燙傷藥水噴霧劑對大鼠燙傷創面療效的病理研究*

吳曉斌　陳德軒　張　星　馬朝群

江蘇省中醫院病理科(南京 210029)

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·實驗研究·

燙傷藥水噴霧劑對大鼠燙傷創面療效的病理研究*

吳曉斌陳德軒△張星▲馬朝群△

江蘇省中醫院病理科(南京 210029)

摘要目的：探討應用燙傷藥水噴霧劑對燙傷大鼠創面治療作用的病理機制。方法：50只淺II°燙傷SD大鼠隨機分為燙傷藥水噴霧劑高、中、低劑量治療組，磺胺嘧啶銀組，基質軟膏組，判斷創面病理組織學炎癥程度，觀察創面新生毛細血管數目。結果：燙傷藥水噴霧劑高、中劑量組有創面炎癥輕、燙傷創面毛細血管數量，促進創面愈合作用。燙傷藥水噴霧劑中劑量組和基質軟膏組新生毛細血管數有顯著性差異。結論：燙傷藥水噴霧劑中劑量對淺II°大鼠燙傷創面有減輕創面組織炎癥程度，增加新生毛細血管數量，促進燙傷創面愈合的功效。

主題詞 燙傷，實驗性@燙傷藥水大鼠

燙傷在現代社會的發病率呈上升趨勢。燙傷是臨床常見熱力燒傷的一種，因熱力、熾熱金屬、火焰、蒸氣和高溫氣體等所致的體表組織損害，主要是皮膚損害，以中小面積Ⅱ°燒傷為主[1]。臨床表現為：紅腫、熱痛等改變，損傷主要發生在皮膚、黏膜，治療效果主要與病變的范圍和深度相關。長期以來，沒有一種較為理想的治療藥物和方法，始終難以解決患者的疼痛、感染、結痂、留疤、植皮、致殘等問題[2]。燙傷藥水噴霧劑由地榆、虎杖、黃連等藥物組成，具有清熱解毒、化腐生肌的功效，治療各種原因導致的燙傷不感染，愈合好，費用低。本實驗通過燙傷藥水噴霧劑治療淺Ⅱ度燙傷大鼠動物模型，對燙傷創面修復進行病理觀察。

1材料1.1實驗動物SD大鼠50只，體重190～220g，動物合格證號：SCXK(浙)2008-0033，南京中醫藥大學動物實驗中心提供。置室溫26℃,濕度50%環境，正常攝食攝水，常規喂養1周后用于實驗。

1.2材料及儀器蘇木素-伊紅染液，南京宇盛達科技有限公司；70%酒精500mL；10%水合氯醛50mL；燙傷藥水噴霧劑由黃連、忍冬藤、地榆等中藥組成、江蘇省中醫院院內制劑(蘇藥制字Z0400054)，主要制作工藝流程：以浸漬法等提取相關成分，致測定乙醇為75%，分別制備濃度為10g、20g、30g的低中高濃度藥水；磺胺嘧啶銀軟膏(國藥準字H44020614)；Leica TP 1020自動脫水機，SAKURA Tissue-Tek.TEC組織包埋機，Leica RM 2235切片機，Leica DM 2000顯微鏡，捷達病理圖文信息系統。

2方法2.1模型建立及分組SD大鼠按照常規飼養1周后，稱重剃毛，70%酒精消毒，然后以10%水合氯醛3mL/kg腹腔注射麻醉后，將制作好的動物固定板覆蓋在大鼠背部，恒溫水浴箱溫度設定在75℃，將4層無菌紗布浸泡在水浴箱內，10s后取出，均勻覆蓋在大鼠背部裸露處15s，用0.9%氯化鈉注射液沖洗，無菌紗布擦干水分，形成淺Ⅱ度燙傷模型。

2.2給藥方法燙傷后30min將50只大鼠隨機分為5組，即基質軟膏組(模型組)、磺胺嘧啶銀軟膏組(陽性對照組)、燙傷藥水噴霧劑低劑量組(相當于含提取液10g)、燙傷藥水噴霧劑中劑量組(相當于含提取液20g)、燙傷藥水噴霧劑高劑量組(相當于含提取液30g)。模型組給予基質軟膏燙傷部位外涂，陽性對照組予磺胺嘧啶銀軟膏燙傷部位外涂每次20mg/只，1d1次。按高、中、低劑量組分別外噴相應藥物，3噴約10mL，1d1次。

2.3病理檢查燙傷后第5、10、15 d，每組大鼠麻醉后截取1.5cm×1.5cm創面皮膚，每次取兩塊，取材后即刻置于10 %中性福爾馬林液中，經 24h固定后，按外檢病理要求取材，標本經脫水、浸蠟處理、石蠟包埋切片，蘇木素-伊紅(HE)染色，光鏡觀察病理組織學，每個標本隨機觀察5個視野(在切片中心及四周各取1個視野)，病理圖文分析系統計算各組大鼠新生毛細血管數目。

2.4統計學方法采用SPSS19.0統計學軟件進行分析，數據以均數±標準差表示，采用t檢驗。

3結果3.1大鼠燙傷創面病理組織學正常大鼠皮膚在第5、10、15d病理組織學示表皮結構清晰層次分明，真皮中見毛囊分布，多量汗腺結構，膠原纖維呈編織狀形態。燙傷后第5d，模型組小鼠表皮層細胞變性水腫，大量急性炎細胞浸潤，間質水腫明顯，細胞結構紊亂，壞死組織豐富。燙傷藥水噴霧劑高、中、低劑量組和陽性對照組創面組織水腫較輕，組織學結構明顯，壞死少見，炎癥程度較輕，創面肉芽組織生長活躍。燙傷后10d，創面開始愈合，治療組急慢性炎細胞浸潤，成纖維細胞增生，膠原纖維形成。模型組大鼠表皮壞死明顯，真皮層部分液化性壞死且間質大量急性炎細胞浸潤。燙傷藥水噴霧劑高、中、低劑量組和陽性對照組大鼠創面部分表皮結構初步形成，炎性滲出物少見。真皮汗腺毛囊增生，肉芽組織形成，新生毛細血管豐富，真皮層結締組織完整。燙傷后15d，模型組肉芽組織比較明顯，成纖維細胞部分產生膠原，多量急慢性炎細胞，皮膚異常增生嚴重，纖維無規則排列。燙傷藥水噴霧劑高、中、劑量組和陽性對照組大鼠愈合創面見少量急慢性炎細胞，毛細血管管腔閉合，肉芽組織減少，皮膚結構基本完整，排列規則。以燙傷藥水噴霧劑中劑量組和陽性對照組最佳。

3.2大鼠創面組織毛細血管數量比較用藥后第5d、10d、15d，燙傷藥水噴霧劑高、中劑量組和磺胺嘧啶銀組創面肉芽組織新生毛細血管數量均高于基質軟膏組(P<0.05)。第10d，燙傷藥水噴霧劑中劑量組創面肉芽組織中毛細血管數均高于燙傷藥水噴霧劑高、低劑量組(P<0.05)。燙傷藥水噴霧劑低劑量組(相當于含提取液10g)、實驗中劑量組(相當于含提取液20g)、實驗高劑量組(相當于含提取液30g)均明顯促進大鼠燙傷創面脫痂愈合；病理組織學可見：大鼠燙傷后第 5、10、15d燙傷創面炎癥明顯得到抑制。以實驗中劑量組效果最佳。

4討論燒燙傷由于熱力高溫氣體、強酸強堿等導致多發性體表組織損害，以中小面積Ⅱ°燒傷為主。皮膚損傷中燙傷較為常見，燙傷創面修復是一個復雜的病理生理過程，包括炎癥反應、肉芽組織形成以及基質形成與重新塑形等[3]。祖國醫學總結出清熱解毒、養陰生津、益氣理脾、活血逐瘀、托里排膿等治療理念及燒傷內外兼治的原則[4]。燙傷藥水噴霧劑方中虎杖清熱解毒，散瘀止痛，易收斂，為君藥；地榆涼血止血，解毒斂瘡；忍冬藤清熱疏風，通絡止痛；大黃、黃連清熱瀉火，涼血解毒，逐瘀活血，均為臣藥。冰片清熱止痛，止癢防腐，為佐使[5]。燙傷藥水噴霧劑臨床用于淺Ⅱ°燙傷，減輕燙傷創面早期水腫抑制肉芽組織炎癥，加速創面愈合及減輕疤痕形成，恢復毛囊、皮脂腺等皮膚附屬器，對創面愈合后皮膚功能有很好改善作用，傷口恢復加快，病程明顯縮短。

燒傷創面愈合由炎性細胞、修復細胞、細胞外基質、炎性介質及生長因子等多個因素在機體的調控下，完整而有序的進行一系列修復活動，影響創面修復局部因素主要是感染和血液供應[6]。燙傷后皮膚表皮細胞壞死，組織液滲出，創面因炎性反應微循環通透性增加，微血管擴張等導致體液滲出和組織水腫，微循環的瘀滯則可造成局部栓塞或者組織缺血造成氧平衡破壞、局部壞死，使創面加深。研究提示，燒燙傷創面感染中革蘭陰性菌不動桿菌比例最高。燙傷藥水噴霧劑能抑制細菌生長，降低創面炎癥程度，減少急慢性炎細胞浸潤，減輕創面水腫；增加新生微血管，改善創面血液供應，促進創面肉芽組織修復。

燒燙傷時大面積創面未及時封閉、修復，會導致患者體液大量流失，出現感染、休克、多器官功能障礙綜合征等連鎖病理變化，也會影響創面愈合后瘢痕深度和面積。燒傷創面愈合后，皮膚瘢痕組織既影響美觀，又因缺少汗腺、毛囊等皮膚附屬物，影響皮膚組織功能[7]。病理組織學顯示，燙傷藥水噴霧劑中劑量組結痂消失，表皮局部形成，皮膚基底層細胞排列整齊，真皮中成纖維細胞多見，中性粒細胞基本消失，局部見淋巴單核細胞散在，肉芽組織較薄，毛細血管有閉合現象。新生汗腺皮脂腺分布在真皮中，纖維排列齊整。與基質軟膏組相比有顯著性差異。

新生毛細血管是創傷后創面肉芽組織中的主要成分，在創傷愈合過程中起著重要作用，創面組織中新生血管形成，可以改善局部缺血、缺氧狀態，達到氧平衡。燒傷創面修復過程中過強、過弱的炎癥反應都不利于創面愈合。本研究顯示燙傷藥水噴霧劑低劑量組由于有效藥物濃度不高，在燙傷創面達不到最佳治療藥物濃度，抑菌消炎效果略差。而高劑量組各種成分有效濃度偏高，刺激炎癥組織，造成創面滲液較多。兩組創面愈合程度與中劑量組相比略遜。中劑量組能使創面毛細血管增加，減輕炎癥程度，使肉芽組織中炎癥程度加快組織從炎癥期過渡到修復期。促進燙傷創面微血管新生及血液循環，豐富燙傷部位的氧、營養物質及生物活性因子的供應，增強創面組織修復能力。燙傷藥水噴霧劑有效減輕燙傷創面炎癥，促進燙傷創面微血管新生及血液循環，增強創面組織修復能力。體現了祖國醫學對潰瘍創面以祛腐生肌的理念。

綜上研究顯示：燙傷藥水噴霧劑可以減少創面炎癥因子，增加新生毛細血管數目，促進創面愈合減少皮膚疤痕的功效。我們觀察燙傷創面皮膚病理學改變和新生毛細血管數量，研究燙傷藥水噴霧劑治療燙傷創面機理, 為中醫藥治療燙傷創面提供實驗依據，有助于發揮臨床作用。

參考文獻

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(收稿2015-10-20；修回2015-12-13)

【中圖分類號】R541.4

【文獻標識碼】A

doi:10.3969/j.issn.1000-7369.2016.03.048

*江蘇省中醫藥管理局科技項目(LZ11023)

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