西門子ADVIA 2120i全自動五分類血細胞分析儀性能驗證及評價

趙　威,田　笑,趙麗菲,李美言,邱廣斌

(中國人民解放軍第二〇二醫(yī)院檢驗科，遼寧沈陽 110003)

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·臨床研究·

西門子ADVIA 2120i全自動五分類血細胞分析儀性能驗證及評價

趙威,田笑,趙麗菲,李美言,邱廣斌△

(中國人民解放軍第二〇二醫(yī)院檢驗科，遼寧沈陽 110003)

摘要:目的對校準后的西門子ADVIA 2120i全自動五分類血細胞分析儀進行方法學性能驗證。方法對西門子ADVIA 2120i全自動五分類血細胞分析儀分別進行不精密度、正確度、攜帶污染率、臨床可報告范圍、儀器模式間比對、生物參考區(qū)間及儀器分類與人工分類比對等性能指標的驗證。結(jié)果該儀器不精密度、可比性、線性范圍、臨床可報告范圍、攜帶污染率、生物參考區(qū)間、不同進樣模式間比對、儀器分類與手工分類比對等指標均通過驗證。結(jié)論該儀器性能良好，可用于臨床標本的檢測，是一種較理想的全血細胞分析儀。

關(guān)鍵詞:全血細胞分析儀；準確度；精密度；攜帶污染率

醫(yī)學實驗室認可的專用準則國際標準化組織(ISO)15189《醫(yī)學實驗室質(zhì)量和能力的專用要求》提出申請認可的實驗室應對設(shè)備、檢測系統(tǒng)或方法的主要分析性能進行驗證，證實其能夠達到臨床檢測所要求的標準[1]。本實驗室參考國際血液學標準化委員會、美國臨床實驗室標準化協(xié)會(CLSI)的相關(guān)性能評價文件，以一般健康人群或一般住院患者的乙二胺四乙酸二鉀(EDTA-K2)抗凝血為研究對象[2]，對德國西門子公司的ADVIA 2120i全自動五分類血細胞分析儀進行性能評價實驗，現(xiàn)將結(jié)果報道如下。

1材料與方法

1.1標本來源采集EDTA-K2抗凝新鮮全血，標本采集操作按照《全國臨床檢驗操作規(guī)程》(第3版)[3]進行。

1.2儀器與試劑(1)驗證儀器及參比儀器：驗證儀器為德國西門子公司的ADVIA 2120i全自動五分類血細胞分析儀，參比儀器為本實驗室相同型號的五分類全自動血細胞分析儀。(2)試劑：德國西門子公司原裝配套試劑。精密度驗證采用美國Bio-Rad公司的質(zhì)控品。

1.3方法驗證指標包括：不精密度、可比性、線性范圍、臨床可報告范圍、攜帶污染率、生物參考區(qū)間、不同進樣模式間比對、儀器分類與手工分類比對。所有試驗均在6 h內(nèi)完成檢測，操作方法參照儀器操作說明書進行。

1.3.1不精密度[4]按照CLSI的EP15-A2文件要求，使用Bio-Rad全血高、中、低3個水平質(zhì)控品(以L、N、H表示)，按照本室《ADVIA 2120i血液分析儀標準操作程序》，混勻后每天連續(xù)進行4次測定，連續(xù)測定5 d，計算批內(nèi)不精密度和總不精密度，以變異系數(shù)(CV)表示。判定標準：白細胞(WBC)、紅細胞(RBC)、血紅蛋白(Hb)、血細胞比容(Hct)、紅細胞平均體積(MCV)、紅細胞平均血紅蛋白量(MCH)、紅細胞平均血紅蛋白濃度(MCHC)及血小板(PLT)結(jié)果應符合WS/T 406-2012精密度評價標準，CV小于或等于各指標精密度評價標準判為合格。各檢測指標精密度評價標準，見表1。

1.3.2正確度[5]本科室的參比儀器參加了原衛(wèi)生部的室間質(zhì)評活動，成績合格。因其檢測結(jié)果的準確性可以進行傳遞。驗證儀器的正確度可以通過系統(tǒng)間的比對來實現(xiàn)，用臨床標本進行偏倚評估。驗證方案：選取20份當日采集的、濃度分布狀況比較具有代表性的患者血液標本，同時在參比儀器和驗證儀器上進行檢測，同一標本在兩檢測系統(tǒng)之間的檢測時間之差不超過4 h。偏倚=︱驗證儀器值-參比儀器值︱/參比儀器值×100%。WBC≤2.0×109/L和WBC>2.0×109/L的正確度驗證判定標準分別為10.0%、7.5%；PLT≤40×109/L和PLT>40×109/L的正確度驗證判定標準分別為15.0%、12.5%；RBC的正確度驗證判定標準為3.0%；Hb 、Hct、MCV、MCH、MCHC、PLT的正確度驗證判定標準均為3.5%。評價標準：偏倚小于或等于各指標正確度驗證判定標準為符合，80%及以上的偏倚符合相應判定標準即為驗證通過。

表1　　各檢測指標精密度評價標準(%)

1.3.3線性范圍[6]驗證方法：由于血液標本的特殊性，對全血的要求，以及選取高值和低值標本的不可混合性，本試驗選取1份接近預期上限的高值全血標本，與儀器自帶的稀釋液進行混合配制，分別按100%、80%、60%、40%、20%、10%(當需要時)、5%(當需要時)的比例進行稀釋，每個稀釋度測定1次。將實測值與理論值作比較(偏離應小于10%)，計算Y=aX+b，驗證線性范圍。判定標準：a值在1±0.05范圍內(nèi)，相關(guān)系數(shù)r≥0.975或r2≥0.95為可接受。

1.3.4攜帶污染率[7]驗證方案：取高濃度血液標本，混合均勻后連續(xù)測定3次，測定值分別為H1、H2、H3；再取低濃度血液標本，連續(xù)測定3次，測定值分別為L1、L2、L3。按以下公式計算攜帶污染率：攜帶污染率=(L1-L3)/(H3-L3)×100%。評價標準：WBC≤3.0%，RBC≤2.0%、Hb≤2.0%、PLT≤4.0%即合格。

1.3.5生物參考區(qū)間驗證方案：選取20例健康人血標本，男10例，女10例，年齡23～70歲，計算各檢測項目95%分位數(shù)的結(jié)果。合格率(R)=測定結(jié)果在參考區(qū)間范圍內(nèi)的例數(shù)/總測定例數(shù)，R≥95%即合格。

1.3.6不同進樣模式間比對驗證方法：比對參數(shù)包括WBC、RBC、Hb、Hct、MCV、PLT 6個參數(shù)。比對過程：每個項目選擇至少5份濃度分布比較具有代表性的患者血液標本，在相同檢測系統(tǒng)不同進樣模式各檢測2次，計算其均值的偏倚：偏倚=︱自動進樣模式檢測均值-手動進樣模式檢測均值︱/手動進樣模式檢測均值×100%。偏倚判定標準：WBC≤5%、RBC≤2%、Hb≤2%、Hct≤3%、MCV≤3%、PLT≤7%，80%及以上的標本滿足以上判定標準，即為該項目合格。

1.3.7儀器分類與手工分類比對驗證方法：選取20份儀器分類未見明顯異常報警的患者新鮮血液標本，每份標本均分別用于參考方法和儀器法檢測，其中參考方法為人工染色顯微鏡分析，每份標本推兩張血涂片(A片和B片)，由兩位資深檢驗人員對每張血涂片分析200個細胞。其中1位使用血涂片A，另1位使用B片，每份標本的人工分類結(jié)果取平均值。判定標準：將儀器法測量結(jié)果與人工分析的結(jié)果比較，計算兩種方法的偏倚，偏倚=|儀器測定值-顯微鏡計數(shù)值|/顯微鏡計數(shù)值×100%。判定標準：中性粒細胞(Net)百分比偏倚小于或等于11.2%、淋巴細胞(Lym)百分比偏倚小于或等于11.2%、單核細胞(Mon)百分比偏倚小于或等于14.0%、嗜酸性粒細胞(EOS)百分比小于或等于18.6%，80%及以上標本在生物學變異允許范圍內(nèi)即可。

1.4質(zhì)量控制儀器按說明書要求安裝、調(diào)試后，用西門子公司提供的校準品校準該儀器。性能驗證期間每次開機預熱至少30 min，待系統(tǒng)穩(wěn)定后進行標本測試。

2結(jié)果

2.1不精密度批內(nèi)不精密度及總不精密度結(jié)果，見表2。

表2　　批內(nèi)不精密度及總不精密度結(jié)果(%)

續(xù)表2　　批內(nèi)不精密度及總不精密度結(jié)果(%)

2.2正確度驗證儀器與參比儀器在WBC、RBC、Hb、Hct、MCV、MCH、MCHC、PLT各項指標的偏倚均小于判定標準，RBC、Hb、MCHC的合格率均為100%，MCH、PLT的合格率均為95%，WBC、MCV的合格率均為90%，Hct的合格率為85%，驗證通過。

2.3線性范圍WBC≤2.0×109/L和WBC>2.0×109/L時線性方程中a值分別為0.989 7、1.005 3，r2分別為0.999 8、0.999 5；RBC、Hb、Hct的線性方程中a值分別為0.992 1、0.997 1、0.999 0，r2分別為0.999 7、0.999 9、0.997 1；PLT≤40×109/L和PLT>40×109/L時線性方程中a值分別為1.019 3、1.003 9，r2分別為0.999 3、0.998 6；均符合判定標準。線性范圍試驗結(jié)果，見表3(見《國際檢驗醫(yī)學雜志》網(wǎng)站主頁“論文附件”)。實驗室驗證及廠家標注的線性范圍，見表4。

表4　　儀器線性范圍

2.4可報告范圍根據(jù)實驗室檢測的標本并結(jié)合臨床要求，其線性范圍可以滿足臨床的需求，因此可報告范圍即為線性范圍。WBC、PLT、RBC、Hct、Hb大于或小于表4中的范圍時，可用手工法或涂片染色鏡檢驗證，以鏡檢結(jié)果報告或以大于或小于線性值報告。

2.5攜帶污染率WBC、RBC、Hb及PLT的攜帶污染率分別為0.11%、0.75%、1.00%、0.2%，均在要求范圍內(nèi)，驗證通過。見表5(見《國際檢驗醫(yī)學雜志》網(wǎng)站主頁“論文附件”)。

2.6生物參考區(qū)間除Lym百分比的R為95%，其余檢測項目的R均為100%，各項目R均符合要求，生物參考區(qū)間驗證通過。生物參考區(qū)間驗證結(jié)果，見表6(見《國際檢驗醫(yī)學雜志》網(wǎng)站主頁“論文附件”)。

2.7不同進樣模式間比對WBC、RBC、Hb、Hct、MCV、PLT的合格率均為100%。該儀器自動模式與手動模式測量結(jié)果偏倚小于允許誤差，驗證通過。

2.8儀器分類與手工分類比對Net百分比、Lym百分比、Mon百分比、EOS百分比的合格率分別為95%、80%、90%、90%。儀器法測量結(jié)果與人工分析的結(jié)果比較，兩種方法的偏倚小于判斷標準，驗證通過。

3討論

本科室通過對西門子ADVIA 2120i全自動五分類血細胞分析儀的不精密度、正確度、攜帶污染率、臨床可報告范圍、儀器模式間比對、生物參考區(qū)間及儀器分類與人工分類比對等性能指標進行驗證，得出以下結(jié)論：(1)該儀器精密度高、重復性好，本次精密度驗證試驗血常規(guī)各項指標的批內(nèi)不精密度和總不精密度均符合評價標準，精密度良好。(2)本檢測系統(tǒng)室間質(zhì)評成績合格。(3)攜帶污染率小，各項攜帶污染率均符合儀器的性能要求。(4)各檢測指標的線性試驗結(jié)果表明，檢測系統(tǒng)具有良好的線性，a值均在1.00±0.05范圍內(nèi)，r2≥0.95，符合要求，各指標線性范圍有效。(5)儀器自動模式與手動模式之間比對結(jié)果符合要求，驗證通過。(6)檢測系統(tǒng)結(jié)果均至少有95%數(shù)據(jù)分布在現(xiàn)行生物參考區(qū)間內(nèi)，驗證通過。(7)儀器分類與人工分類比對結(jié)果符合要求，驗證通過。

綜上所述，本室西門子ADVIA 2120i全自動五分類血細胞分析儀通過了對不精密度、可比性、線性范圍、臨床可報告范圍、攜帶污染率、生物參考區(qū)間、不同進樣模式間比對、儀器分類與手工分類比對等性能指標的驗證，性能良好，可用于臨床標本的檢測。

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(收稿日期：2015-10-26)

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.05.047

文獻標識碼：A

文章編號：1673-4130(2016)05-0681-03

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