膀胱和腎發生感染[1]。尿路感染的診斷主要根據患者臨床癥狀和尿液檢驗結果進行綜合判斷。尿液細菌的定量培養是診斷尿路感染的“金標準”,但尿液細菌培養檢驗周期長,通常需要3~4d,且近年來文獻報道傳統的中段尿或導管尿假陽性率高,中段尿培養假陽性率可達61%,導管尿培養假陽性率可達38%[1,2]。因此,若過分依賴尿細菌培養結果,就會延誤對患者的及時治療。UF-1000i尿沉渣分析儀對尿液中的細菌進行單獨檢測有利于尿路感染和篩查[3-5]。為快速篩查UTI并提高檢出率,本研究以細菌培養結果為“金標準”,采用UF-1000i全自動尿液有形成分分析儀對216例中段尿樣本進行細菌定量檢測并評估其敏感度、特異性、假陽性率、假陰性率、陽性預測值、陰性預測值、準確度,探討UF-1000i全自動尿液有形成分分析儀細菌檢測對尿路感染的診斷的可行性,為臨床提供快速、可靠、準確的早期診斷尿路感染數據信息。
1.1一般資料選取2013年1-12月瓊海市人民醫院住院和門診216例臨床疑似尿路感染患者,其中男性84例,女性132例。
1.2泌尿系感染診療診斷標準⑴中段尿(要求尿停留在膀胱中4~6h以上)細菌定量培養,菌落數≥105菌落形成單位(CFU)/ml;⑵中段尿沉渣白細胞數≥5個/高倍鏡,或有尿路感染癥狀者;具備上述2項可以確診,如無2項則應再作尿細菌計數復查,如菌落數≥105CFU/ml,且2次的細菌相同者,可以確診;⑶膀胱穿刺尿培養,如細菌陽性,亦可確診;⑷作尿細菌培養計數有困難者,可用治療前清晨清潔中段尿 (尿停留于膀胱4~6h以上)正規方法離心尿沉渣后革蘭染色找細菌,如細菌數>1個/油鏡視野,結合臨床尿路感染癥狀,亦可確診;⑸尿細菌數在104~105CFU/ml之間者,應復查,如仍為104~105CFU/ml,需結合臨床表現來診斷或作膀胱穿刺尿培養來確診[6]。
1.3器材和試劑UF-1000i全自動尿液有形成分分析儀、配套試劑及質控品均購于日本希森美康公司;VITEK-2細菌鑒定分析儀及配套細菌鑒定卡購于法國生物梅里埃公司;血平板和麥康凱平板購于鄭州安圖公司。
1.4樣本留取使用對外陰部及尿道口周圍刺激較小的消毒液揩凈之后,自然排尿用一次性無菌帶蓋尿杯收集患者中段尿10ml,30min內送實驗室檢查。
1.5尿細菌培養及鑒定方法按臨床和檢驗標準化研究所(CLSI)的要求采取無菌操作,用1ul定量鉑環將特定量充分混勻的尿液涂布血平板和麥康凱平板,至于37℃溫箱內孵育18~24h。有細菌生長的需要做涂片染色鏡檢,計數生長菌落,并對菌株進行鑒定。無菌生長的繼續孵育24h,再做判別,細菌生長且菌落計數革蘭陽性球菌≥104CFU/ml,或革蘭陰性桿菌≥105CFU/ml,為細菌培養陽性。同份樣本中檢測3種或3種以上不同的雜菌,應認為樣本收集或處理不當,標本已被污染。
1.6UF-1000i全自動尿液有形成分分析儀檢測儀器工作前進行每日室內質控,確認質控結果在控后,將接種完的尿液樣本在UF-1000i全自動尿液有形成分分析儀上檢測,記錄白細胞數、細菌數以及酵母樣真菌統計情況[7]。按照廠家提供的UTI信息標準白細胞數≥10/μl且細菌≥105個/μl為陽性判斷是否有尿路感染可能。并保存通過UF-1000i全自動尿液有形成分分析儀測定具有UTI信息的樣本散點圖。
1.7統計學方法采用SPSS 11.0統計軟件包進行統計學分析。采用配對資料χ2檢驗。評價UF-1000i全自動尿液有形成分分析儀診斷UTI的敏感度、特異性、假陽性率、假陰性率、陽性預測值、陰性預測值、準確度等參數。比較UF-1000i全自動尿液有形成分分析儀細菌信息與尿液細菌培養法檢測陽性率的差異及一致性。P<0.05為差異有統計學意義。
2.1陽性率比較216份尿樣本中,培養結果陽性為67份,陽性率為31.0%,其中革蘭球菌14例占(20.1%),革蘭陰性桿菌48例占(71.5%),以大腸埃希菌為主23例占(47.9%),真菌5例占(7.5%)。UF-1000i全自動尿液有形成分分析儀細菌檢測與尿細菌培養檢出率比較分析,如表1所示。216例臨床疑似尿路感染患者樣本檢出率分別為37.9% (82/216)和31.05%(67/216),兩種方法學陽性率間差異無統計學意義(P>0.05)。
2.2靈敏度、特異性統計臨床隨訪病例資料顯示,216例臨床疑似尿路感染患者中87例按泌尿系感染診斷標準為確診患者占40.3%(87/216)。UF-1000i全自動尿液有形成分分析儀細菌檢測篩查判斷UTI敏感度為69.0%、特異性為82.9%、假陽性率為17.1%、假陰性率為31.0%、陽性預測值為73.2%、陰性預測值為79.8%、診斷符合率為77.3%,與臨床診斷結果比較分析如表2所示。尿路感染臨床診斷的確診病例數高于UF-1000i全自動尿液有形成分分析儀細菌檢測篩查判斷UTI的病例數。
快速診斷UTI,對實驗室而言,必須證明正確采集的中段尿為膿尿(白細胞尿)和細菌尿,關于膿尿的判定,當尿沉渣檢查的白細胞數≥5個/ HPF,就判定為鏡下膿尿。而細菌尿則是根據定量培養法加以判定,中段尿的菌量超過104~105CFU/ ml就判定為真性細菌尿。尿沉渣檢查中的“1+”(細菌數5個/HPF)相當于定量培養法的104~105CFU/ ml,但定量培養法是以非離心尿為對象,而尿沉渣檢查是以離心尿為對象,而且菌量會受到尿比重、酸堿度、滲透壓改變以及存放時間影響,所以尿沉渣檢查中的結果并不與定量培養法的檢查結果相符[8-10]。應用UF-1000i全自動尿液有形成分分析儀檢測即可避免上述的干擾。其檢測原理為:采用紅光半導體激光,通過聚次甲基類熒光染色對細菌的進行特異染色,在細菌單獨通道進行高精度的細菌定量的測定的同時,還可以利用其散點圖進行細菌信息提示。
本實驗對216例臨床疑似尿路感染患者樣本經UF-1000i全自動尿液有形成分分析儀檢測存在細菌陽性共82例,陽性率為37.9%(82/216),尿細菌定量培養陽性共67例,陽性率為31.0%(67/ 216)這與樊云蓉等[11]及丁志祥等報告結果一致[12],UF-1000i全自動尿液有形成分分析儀檢測結果高于定量培養法,這是由于UF-1000i全自動尿液有形成分分析儀計數尿液中所有的細菌,而不考慮其活性[13,14],而在尿細菌定量培養中則只有活細菌才能在血平板和麥康凱培養基介質上形成菌落,還有可能多重因素導致某些活菌在以上培養基中處于靜止狀態,或由于使用了偏性厭氧菌和陰道加德納菌等的培養基中不發育的菌種而呈陰性,其中有60例與UF-1000i全自動尿液有形成分分析儀檢測的結果一致。臨床確診尿路感染87例患者,其真陽性樣本為60例,診斷敏感度為69.0%,真陰性樣本107例,診斷特異性為82.9%,假陽性樣本為22例,假陽性率17.1%,假陰性樣本為27例,假陰性率31.0%。另一方面,因為本次探討依據臨床病例但沒有調查是否使用了抗菌藥、是否有基礎疾患等臨床背景問題,所以也要考慮抗菌藥的影響等問題。導致尿細菌定量培養出現假陰性[15]。本次探討中,一些誤差產生的真正原因仍然懸而未決,必須另外使用其他確認細菌存在的程序,如上所述尿液沉渣革蘭染色 (因其省去了培養程序并能快速確認病原體存在與否)等。對于患者樣品而言,規范無菌的新鮮尿液樣品采集。臨床信息如治療史對抗生素治療產生的偏倚相當重要。因此當細菌培養陰性時并不能完全否定UTI的診斷,需要其他診斷方式如尿沉渣白細胞計數等參數并結合臨床綜合分析。
綜上所述、在臨床工作中用UF-1000i全自動尿液有形成分分析儀開展UTI細菌信息檢測可對泌尿系統感染患者提供快速、準確、可靠的實驗室診斷數據,對臨床的治療、病情監測、預后具有重要價值。
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To explore the appilication value of bacteria detection in the diagnosis of urinary tract infection by using the fully auto-mated urine particle analyzer UF-1000i
LI Hong,WANG Guangdong,CHEN Yixuan,ZHENG Lin,LI Qichao.Department of Laboratory Medicine,Qionghai City People's Hospital,Qionghai Hainan 571400,China.
Objective To study the application value of bacteria detection in the diagnosis of urinary tract infection(UTI)by using the fully automated urine particle analyzer UF-1000i.Methods A total of 216 urine samples from the patients with clinical suspected urinary tract infection were analyzed by the fully automated urine particle analyzer UF-1000i and proceeded with the bacteria culture and identification at the same time.According to the guidelines for the diagnosis of urinary tract infection,the sensitivity,false positive rate,false negative rate,positive predictive value,negative predictive value and accuracy of the diagnosis of urinary tract infections were calculated respectively.And the results derived from fully automated urine particle analyzer UF-1000i and the urine bacteria culture were compared.Results The positive rate of bacteria detection with the fully automated urine particle analyzer UF-1000i and bacteria culture was 37.9%(82/216),31.0%(67/216)respectively(P<0.01).The sensitivity,specificity,false positive rate,false negative rate,positive predictive value,negative predictive value and accuracy for screening urinary tract infection with the fully automated urine particle analyzer UF-1000i were 69.0%,77.3%,82.9%,17.1%,31.0%,73.2%and 79.8%,respectively.ConclusionsThe detection of bacteria with the fully automated urine particle analyzer UF-1000i is helpful for screening early urinary tract infection.
UF-1000i;Bacterial culture;Urinary tract infection;Bacteruria
R446.12
A
1674-1129(2016)04-0455-03
10.3969/j.issn.1674-1129.2016.04.014
李洪,男,1974年11月生,本科,學士學位,主管技師,研究方向:臨床檢驗基礎,腫瘤標志物。
(2016-05-18;
2016-06-30)