特殊染色技術(shù)在腎活檢病理中的運(yùn)用

孫　璟，武芳芳

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特殊染色技術(shù)在腎活檢病理中的運(yùn)用

孫璟，武芳芳

[關(guān)鍵詞]腎活檢；病理；特殊染色

隨著生物科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，大部分特殊染色被其他相關(guān)染色技術(shù)所替代，但仍有些染色方法在原來(lái)基礎(chǔ)上經(jīng)不斷改良和創(chuàng)新，逐漸形成其他技術(shù)難以替代的染色方法，在腎活檢病理中發(fā)揮著重要作用。該文將重點(diǎn)介紹在腎活檢病理中常用的幾種特殊染色的應(yīng)用及其診斷意義。

1　特殊染色在腎活檢中的染色原理及結(jié)果

1.1過(guò)碘酸雪夫染色（PAS染色）（1）染色原理。過(guò)碘酸是一種氧化劑，可以把多糖的葡萄糖分子的兩個(gè)相鄰的帶有羥基的-C-C-鍵打開(kāi)，而生成醛基再與染色劑結(jié)合。Schiff試劑中的堿性復(fù)紅是一種混合物，經(jīng)亞硫酸和二氧化硫的作用，醌式結(jié)構(gòu)的雙鍵被破壞消失，已成為無(wú)色復(fù)紅，再經(jīng)過(guò)氧化后的醛基與無(wú)色復(fù)紅液進(jìn)行結(jié)合呈紫紅色。（2）染色結(jié)果。基底膜、腎小球系膜基質(zhì)、膠原纖維及細(xì)胞質(zhì)均呈紅色，細(xì)胞核呈藍(lán)色。

1.2過(guò)碘酸六胺銀染色（PASM-HE染色）（1）染色原理。基底膜是由Ⅳ型膠原蛋白、蛋白多糖和層粘連蛋白組成，這些成分經(jīng)過(guò)氧化劑后，使之糖胺多糖物質(zhì)的醛基暴露后，醛基把六胺銀還原成為褐色的金屬銀，氯化金可使金屬銀轉(zhuǎn)變?yōu)楦€(wěn)定的金屬金，同時(shí)使背景更為清晰。（2）染色結(jié)果。腎小球毛細(xì)血管基底膜呈黑色，細(xì)胞核呈藍(lán)色，紅細(xì)胞呈紅色。

1.3馬松染色（Masson染色）（1）染色原理。Masson染色時(shí)膠原纖維呈綠色（被亮綠所染）或呈藍(lán)色（被苯胺藍(lán)所染），肌纖維呈紅色（被酸性品紅所染），這與陰離子染料分子的大小和組織的滲透性有關(guān)。（2）染色結(jié)果。細(xì)胞核紅色，膠原纖維綠色，免疫復(fù)合物紅色。

2　特殊染色在腎活檢病理中的主要用途及診斷意義

2.1PAS染色在腎活檢病理中主要用途顯示腎小球內(nèi)的細(xì)胞增生、浸潤(rùn)和系膜基質(zhì)，也可顯示腎小球內(nèi)某些滲出性蛋白、節(jié)段性硬化和結(jié)節(jié)狀病灶等。系膜基質(zhì)增多可見(jiàn)于各類增生性腎小球腎炎，如系膜增生性腎小球腎炎、IgA腎病、膜性增生性腎小球腎炎和糖尿病腎病等；基膜增厚主要見(jiàn)于膜性腎病、膜性增生性腎炎、糖尿病腎病等；滲出性病灶主要見(jiàn)于糖尿病腎病、FSGS、新月體性腎炎等；節(jié)段性硬化灶則多見(jiàn)于FSGS、IgA腎病和糖尿病腎病等；結(jié)節(jié)性腎小球硬化性病灶則常見(jiàn)于糖尿病腎病、膜性增生性腎小球腎炎等。

2.2PASM-HE染色在腎活檢病理中主要用途顯示腎小球系膜區(qū)范圍和基膜增厚及其某些特征性改變，有時(shí)也可用于對(duì)腎小球內(nèi)以結(jié)節(jié)狀病灶形成特征的某些腎小球病的鑒別。以腎小球系膜增生為特征，且伴有PAS陽(yáng)性物質(zhì)聚集的上述腎小球病，經(jīng)PASM染色往往也同樣能清晰地顯示。基膜新生伴“釘突形成”和梯狀改變者，多見(jiàn)于膜性腎病、腎淀粉樣變性病等；基膜呈雙軌或雙層改變者，多見(jiàn)于膜性增生性腎小球腎炎等；結(jié)節(jié)狀腎小球硬化病灶則多見(jiàn)于膜性增生性腎小球腎炎、糖尿病腎病等。

2.3Masson染色在腎活檢病理中主要用途顯示腎小球內(nèi)沉積或免疫復(fù)合物或其他血漿蛋白成分，故對(duì)于幾種常見(jiàn)的免疫復(fù)合物性腎炎的診斷有著重要的價(jià)值，如以系膜區(qū)IgA沉積為特征的IgA腎病、紫癜性腎炎，其呈斑點(diǎn)、斑塊狀猩紅色的沉積物集中分布于腎小球系膜區(qū)；以上皮下IgG或C3沉積為特征的急性彌漫性增生性腎小球腎炎、膜性腎病和狼瘡性腎炎（Ⅳ或Ⅴ型），其沉積物主要分布于上皮下區(qū)。系膜區(qū)和血管襻IgG或C3沉積為特征的膜性增生性腎小球腎炎、膜性腎病和狼瘡性腎炎（Ⅳ型）主要分布于內(nèi)皮下區(qū)且伴有明顯的系膜基質(zhì)增多及基膜增厚或雙軌樣改變。

綜上所述，每種特殊染色都有不同的原理、方法及應(yīng)用范圍，顯示組織中不同成分，在腎活檢的病理診斷中發(fā)揮著不可替代的作用，了解和掌握特殊染色的染色原理及意義，對(duì)于更好地診斷疾病有很大的幫助。因此，病理科醫(yī)師在應(yīng)用免疫熒光染色輔助診斷的同時(shí)，更應(yīng)該巧妙地綜合應(yīng)用不同的特殊染色方法，使特殊染色的優(yōu)越性充分體現(xiàn)出來(lái)。

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[2015-11-14收稿，2015-12-11修回]

[本文編輯：吳蓉]

綜述與講座

[中圖分類號(hào)]R446.8

[文獻(xiàn)標(biāo)志碼]B

DOI：10.14172/j.issn1671-4008.2016.05.030

[作者單位]250031山東濟(jì)南，解放軍456醫(yī)院腎內(nèi)科中心（孫璟，武芳芳）