復方益智顆粒治療老年性癡呆有效成分的文獻研究

郝二偉 鄧家剛 侯小濤 杜正彩 吳航宣 繆劍華

(1 廣西藥用植物園，南寧，530000； 2 暨南大學生物醫學工程博士后流動站，廣州，510632；3 廣西中醫藥大學廣西中藥效篩選重點實驗室，南寧，530001)

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專題——中藥藥效評價模型建立與實踐

復方益智顆粒治療老年性癡呆有效成分的文獻研究

郝二偉1,2,3鄧家剛2侯小濤2杜正彩2吳航宣2繆劍華3

(1 廣西藥用植物園，南寧，530000； 2 暨南大學生物醫學工程博士后流動站，廣州，510632；3 廣西中醫藥大學廣西中藥效篩選重點實驗室，南寧，530001)

文章主要通過文獻研究的方法，對復方益智顆粒治療老年性癡呆的有效成分進行了歸納和分析。結果表明，人參皂苷Rb1、Rd、Re、Rg1、Rg2、Rg3，能通過不同的分子機制對Aβ引起的神經細胞毒性起到抑制作用；三七皂苷R1、R2、R4、R6、Fa，也具有減輕細胞對Aβ的神經毒性反應和促進細胞突起生長的作用，對老年性癡呆的病理發展有拮抗作用；絞股藍皂苷III、IV、Ⅻ、X、Ⅰ、A-AH，可以明顯提高模型小鼠的學習記憶能力，改善海馬膽堿能系統功能，對誘導Aβ的AD細胞模型具有保護作用；淫羊藿苷對Aβ25-35所致神經細胞損傷具有保護作用，有利于老年性癡呆的治療；原兒茶酸具有良好的神經保護作用；桑椹花色苷和氧化白藜蘆醇都對神經系統有良好的保護作用。研究結果提示，皂苷類和黃酮類成分有可能是復方益智顆粒治療老年性癡呆的物質基礎，可為后續該制劑治療老年性癡呆物質基礎的研究奠定基礎。

復方益智顆粒；阿爾茨海默癥；有效成分

老年性癡呆又稱阿爾茨海默癥(Alzheimer′s Disease，AD)，是一種嚴重危害老年人身心健康的中樞神經系統退行性疾病，臨床表現為進行性記憶力減退、認知功能障礙、分析判斷力下降、意識模糊和智力逐漸喪失，最終導致生活不能自理[1]。其特征性病理變化為大腦皮質萎縮，并伴有β-淀粉樣蛋白沉積，神經元纖維纏結，大量記憶性神經元數目減少，以及老年斑形成。AD是現代社會最常見的老年性中樞神經系統疾病之一，隨著社會的發展和人口的老齡化，AD的發病率不斷增加[2]。根據國際阿爾茨海默癥聯合會(Alzheimer′s Disease International，ADI)發布的《2009 World Alzheimer Report》顯示，全球約有3 600萬人患上阿爾茨海默癥，而且患者數量每20年將增長約1倍，預計2030年將達到6 600萬人，2050年約1.15億人。另據ADI 2010年報道，老年癡呆在全世界造成的社會成本超過世界GDP的1%(6 040億美元)。2005年我國流行病學調查結果顯示[3]，65歲以上老年人的AD患病率為4.8%，且隨著社會的發展而增加，2010年第六次全國人口普查中國65歲及以上老年人口已達1.18億，據此估計，我國癡呆人數已達570萬，到本世紀中葉，老年人口將增加到4億，AD患者也將接近2 000萬。AD已成為老年人嚴重的健康問題及嚴峻的社會問題，引起世界各國的普遍關注。因此，開發有效防治AD的藥物，對我國有深遠的醫學及社會意義。

1 復方益智顆粒組方

復方益智顆粒是中泰合作開發的針對老年性癡呆具有預防保健作用的中藥保健產品，處方由人參、絞股藍、三七、淫羊藿、益智仁、桑椹6味中藥組成，已獲得生產批文和國家發明專利。方中絞股藍、人參為君，補氣養陰，安神益智；臣以三七、淫羊藿，活血化瘀通腦脈，補腎精、充腦髓；佐以益智仁、桑椹加強補腎滋陰之力。全方共奏補氣益智、活血化瘀，滋補肝腎等多方面功效，組方科學、標本兼顧。

2 人參中改善老年性癡呆的有效成分

人參(PanaxginsengC.A.Mey.)為傳統的抗衰老藥物，具有大補元氣，復脈固脫，補脾益肺，生津止渴，安神益智等功效，臨床常用于治療老年性癡呆。人參皂苷類成分是人參的特征性成分，目前已分離出60余種皂苷單體[4]。近年來眾多學者針對人參皂苷類成分Rb1、Rd、Re、Rg1、Rg2、Rg3防治老年性癡呆的藥效和作用機制開展了廣泛深入的研究，研究表明人參皂苷能通過不同的分子機制對Aβ引起的神經細胞毒性起到抑制作用。人參皂苷Rb1通過抗氧化[5]，對抗Aβ25-35誘導的神經元凋亡[6]，減少Aβ分泌及降低細胞內ROS和Ca2+水平[7-9]，下調β-分泌酶及PS-1表達水平[10-12]，促進神經元再生[13]，減輕Aβ25-35誘導的tau蛋白過度磷酸化[14]，上調神經內肽酶表達[15]等減少Aβ產生或，減輕Aβ所致神經細胞毒性的作用機制起到防治AD的作用。人參皂苷Rd可通過抑制神經元氧化應激損傷反應[16]，減少過度磷酸化Tau蛋白的形成與沉積[17]，起到減輕Aβ的神經細胞毒性作用。人參皂苷Re通過抗炎，抑制鈣超載，保護線粒體功能，拮抗P淀粉樣蛋白的損傷等多個靶點起到防治AD的作用。人參皂苷Rg1通過抑制神經元凋亡[18-21]，調節β-分泌酶的活性[22]，降低tau蛋白表達水平[23]，保護線粒體功能[24]，對抗Aβ的細胞毒性作用。人參皂苷Rg2具有保護AD模型海馬神經元結構，減少APP和Aβ表達的作用[25-26]。人參皂苷Rg3可通過上調神經內肽酶表達，抑制神經細胞凋亡[27]起到抑制β-淀粉樣肽神經毒性作用。

2 三七中改善老年性癡呆的有效成分

三七(Panaxnotoginseng(Burk)F.H.Chen)是我國著名的傳統中藥，具有活血化瘀、消腫止痛等功效。皂苷是三七的主要有效成分之一，迄今為止，已從三七的不同部位分離得到60余種單體皂苷成分，這些單體皂苷中也有很多與人參所含皂苷成分相同，如人參皂苷Rb1、Rb2、Rd、Re、Rg1、Rg2，尤以人參皂苷Rg1和Rb1含量最高。除此以外，也有一些是三七獨有的皂苷類成分，如三七皂苷R1、R2、R4、R6、Fa等。研究表明[28]，三七皂苷可以有效地改善氧化損傷型類AD大鼠腦能量代謝及線粒體功能，從而用于AD的治療。三七皂苷也具有減輕細胞對Aβ的神經毒性反應和促進細胞突起生長的作用，對老年性癡呆的病理發展有拮抗作用[29]。三七皂苷還可以下調快速老化癡呆模型小鼠SAMP8腦內NF-κB轉錄因子P50的表達從而減少APP的生成，亦通過升高快速老化癡呆模型小鼠SAMP8腦內α-分泌酶的活性，降低β-分泌酶活性而減少APP代謝為Aβ[30]。

3 絞股藍中改善老年性癡呆的有效成分

絞股藍(Gynostemmapentaphyllum(Thunb.)Makino)作為五加科之外含有人參皂苷類化學成分的植物之一，近40余年來，國內外學者對絞股藍化學成分及生物活性進行了廣泛和深入地研究。文獻報道絞股藍主要含有皂苷類、黃酮類、糖類、萜類、有機酸、生物堿、氨基酸、蛋白質、脂肪等化學成分，其中，皂苷類為絞股藍的主要活性成分[31]。目前己分離出140多種皂苷，被命名為絞股藍皂苷(Gps)，其中III、IV、Ⅻ、X、Ⅰ、A-AH分別與人參皂苷Rb1、Rb3、Rd、F2、K和Rg3為同物異名，同一結構皂苷Ⅻ是人參皂苷Rd的8倍，總皂苷含量是人參的3倍[32]。絞股藍對Aβ引起的動物學習記憶能力減退、海馬神經元內異常表達細胞周期蛋白和鈣穩態失衡有一定的逆轉作用[33]。絞股藍皂苷還可以明顯提高模型小鼠的學習記憶能力，改善海馬膽堿能系統功能；促進體外培養的膽堿能神經元及其突起生長，提高神經元的活性和ChAT表達，并可有效抑制Aβ1-40誘導的神經元iNOS表達和細胞凋亡，對誘導Aβ的AD細胞模型具有保護作用[34]。

4 淫羊藿中改善老年性癡呆的有效成分

淫羊藿(EpimediumbrevicornuMaxim.)為我國傳統的補益中藥，其化學成分主要為黃酮類化合物、多糖、木脂素等[35]，其中以黃酮類化合物淫羊藿苷含量較多，現已證明淫羊藿苷具有抗氧化、抗炎及植物雌激素樣作用，而這些生物活性作用與神經功能維持密切相關，在治療AD的中醫方劑中淫羊藿也占有重要地位。研究表明[36]，淫羊藿苷能顯著改善AD模型大鼠的學習記憶能力，其作用機制可能是通過抑制膠質細胞的增生活化、抑制炎性反應對神經細胞的損傷實現的。淫羊藿苷對Aβ25-35所致神經細胞損傷具有保護作用，有利于老年性癡呆的治療[37]。淫羊藿苷能夠增強疊氮鈉模型大鼠腦內線粒體活性，抑制Aβ產生，增強神經營養因子表達[38]。淫羊藿黃酮能改善APP轉基因模型小鼠學習記憶能力和減少Aβ經由淀粉源途徑生成及含量[39]。淫羊藿總黃酮可以通過調節Bcl-2、Bax蛋白表達來抑制細胞凋亡，改善AD大鼠模型的學習記憶能力[40]。

5 益智仁中改善老年性癡呆的有效成分

益智仁(AlpiniaoxyphyllaMiq.)為中醫臨床治療老年癡呆常用藥材，具有暖腎固精縮尿、溫脾止瀉攝唾的功效。益智仁的化學成分主要為倍半萜類、二萜類、單萜類、黃酮類、二苯庚烷類、簡單芳香族化合物及脂肪族化合物。倍半萜類為該植物的主要化學成分類型，并具有一定的生物活性。近年來關于益智仁提取物和化學成分的神經保護、提高學習記憶能力、抗氧化、抗衰老等方面具有藥理作用，益智仁醇提物能夠顯著降低谷氨酸誘導的小鼠皮質神經元細胞的凋亡，提高細胞生存能力[41]，益智仁中的原兒茶酸(PCA)能夠顯著降低H202誘導的PC12細胞損傷，能夠通過降低內源性抗氧化酶的活性、抑制體內白由基的形成來實現其良好的神經保護作用，能夠減少神經干細胞凋亡。Koo等[42]發現益智仁水提物在能夠劑量相關抑制Aβ誘導的神經細胞死亡，能夠減少小鼠局部缺血損傷誘導的神經元細胞死亡，使海馬CA1區突觸數目增加，從而發揮神經保護作用。

6 桑椹中改善老年性癡呆的有效成分

桑椹(MorusalbaL.)具有滋陰補血、生津潤燥的功效，用于肝腎陰虛、眩暈耳鳴、心悸失眠、須發早白、津傷口渴、內熱消渴、腸燥便秘等病證。桑椹的主要活性成分為花色苷類化合物、白藜蘆醇、蘆丁、多糖等[43]。現代藥理研究表明，桑椹具有調整機體免疫功能、促進造血細胞生長、抗衰老、抗氧化、抗疲勞、降血糖、降血脂、降血壓、護肝及抗HW病毒作用、抗AIDS作用，在臨床上應用很廣，尤其是對老年病和延緩衰老有重要意義[44]。桑椹花色苷和氧化白藜蘆醇都對神經系統有良好的保護作用，桑椹提取物對過氧化氫環境中的PC12細胞的保護作用，發現提取物對模擬缺血、缺糖的PC12細胞有保護作用。研究表明[46]富含花色苷的桑椹可以提升早衰老鼠的抗氧化能力和認知能力，有助于預防老年癡呆癥。

7 展望

課題組前期研究已證實復方益智顆粒在動物與人體實驗中均能改善老年性癡呆學習記憶功能障礙，能不同程度地對抗或減輕由Aβ毒性導致的老年性癡呆樣病理損害。我們從文獻研究的角度對該制劑治療老年性癡呆的物質基礎進行了研究，結果表明皂苷類和黃酮類成分有可能是其治療老年性癡呆的有效成分。課題組后期將開展該制劑的入血成分及其代謝產物進行分析和推測，最終明確其治療老年性癡呆的物質基礎，為該產品的質量標準提高及推廣應用奠定基礎。

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(2016-10-17收稿 責任編輯：洪志強)

Literature Research of the Effective Components in Compound Yizhi Granule for the Treatment of Senile Dementia

Hao Erwei1,2,3, Deng Jiagang2, Hou Xiaotao2, Du Zhengcai2, Wu Hangxuan2, Miao Jianhua3

(1GuangxiMedicinalBotanicGarden,Nanning530000,China；2ThePost-DoctoralResearchStationofBiomedicalEngineering,JinanUniversity,Guangzhou510632,China；3GuangxiKeyLaboratoryofEfficacyScreeningofChineseMateriaMedica,GuangxiUniversityofChineseMedicine,Nanning530001,China)

This passage summarized and analyzed the effective ingredients of treating Alzheimer′s disease of Fufang yizhi granule by literature research. The results showed that ginsenosideRb1, Rd, Re, Rg1, Rg2, Rg3of Panax ginseng C.A. may have inhibition effect on the nerve cell toxicity caused by protein Aβ by different molecular mechanism; notoginsenosideR1, R2, R4, R6, Fa could relieve cell response to neurotoxicity of Aβ, and promote the outgrowth of neurites, have antagonism on the pathological development of Alzheimer′s disease; Gynostemma saponins III, IV, Ⅻ, X,Ⅰ, A-AH could obviously enhance the ability of learning and memory of mouse, improve the function of the hippocampus cholinergic system, and had the protection effect in AD cell model induced by Aβ; icariin had the protection effect in AD cell model induced by Aβ, which benefited for the treatment of AD; protocatechuic acid, mulberry anthocyanins, oxyresveratrol had the good protection effect on nervous system. The results of the study suggest that saponins and flavonoid are the main ingredients of Fufang yizhi Granule for treating Alzheimer′s disease, which lays as foundation for the further study of this product on the material basis.

Fufang yizhi Granule, Alzheimer′s disease; Effective compounds

廣西國際科技合作項目(編號：桂科合1347004-16)；廣西重點實驗室建設項目(編號：15-140-31)；廣西農作物廢棄物功能成分研究協同創新中心建設(編號：CICAR2015-Z1)

鄧家剛，教授，博士研究生導師，研究方向：中藥藥效篩選及中藥基礎理論研究,E-mail：dengjg53@126.com

R285.5

A

10.3969/j.issn.1673-7202.2016.11.001