二乙酰大黃酸固體分散體的制備以及體外溶出度的測定

郝 陽， 黃家宇， 張 敏， 李 莉， 白 璐， 母艷華（貴州醫科大學藥學院，貴州貴陽550004）

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二乙酰大黃酸固體分散體的制備以及體外溶出度的測定

郝 陽， 黃家宇， 張 敏， 李 莉*， 白 璐， 母艷華
（貴州醫科大學藥學院，貴州貴陽550004）

摘要：目的 制備二乙酰大黃酸固體分散體，提高其體外溶出性能。方法 以聚乙烯吡咯烷酮k30（PVP k30）和泊洛沙姆188（Po1oxamer188）為輔料載體，采用研磨法制備二乙酰大黃酸固體分散體，紅外測定法和差示掃描量熱法對固體分散體進行結構分析。結果 二乙酰大黃酸∶PVP k30∶Po1oxamer188的最佳比例為2∶1∶1，該條件下制備二乙酰大黃酸固體分散體時，其體外溶出度在30 min達到了90%。差示掃描量熱法顯示，藥物與輔料形成共聚物；紅外分析顯示，二乙酰大黃酸與兩種輔料未形成氫鍵，結構未發生變化。結論 以PVP k30和Po1oxamer188為載體制備的固體分散體能夠顯著提高二乙酰大黃酸的體外溶出度。

關鍵詞：二乙酰大黃酸；固體分散體；體外溶出度；聚乙烯吡咯烷酮k30；泊洛沙姆188

二乙酰大黃酸（又名雙醋瑞因）是大黃酸通過雙乙酰化所得到的產物［1］，其作為治療骨關節炎的新藥，具有阻止軟骨被破壞、促進軟骨合成及修復的作用［2］。由于它在水和醇中的溶解度低，體外溶出效果差，生物利用度不理想，因此需通過制劑技術來提高其溶出度。目前，以固體分散體技術提高難溶性藥物的溶出度已經得到了廣泛應用［3］，藥物制成固體分散體后，以分子或無定型狀態高度分散于水溶性載體中，從而提高藥物的溶出速率與溶出度［4］。本實驗以水溶性聚乙烯吡咯烷酮k30（PVP k30）和泊洛沙姆188（Po1oxamer188）為輔料［5-7］，制備二乙酰大黃酸固體分散體，并對其溶出度進行測定，為將來相關制

劑產品的生產提供技術依據。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 T6新世紀紫外分光光度計（北京普析通用儀器責任有限公司）；ZIS-6G溶出試驗儀（天津市天大天發科技有限公司）；水浴鍋。

1.2 試藥 二乙酰大黃酸（純度＞99%）；聚乙烯吡咯烷酮k30、泊洛沙姆188均為分析純。

2 方法

2.1 固體分散體的制備

2.1.1 二乙酰大黃酸固體分散體的制備 按比例稱取二乙酰大黃酸、PVP k30以及Po1oxamer188適量，將PVP k30和Po1oxamer188溶解于無水乙醇中，再倒入二乙酰大黃酸固體粉末，50℃水浴蒸干無水乙醇，-20℃冰箱冷凍2 h，真空干燥器干燥過夜，研磨，過100目篩備用［8］。

2.1.2 藥物與輔料物理混合物的制備 取二乙酰大黃酸、泊洛沙姆188和PVP k30適量，按2∶1∶1比例混合，即得。

2.2 二乙酰大黃酸溶出度測定

2.2.1 最大吸收波長的選擇 稱取二乙酰大黃酸對照品適量，磷酸鹽緩沖液（pH＝7.0）溶解稀釋成4 μg/mL的溶液。另取泊洛沙姆188和PVP k30適量，磷酸鹽緩沖液溶解稀釋，進行紫外掃描。發現二乙酰大黃酸在258 nm處有最大吸收波長，泊洛沙姆188和PVP k30對其最大吸收沒有影響。

2.2.2 標準曲線的制備 精密稱取二乙酰大黃酸對照品50.30 mg，置于1 000 m L量瓶中，加磷酸鹽緩沖液（pH＝7.0）適量，超聲溶解，定容至刻度，搖勻，即得對照品貯備液。再分別精密量取貯備液適量，置于25 mL量瓶中，磷酸鹽緩沖液稀釋定容成1.006、2.013、4.026、6.038、8.051、10.064 μg/mL的標準溶液，以磷酸鹽緩沖液為空白，在258 nm處測定吸光度值。以質量濃度為橫坐標（χ），吸光度為縱坐標（y）進行線性回歸，回歸方程為y＝0.098 7χ＋0.011 4，r＝0.999 9。表明二乙酰大黃酸在1.006～10.064 μg/mL范圍內線性關系良好。

2.2.3 回收率試驗 精密量取溶出度測定條件（pH＝7.0的磷酸緩沖液，溶出溫度［37±0.5］℃，轉速100 r/min）下的溶出樣品0.5 mL，共9份，置于25 mL量瓶中，同時分別加入質量濃度為50.32 μg/mL的對照品貯備液1.0、2.0、3.0 mL，定容至25 mL，按照“2.2.2”項下方法測定吸光度值，計算回收率。結果，平均回收率為94.99%，ISD為1.78%。

2.2.4 溶出度的測定 采用《中國藥典》2010年版第二部附錄XC溶出度測定第一法（籃法）測定［9］，量取pH 7.0的磷酸緩沖液（脫氣）900 mL，作為溶出介質，以溶出溫度（37±0.5）℃，轉速100 r/min為溶出條件進行測定。再精密稱取含二乙酰大黃酸50 mg的固體分散體適量，置于溶出杯中，開始計時，分別于1、2、4、8、20、30 min取樣5 mL，0.45 μm微孔濾膜過濾。同時，向溶出杯中補充等量等溫的溶出介質，取續濾液稀釋10倍，按照“2.2.2”項下方法進行測定，計算藥物累積釋放百分率，繪制溶出曲線。

2.3 固體分散體物相鑒別

2.3.1 差熱分析（DSC） 工作條件為升溫范圍20～600℃；升溫速率10 k/min；參比物為空鋁坩堝；氣體為氮氣；差熱量程-1.0～2.5 mW。分別對二乙酰大黃酸原料藥、PVP k30、泊洛沙姆188、物理混合物和所制備的固體分散體樣品進行分析。

2.3.2 紅外光譜分析（II） 波數范圍為4 000～400 cm-1，溴化鉀壓片。將二乙酰大黃酸、PVPk30以及Po1oxamer188所制備的固體分散體與物理混合物進行紅外光譜分析。

3 結果

3.1 體外溶出結果及溶出曲線

3.1.1 不同輔料比例下溶出結果 分別將二乙酰大黃酸、PVP k30和泊洛沙姆188按照4∶1∶1、2∶1∶1、2∶1.5∶1.5、1∶1∶1的比例制備固體分散體，測定不同比例下的藥物溶出度，并制作溶出曲線，見圖1。由圖可知，比例為2∶1∶1的固體分散體有較高的溶出速率和載藥量，達到預期的實驗設計目的，故選定其作為制備固體分散體的最佳輔料比例。

圖1 不同比例輔料制備固體分散體的溶出曲線（n＝5）

3.1.2 不同揮干溫度下溶出結果 將二乙酰大黃酸、PVP k30和泊洛沙姆188按照2∶1∶1的比例制成固體分散體，選擇30、40、50℃的水浴溫度揮干無水乙醇，制備不同溫度下的藥物溶出曲線，見圖2。由圖可知，不同溫度條件下揮干乙醇對藥物固體分散體的溶出度無明顯差異。

圖2 不同揮干溫度制備固體分散體的溶出曲線（n＝5）

3.2 固體分散體的鑒別

3.2.1 差示掃描量熱分析 DSC結果表明，二乙酰大黃酸原料藥在252.3℃處有一吸熱峰；PVP k30在88.1和425.5℃處各有一吸熱峰；泊洛沙姆188在57.9和389.7℃處各有一放熱峰；藥物與載體比為2∶1∶1的固體分散體中，二乙酰大黃酸的吸熱峰遠遠小于原料藥，物理混合物中二乙酰大黃酸的吸熱峰略有降低，但高于固體分散體，在335℃處有一較強放熱峰，說明藥物與載體形成低共熔物［10-11］，見圖3。3.2.2 紅外光譜分析 二乙酰大黃酸中含有C＝O、COOH 及CH3COO，其中CH3COO中的C＝O在1 770 cm-1處有一強吸收峰；COOH中的C＝O在1 695 cm-1處有一強吸收峰；C＝O在1 680 cm-1處有一強吸收峰。另外，在1 215 cm-1處還有CH3COO中的C-O強吸收峰；PVP k30分子中含有C＝O，在1 654 cm-1處有一強吸收峰；Po1oxamer188主要是由丙二醇和環氧丙烷形成的共聚物，在紅外2 889和1 112 cm-1處有相對較強的吸收峰，為其亞甲基和醚鍵的特征峰。對原料藥、物理混合物和固體分散體的紅外圖譜進行比較分析，發現三者在1 695、1 680 cm-1處的強吸收峰都沒有發生位移，峰位均無明顯變化，推測其與載體未發生化學變化，見圖4。

圖3 泊洛沙姆188（1）、固體分散體（2）、物理混合物（3）、原料藥（4）、PVPk30（5）的差示熱分析掃描圖

圖4 PVPk30（1）、泊洛沙姆188（2）、原料藥（3）、物理混合物（4）、固體分散體（5）的紅外光譜圖

4 討論

由圖1可知，不同比例輔料所制備的固體分散體根據輔料用量的不同，溶出度也有相應變化。當藥物、PVP k30、泊洛沙姆188的用量比例為4∶1∶1時，溶出效果較原料藥有所增加，但是并未達到最大；當三者用量分別為2∶1∶1、2∶1.5∶1.5、1∶1∶1時，溶出效果顯著，而且其體外溶出度無明顯差異。為節約成本，本實驗選擇2∶1∶1作為二乙酰大黃酸固體分散體的制備工藝。由圖2可知，不同溫度對藥物的溶出度沒有顯著影響，為提高揮干速率，故選擇50℃為揮干乙醇的溫度。

由于藥物熔點較高，高溫下穩定性較差，同時二乙酰大黃酸的溶解性也不理想，無法在水或醇中溶解，所以采用研磨法制備固體分散體。同時，以泊洛沙姆188以及PVPk30為固體分散體的載體輔料，可提高原料藥的溶出度。由于PVPk30能夠以無定形狀態存在，而泊洛沙姆188的熔點在52～57℃之間，親水性強，載藥量大，本身也是一種表面活性劑，因此均能很好地應用于固體分散體的制備中。實驗顯示，選用這兩種輔料制備二乙酰大黃酸固體分散體能夠顯著提高其溶出度。

另外，本品對光線不穩定。實驗發現，在藥物溶出度達到最大值后，其最大溶出百分率沒有在最高點維持，而會略微降低。由此表明，在生產和分析的過程中，應注意避光操作。

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*通信作者：李 莉（1973—），女，副教授，碩士生導師，研究方向為藥物質量控制。Te1：13765110871，E-mai1：1226072965@qq.com

作者簡介：郝 陽（1991—），女，碩士，研究方向為藥物分析。Te1：18285060152，E-mai1：443811043@qq.com

基金項目：貴陽市科技計劃項目（［2013204］4-4）；2014年貴州省教育廳大學生創新創業（培育）項目（201410660029）

收稿日期：2015-05-15

doi：10.3969/j.issn.1001-1528.2016.03.051

中圖分類號：I 944

文獻標志碼：B

文章編號：1001-1528（2016）03-0702-03

網絡出版日期：2015-08-28

網絡出版地址：http：//www.cnki.net/kcms/detai1/31.1368.I.20150828.1155.004.htm1