芪藶強心膠囊對阿霉素心衰大鼠心功能及心室重構的影響*

陳　莉　任　越

河北省保定市中西醫結合醫院(保定 071000)

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芪藶強心膠囊對阿霉素心衰大鼠心功能及心室重構的影響*

陳莉任越△

河北省保定市中西醫結合醫院(保定 071000)

摘要目的：探討芪藶強心膠囊對阿霉素誘導的充血性心力衰竭大鼠心功能及心室重構的影響。方法：將45只SD大鼠隨機分為模型組(A組)、芪藶強心組(B組)、對照組(C組)。采用鹽酸阿霉素誘導制作心力衰竭大鼠模型。于藥物干預第8周時測定大鼠心臟血流動力學、心功能參數、心肌基質金屬蛋白酶-2、-9(MMP-2、-9)進行比較分析。結果：大鼠經過灌胃8周后，B組大鼠左心室EF值和FS值較A組明顯上升。實驗干預8周后，與C組大鼠比較，A組與B組大鼠SAP、DAP、LVMI、LVEDP較模型組顯著升高，±dp/dtmax較模型組顯著降低。與A組大鼠比較，B組大鼠SAP、DAP、LVEDP、LVMI較A組明顯下降，±dp/dtmax顯著升高。各組大鼠實驗干預8周后，B組大鼠MMP-2的活性較A組明顯減低(1.38±0.11 vs 1.81±0.24)。B組大鼠MMP-9的活性較A組明顯減低(1.17±0.26 vs 2.09±0.31)。結論：芪藶強心膠囊能夠改善鹽酸阿霉素誘導的心力衰竭大鼠心臟血流動力學、心功能并能改善大鼠左心室重構。

主題詞 心力衰竭@芪藶強心膠囊@阿霉素大鼠

慢性心力衰竭(CHF)是各種心臟疾病的嚴重階段，死亡率甚至超過了某些惡性腫瘤。心室重構異常也是導致心衰難以控制的重要原因，大鼠心肌基質金屬蛋白酶(MMP)異常能反映大鼠心室重構的判斷[1]。臨床除傳統強心、利尿治療外，血管緊張素轉換酶抑制劑(ACEI)和β受體阻滯劑的聯合治療推動了心衰治療，而傳統中醫藥治療在西醫治療的基礎上以其獨特的作用強化了這一過程。芪藶強心膠囊能起到西醫治療心力衰竭的強心、利尿、擴血管的作用，其具有益氣溫陽、活血通絡、瀉肺利水功效能更好的改善心力衰竭患者的預后[2]。本實驗通過阿霉素誘導建立心力衰竭大鼠模型，應用芪藶強心膠囊治療8周以后，觀察其對心衰大鼠血流動力學、心功能及心室重構的影響，探討芪藶強心膠囊通過對心肌基質金屬蛋白酶-2、-9(MMP-2、-9)的作用治療心力衰竭的可能機制。

1材料1.1實驗動物45只雄性SD大鼠(清潔級Ⅱ)，體重(200±25)g，購于河北省動物實驗中心，實驗動物許可證：SCXK(冀)2008-1-003。飼養條件：溫度(23±2)℃、濕度(55±10)%，12/12h 光照黑暗循環，常規攝食飲水，常規喂養1周后用于實驗。

1.2材料及儀器芪藶強心膠囊(主要成分人參、黃芪、丹參、紅花、附子、澤瀉、玉竹、陳皮等，0.3g/粒，批號：國藥準字：Z20040141)；鹽酸阿霉素(10mg/支，批號：國藥準字H44024359)；BL-420E+生物信號采集系統；GEViVid7型超聲儀；12L高頻淺表探頭；LGR10-4.2型離心機；大鼠心肌基質金屬蛋白酶-2、-9(MMP-2、-9)試劑盒(GMS30071.1v.A，GENMED SCIENTIFICS INC.USA)。

2方法2.1模型建立及分組采用隨機數字表法將實驗用45只SD大鼠隨機分為3組：模型組(A組)、芪藶強心組(B組)、對照組(C組)。模型制備[3]：注射用水5mL溶解鹽酸阿霉素加入0.9%的生理鹽水，配置成1mL生理鹽水含有鹽酸阿霉素0.8mg，避光低溫存放備用。A組與B組大鼠于第1周、3周、5周通過腹腔注射鹽酸阿霉素0.3mg/100g體重，于第2周、4周、6周通過腹腔注射鹽酸阿霉素0.2mg/100g體重，共6次；對照組同時注射等量生理鹽水。

2.2給藥方法自注射鹽酸阿霉素5周后，各組大鼠開始給予藥物干預，A組、C組給予給予生理鹽水4mL/d灌胃，B組給予芪藶強心膠囊0.6g/(kg·d)加生理鹽水至4mL灌胃。術后常規喂養、灌胃8周后，大鼠出現明顯呼吸頻率增快、呼吸幅度加深、飲食減少、皮毛干枯無光、爪背紫紺水腫、尿少等心力衰竭癥狀。8周后取各實驗組剩余的大鼠為研究對象。A組、B組、C組各死亡大鼠3只、2只、2只。

2.3指標檢測及方法2.3.1大鼠心臟超聲檢測：經灌胃給藥8周后，戊巴比妥鈉50mg/kg經腹腔注射麻醉，大鼠仰臥固定于鼠板，胸前區剃毛，固定高年資主任醫師行心臟超聲檢查。圖像采集定位于左室短軸乳頭肌平面，使用M型超聲進行檢查，應用Teichholtz方法測量大鼠左心室射血分數(LVEF%)和左心室短軸縮短率(LVFS%)。所有大鼠心臟資料均保存后進行脫機分析，分別測量大鼠3個心動周期的數據取平均值，用計數資料分析。

2.3.2血流動力學測定：大鼠心臟超聲數據檢測完畢后，連接BL-420E+生物信號數據采集系統后進入軟件血流動力學模塊。將大鼠固定于鼠臺上，頸部去毛，常規碘伏消毒，取頸部正中入路，逐層切開組織顯露右側頸總動脈，經右側頸總動脈插管，待壓力穩定后，描記頸動脈收縮壓(SAP)、舒張壓(DAP)等。記錄完畢繼續推入導管4.5～5.0 cm至左心室，描記左心室舒張末壓(LVEDP)、收縮期左心室內壓上升的最大變化速率(+dp/dtmax)，舒張期左心室內壓下降的最大變化速率(-dp/dtmax)。采集數據完畢后，立即剖胸取出心臟，將左、右心房及右心室剪掉，預冷PBS液沖洗，濾紙拭干后稱左心室質量，計算左室重量指數(LVMI)=左心室重量/體重。

2.3.3心肌基質金屬蛋白酶-2、-9檢測：取100mg大鼠心肌組織，使用眼科剪刀剪碎，加入裂解緩沖液，在冰水混合物容器中使用勻漿管勻漿致無明顯肉眼可見心肌組織，將制作好的心肌勻漿液吸入另一預冷的離心管中，4℃下低溫離心機12000rpm離心15min后取上清液吸入另一預冷的離心管，即可得到總蛋白，BCA法測定蛋白濃度，取含蛋白量60μg的標本，應用MMP-2、-9檢測試劑盒按照說明書嚴格操作，檢測活性并記錄。

2.4統計學方法有關實驗數據用均數±標準差來表示，各組在相同時間段的實驗結果應用單因素方差分析，用SPSS16.0統計軟件分析。

3結果3.1各組大鼠心功能比較大鼠經過灌胃8周后，A組(模型組)和B組(芪藶強心組)大鼠左心室EF值、FS值與C組(對照組)比較明顯下降(P<0.05)，提示經阿霉素誘導后大鼠出現明顯心功能減低；經過灌胃8周后，B組大鼠左心室EF值、FS值較A組明顯上升(P<0.05) ，見表1。

3.2各組大鼠血流動力學比較實驗干預8周后，與C組大鼠比較，A組與B組大鼠SAP、DAP、LVMI、LVEDP較模型組顯著升高，+dp/dtmax、-dp/dtmax較模型組顯著降低(P<0.05)，提示A組及B組大鼠存在明顯的心力衰竭。與A組大鼠比較，經芪藶強心膠囊治療后，B組大鼠SAP、DAP、LVEDP、LVMI較A組明顯下降(P<0.05)，+dp/dtmax、-dp/dtmax顯著升高(P<0.05) ，見表2。

4討論中醫藥學將心力衰竭歸于水腫、喘證、痰飲、心悸等范疇，心力衰竭的病機在祖國醫學研究中，可以概括為本虛標實，虛實夾雜，本虛則以氣虛及陰陽虛為主。芪藶強心膠囊能增加心肌收縮力、心輸出量、腎血流量，利尿消腫的作用[4-5]。細胞外基質金屬蛋白酶(MMP)是一類含有鋅離子的內源性蛋白水解酶，MMP-2，-9作用在底物為IV 型膠原及變性膠原，研究發現心臟MMP-2、-9的表達異常與心臟收縮功能障礙及心室重構相關[6-7]。阿霉素是常用的抗腫瘤藥物，其心臟毒性基礎是氧自由基的形成，并且可以通過引起細胞內游離Ca2+升高導致細胞鈣超載和抑制ERKl/2信號通路的激活而加劇細胞凋亡來發揮毒性作用導致心臟增大、心力衰竭。通過腹腔注射阿霉素建立心力衰竭模型，目前已成為國際上比較公認的建模方法。

芪藶強心膠囊黃芪益氣利水，丹參活血祛瘀，人參補氣通絡，葶藶子瀉肺行水，紅花活血化瘀，五加皮強心、利尿，玉竹養心陰以防利水傷正，澤瀉健脾滲濕、利水消腫，桂枝、陳皮補氣健脾[8]。具有益氣溫陽、活血通絡、瀉肺利水功效，同時具有雍補滯氣、防利水傷正的作用，起到改善患者心功能，增加心肌收縮力、減輕心臟負荷的作用[9]。本實驗研究結果提示，大鼠經過灌胃8周后，A組和B組大鼠左心室EF值和FS值與C組比較明顯下降，說明阿霉素誘導后大鼠出現明顯心功能減低，B組大鼠心功能較A組明顯上升，說明大鼠經芪藶強心膠囊治療后心功能改善。實驗干預8周后，A組與B組大鼠SAP、DAP、LVMI、LVEDP較模型組顯著升高，±dp/dtmax較模型組顯著降低，與A組大鼠比較，經芪藶強心膠囊治療后，B組大鼠SAP、DAP、LVEDP、LVMI較A組明顯下降(P<0.05)，±dp/dtmax顯著升高，提示經芪藶強心治療后大鼠血流動力學好轉。B組大鼠MMP-2MMP-9的活性較A組明顯減低。據此，我們提出芪藶強心膠囊對阿霉素誘導的心力衰竭有明顯的治療作用，可能機制是通過對心肌細胞外基質金屬蛋白酶-2及-9的影響而改善左心室重構，但具體作用靶點仍需進一步深入研究。

參考文獻

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(收稿2015-10-21；修回2015-12-10)

通訊作者：△河北省保定市第五醫院(保定 071000)

【中圖分類號】R541

【文獻標識碼】A

doi:10.3969/j.issn.1000-7369.2016.03.049

*河北省自然科學基金資助項目(H2014104023)