5-羥色胺對(duì)腸炎小鼠結(jié)腸組織中GRP78表達(dá)的影響*

陳夢(mèng)露，董仕楨，常永超，陳　攀，馮丹丹，高　強(qiáng)#

1)河南科技大學(xué)第一附屬醫(yī)院(河南科技大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)院)消化內(nèi)科 洛陽(yáng) 471003　2)河南科技大學(xué)第一附屬醫(yī)院(河南科技大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)院)檢驗(yàn)科 洛陽(yáng) 471003

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5-羥色胺對(duì)腸炎小鼠結(jié)腸組織中GRP78表達(dá)的影響*

陳夢(mèng)露1,2)，董仕楨1,2)，常永超2)，陳攀1)，馮丹丹1)，高強(qiáng)1)#

1)河南科技大學(xué)第一附屬醫(yī)院(河南科技大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)院)消化內(nèi)科 洛陽(yáng) 4710032)河南科技大學(xué)第一附屬醫(yī)院(河南科技大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)院)檢驗(yàn)科 洛陽(yáng) 471003

關(guān)鍵詞5-羥色胺；炎癥性腸??；葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78；小鼠

摘要目的：觀察5-羥色胺(5-HT)對(duì)腸炎小鼠結(jié)腸組織葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78(GRP78)表達(dá)的影響。方法：將7～8周齡的C57BL/6小鼠隨機(jī)分為6組(n=8)：正常對(duì)照組，低、高劑量5-HT組(分別給予1.0、2.0 mg/kg的5-HT灌腸,每3 d 1次)，低、高劑量DSS組(分別飲用10或25 g/L DSS溶液)，DSS+5-HT組(給予10 g/L DSS+1.0 mg/kg 5-HT)，于第6天結(jié)束時(shí)處死小鼠。通過(guò)疾病活動(dòng)指數(shù)評(píng)分、結(jié)腸長(zhǎng)度測(cè)定和HE染色等方法評(píng)估腸道炎癥程度，采用實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù)檢測(cè)小鼠結(jié)腸組織中IL-6、TNF-α和 GRP78 mRNA的表達(dá)水平，采用免疫組化法檢測(cè)小鼠結(jié)腸組織中GRP78蛋白的表達(dá)。結(jié)果：正常對(duì)照組，低、高劑量5-HT組小鼠無(wú)腸炎，低劑量DSS組有輕微腸炎，高劑量DSS組和DSS+5-HT組有嚴(yán)重腸炎。IL-6和TNF-α mRNA的表達(dá)水平隨炎癥程度而增加。GRP78 mRNA和蛋白在正常對(duì)照組、低劑量5-HT組和低劑量DSS組中的表達(dá)水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，在高劑量5-HT組、DSS+5-HT組和高劑量DSS組，尤其是高劑量DSS組表達(dá)增高(P<0.05)。結(jié)論：5-HT可能通過(guò)上調(diào)GRP78蛋白的表達(dá)激活內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激反應(yīng)，參與腸道炎癥反應(yīng)。

Effects of 5-hydroxytryptamine on expression of GRP78 in colon tissue of mice with colitis

CHENMenglu1,2),DONGShizhen1,2),CHANGYongchao2),CHENPan1),FENGDandan1),GAOQiang1)

1)DepartmentofGastroenterologyandHepatology,theFirstAffiliatedHospitalandCollegeofClinicalMedicineofHenanUniversityofScienceandTechnology,Luoyang4710032)DepartmentofClinicalLaboratory,theFirstAffiliatedHospitalandCollegeofClinicalMedicineofHenanUniversityofScienceandTechnology,Luoyang471003

Key words5-hydroxytryptamine;inflammatory bowel disease;glucose regulated protein 78;mouse

AbstractAim: To investigate the impact of 5-hydroxytryptamine(5-HT) on the expression of endoplasmic reticulum stress chaperone glucose regulated protein 78(GRP78) in mouse inflammatory colon induced by dextran sulfate sodium (DSS). Methods: Seven to eight-week-old C57BL/6 mice were randomly allocated into 6 groups(n=8). Mice in normal control group drank water freely. Mice in low-dose 5-HT and high-dose 5-HT groups received 1.0 mg/kg and 2.0 mg/kg of 5-HT by enema respectively. Mice in low-dose DSS and high-dose DSS groups received 10 and 25 g/L DSS solution, respectively. Mice in DSS+5-HT group were concurrently treated with 10 g/L DSS solution and 1.0 mg/kg of 5-HT. At the end of the 6th day, they were scarified to gather specimens. The severity of colitis was evaluated by disease activity index(DAI), colon length and pathological inflammatory scores of colon. Inflammatory cytokines such as IL-6 and TNF-α mRNA expressions in colon tissue were measured by quantitative real-time PCR. The protein and mRNA expressions of GRP78 in colon tissue of mice were evaluated by immunohistochemistry and RT-PCR,respectively. Results: There was no colitis in mice of normal control, low-dose 5-HT and high-dose 5-HT groups, while mild colitis was found in mice of low-dose DSS group. However, mice co-treated with DSS and 5-HT had severe colitis, which was comparable to mice treated with high-dose DSS. In addition, the expressions of IL-6 and TNF-α mRNA increased with the deterioration of inflammatory degree. The mRNA and protein expressions of GRP78 in normal control, low-dose 5-HT and low-dose DSS groups was similar, while in high-dose 5-HT,DSS+5-HT and high-dose DSS groups, especially the high-dose DSS group were upregulated(P<0.05).Conclusion: 5-HT may activate endoplasmic reticulum stress response by increasing the expression of GRP78 protein, and participate in intestinal inflammation.

炎癥性腸病(inflammatory bowel disease，IBD)是一種慢性非特異性腸道炎癥性疾病，包括克羅恩病(Crohn's disease,CD)和潰瘍性結(jié)腸炎(ulcerative colitis,UC)兩種類型。IBD的確切病因尚未明確，目前普遍認(rèn)為是遺傳、免疫、腸道菌群和環(huán)境等多種因素相互作用的結(jié)果[1]。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激是指在細(xì)胞內(nèi)能量水平、氧化狀態(tài)或鈣離子濃度異常等情況下內(nèi)質(zhì)網(wǎng)功能發(fā)生改變，它在IBD發(fā)生和發(fā)展中的作用越來(lái)越受到重視[2]。葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78(glucose regulated protein 78，GRP78)是內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激誘導(dǎo)表達(dá)的關(guān)鍵蛋白，在蛋白質(zhì)折疊、調(diào)節(jié)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激跨膜信號(hào)蛋白活性等方面發(fā)揮著重要作用[3]。炎癥發(fā)生時(shí)，細(xì)胞促炎因子及趨化因子如IL-1β、IL-8、IL-6、TNF-α及IFN-γ增加，促進(jìn)炎癥的發(fā)生發(fā)展。5-羥色胺(5-hydroxytryptamine，5-HT)在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中作為一種神經(jīng)遞質(zhì)而起作用，然而體內(nèi)大多數(shù)(約90%)5-HT存在于腸道，5-HT通過(guò)激活一系列受體調(diào)控許多胃腸道功能，包括分泌和蠕動(dòng)[4]。在IBD中，5-HT信號(hào)系統(tǒng)異常導(dǎo)致胃腸道動(dòng)力及分泌功能異常和內(nèi)臟高敏性[5]。在CD患者和IBD動(dòng)物模型中均發(fā)現(xiàn)有炎癥的腸黏膜組織中5-HT水平上升[6]。該研究中作者采用葡聚糖硫酸鈉(dextran sulfate sodium，DSS)誘導(dǎo)建立小鼠腸炎模型，觀察5-HT對(duì)腸炎小鼠結(jié)腸組織GRP78 mRNA和蛋白的表達(dá)以及炎癥因子mRNA水平的影響，探討5-HT在DSS誘導(dǎo)小鼠腸炎過(guò)程中所發(fā)揮的作用。

1材料與方法

1.1材料實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：健康清潔級(jí)C57BL/6小鼠(購(gòu)于北京維通利華公司)，7～8周齡，雄性，體重20～25 g，飼養(yǎng)于河南科技大學(xué)第一附屬醫(yī)院新區(qū)醫(yī)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，用混合配方顆粒飼料(北京華阜康生物科技股份有限公司)飼養(yǎng)。DSS(相對(duì)分子質(zhì)量為 36 000～50 000，美國(guó)MP Biomedicals 公司)，5-HT(德國(guó)Sigma公司)，戊巴比妥鈉(德國(guó)Merck公司)?？俁NA提取試劑由Invitrogen公司生產(chǎn)，反轉(zhuǎn)錄試劑盒和實(shí)時(shí)熒光定量PCR試劑盒購(gòu)于TaKaRa公司，免疫組化檢測(cè)用GRP78一抗購(gòu)于英國(guó)Abcam公司，SABC免疫組化檢測(cè)試劑盒購(gòu)于武漢博士德生物工程有限公司，濃縮型DAB顯色試劑盒購(gòu)于北京索萊寶公司。

1.2實(shí)驗(yàn)分組和取材小鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)1周，室內(nèi)溫度保持在20～22 ℃，濕度約50%，明暗交替周期為12 h，隨機(jī)分為6組，每組8只。建模前所有小鼠禁食24 h，正常對(duì)照組自由飲水，低、高劑量5-HT組分別給予1.0和2.0 mg/kg的5-HT灌腸，低、高劑量DSS組分別飲用10或25 g/L DSS溶液，DSS+5-HT組給予10 g/L DSS溶液加1.0 mg/kg 5-HT；5-HT通過(guò)灌腸的方式給藥，每3 d 1次，其他組灌注生理鹽水，于第6天各組均飲用蒸餾水[7]。于造模第6天結(jié)束時(shí)脫頸處死所有小鼠，打開(kāi)腹腔，取全結(jié)腸，翻轉(zhuǎn)結(jié)腸后，PBS漂洗，自遠(yuǎn)端結(jié)腸始取約0.5 cm，體積分?jǐn)?shù)4.0%的甲醛溶液固定，石蠟包埋，4.0 μm厚切片，以備HE和免疫組化染色使用。再取1.0 cm，-80 ℃保存，以備mRNA的測(cè)定。

1.3觀察指標(biāo)①每日定時(shí)測(cè)量小鼠體重、觀察小鼠攝食/飲水、活動(dòng)度、大便性狀、便血等狀態(tài)，參照J(rèn)ackson等[8]的方法進(jìn)行疾病活動(dòng)指數(shù)(disease activity index，DAI)評(píng)分。取材時(shí)測(cè)量全結(jié)腸長(zhǎng)度，肉眼觀察結(jié)腸內(nèi)血性內(nèi)容物情況。參照張靜等[9]的方法進(jìn)行血便評(píng)分。②采用HE染色法對(duì)結(jié)腸組織進(jìn)行病理分析。在400倍鏡下進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)，每張切片選擇10個(gè)視野，每個(gè)視野觀察100個(gè)細(xì)胞。根據(jù)Esworthy等[10]的評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評(píng)分，急性炎癥的臨界值定為6分。

1.4各組小鼠結(jié)腸組織IL-6、TNF-α和GRP78 mRNA表達(dá)水平的檢測(cè)Trizol法提取總RNA，測(cè)定RNA純度和濃度后取2 μg，反轉(zhuǎn)錄合成cDNA，-20 ℃保存?zhèn)溆谩Ｒ镉缮ど锕こ?上海)有限公司合成(表1)。冰上配制PCR反應(yīng)液，反應(yīng)體系25 μL：cDNA 2 μL，SYBR Premix EX TaqⅡ(2×)12.5 μL，DEPC水8.5 μL，上、下游引物各1.0 μL(濃度10 μmol/L)。于BIO-RAD Real-time PCR儀中進(jìn)行PCR反應(yīng)，反應(yīng)條件為：95 ℃預(yù)變性30 s，95 ℃ 5 s；分別58 ℃、60 ℃和56 ℃退火30 s；72 ℃延伸30 s，共40個(gè)循環(huán)。每個(gè)樣本3個(gè)復(fù)孔，取均值，以β-actin為內(nèi)參，采用2-ΔΔCt法計(jì)算mRNA相對(duì)表達(dá)量。

表1　引物序列

1.6統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS 19.0處理數(shù)據(jù)，各組小鼠第6天DAI和血便評(píng)分的比較采用秩和檢驗(yàn)，其他指標(biāo)的比較采用單因素方差分析，兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。

2結(jié)果

2.1各組小鼠一般情況觀察、DAI評(píng)分及血便評(píng)分比較正常對(duì)照組、低劑量5-HT組和高劑量5-HT組小鼠每天攝食和飲水正常，活動(dòng)如常，反應(yīng)機(jī)警，皮毛有光澤，生長(zhǎng)發(fā)育良好，體重增加；低劑量DSS組于造模第5天出現(xiàn)懶動(dòng)，攝食/飲水減少，體重下降，出現(xiàn)稀便、肛周潮濕現(xiàn)象，第6天有3只出現(xiàn)血水樣便，但體重下降均未超過(guò)10%；DSS+5-HT組和高劑量DSS組都于造模第4天開(kāi)始相繼出現(xiàn)懶動(dòng)、精神萎靡，體毛凌亂，攝食/飲水減少，并出現(xiàn)稀便、肉眼血便、肛周潮濕現(xiàn)象，體重下降。DSS+5-HT組第6天有7只出現(xiàn)嚴(yán)重肉眼血便，6只體重下降超過(guò)10%，但無(wú)小鼠死亡。高劑量DSS組第6天有7只出現(xiàn)嚴(yán)重肉眼血便；有1只小鼠死亡，剩余7只體重下降均超過(guò)10%。各組小鼠第6天DAI和血便評(píng)分的比較見(jiàn)表2。

2.2各組小鼠病理觀察結(jié)果各組小鼠結(jié)腸長(zhǎng)度和炎癥病理評(píng)分比較見(jiàn)表2。造模結(jié)束后，與正常對(duì)照組相比，低劑量DSS組、DSS+5-HT組和高劑量DSS組結(jié)腸長(zhǎng)度均有不同程度的縮短，其中DSS+5-HT組和高劑量DSS組縮短最嚴(yán)重。正常對(duì)照組、低劑量5-HT組和高劑量5-HT組小鼠結(jié)腸黏膜結(jié)構(gòu)完整，無(wú)炎性細(xì)胞浸潤(rùn)；低劑量DSS組黏膜腺體基本完整，局部有少量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)或隱窩破壞，呈輕度炎癥改變；DSS+5-HT組和高劑量DSS組均可見(jiàn)黏膜上皮細(xì)胞廣泛缺失，腺體大多數(shù)不完整，細(xì)胞結(jié)構(gòu)排列紊亂，杯狀細(xì)胞消失，中性粒細(xì)胞等炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)廣泛，呈嚴(yán)重炎癥改變(圖1)。

表2　各組小鼠第6天DAI、

*:與正常對(duì)照組相比,P<0.05;#:與低劑量DSS組相比,P<0.05；△：與低劑量5-HT組相比，P<0.05。

2.3各組小鼠結(jié)腸組織中IL-6、TNF-α和GRP78 mRNA的表達(dá)見(jiàn)表3。

2.4各組小鼠結(jié)腸組織中GRP78蛋白的表達(dá)GRP78蛋白主要表達(dá)于結(jié)腸上皮細(xì)胞胞質(zhì)，少量分布于胞膜。GRP78蛋白在正常對(duì)照組、低劑量5-HT組和低劑量 DSS組的表達(dá)均較少，高劑量5-HT組和DSS+5-HT組表達(dá)上調(diào)，高劑量DSS組最高。見(jiàn)圖2、表3。

表3　各組小鼠結(jié)腸組織中

*:與正常對(duì)照組相比,P<0.05;#:與低劑量DSS組相比,P<0.05；△：與低劑量5-HT組相比，P<0.05。

A：正常對(duì)照組；B：低劑量5-HT組；C：高劑量5-HT組；D：低劑量DSS組；E：DSS+5-HT組；F：高劑量DSS組。圖1　各組小鼠結(jié)腸組織學(xué)表現(xiàn)(HE，×200)

A：正常對(duì)照組；B：低劑量5-HT組；C：高劑量5-HT組；D：低劑量DSS組；E：DSS+5-HT組；F：高劑量DSS組。圖2　各組小鼠GRP78蛋白的免疫組化染色(SABC,×200)

3討論

IBD在西方國(guó)家屬于常見(jiàn)病，在我國(guó)尚無(wú)普通人群的流行病學(xué)資料。研究[11]表明我國(guó)IBD的總報(bào)道病例數(shù)量在近十余年內(nèi)增加了2.5倍，尤其是CD增加了15.7倍。臨床上，IBD患者除了存在一般消化道癥狀外，還可出現(xiàn)腸道梗阻、穿孔等并發(fā)癥以及腸道外癥狀，病程反復(fù)發(fā)作，遷延不愈。該實(shí)驗(yàn)成功建立了小鼠腸炎模型，其腸炎與人類UC有類似的癥狀，如體重下降、腹瀉、血便等，病理表現(xiàn)為黏膜結(jié)構(gòu)缺失，腺體變形萎縮，黏膜及黏膜下層以炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)為主，IL-6和TNF-α炎癥因子的表達(dá)升高。

Khan等[12]發(fā)現(xiàn)在CD和UC患者體內(nèi)EC細(xì)胞數(shù)量和5-HT水平會(huì)產(chǎn)生變化。Shajib等[6]發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)性結(jié)腸炎模型中5-HT水平下降時(shí)，促炎因子水平降低，恢復(fù) 5-HT水平會(huì)增加DSS誘導(dǎo)的結(jié)腸炎的嚴(yán)重性。Regmi等[13]發(fā)現(xiàn)5-HT通過(guò)NADPH氧化酶Nox2調(diào)節(jié)腸黏膜的先天免疫反應(yīng)。該研究發(fā)現(xiàn)單獨(dú)使用低或高劑量的5-HT時(shí)小鼠無(wú)腸炎表現(xiàn)，單獨(dú)使用低劑量DSS可誘導(dǎo)小鼠輕微腸炎改變，但低劑量DSS與低劑量5-HT合用則可引起與高劑量DSS相似的重度急性炎癥改變，提示5-HT單獨(dú)應(yīng)用并不誘導(dǎo)小鼠明顯的腸炎變化，但與DSS聯(lián)合使用則有加重腸炎的作用。急性炎癥時(shí)，5-HT促進(jìn)炎癥細(xì)胞的聚集，并促使巨噬細(xì)胞以激活NF-κB依賴的方式產(chǎn)生細(xì)胞因子，如IL-6[14]。該實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)高劑量5-HT組IL-6 mRNA水平明顯升高，提示5-HT參與炎癥的形成。樹(shù)突狀細(xì)胞(dendritic cell，DC)是體內(nèi)激活初始T細(xì)胞的專職抗原呈遞細(xì)胞。EC細(xì)胞定位于DC附近，并且研究[15]發(fā)現(xiàn)5-HT在免疫調(diào)控中起著重要作用，反過(guò)來(lái)，免疫調(diào)節(jié)也改變EC細(xì)胞/5-HT信號(hào)。因此，5-HT信號(hào)和免疫反應(yīng)的相互作用在引起IBD的發(fā)病機(jī)制中可能起著重要作用。

GRP78是內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激中重要的分子伴侶，在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中參與阻止內(nèi)質(zhì)網(wǎng)新生肽聚集、調(diào)節(jié)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣穩(wěn)態(tài)、抗內(nèi)質(zhì)網(wǎng)相關(guān)性細(xì)胞凋亡，以及啟動(dòng)未折疊蛋白反應(yīng)等細(xì)胞生命過(guò)程[16]。生理?xiàng)l件下內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激對(duì)DC分化發(fā)育及存活具有至關(guān)重要的意義[17]。研究[18]發(fā)現(xiàn)衣霉素刺激可誘導(dǎo)DC中的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激標(biāo)志性分子GRP78蛋白表達(dá)水平明顯升高。該研究結(jié)果顯示GRP78蛋白和mRNA表達(dá)一致，正常結(jié)腸組織中GRP78表達(dá)較少，然而，隨炎癥程度的加重而表達(dá)增多，可能與炎癥時(shí)誘導(dǎo)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激反應(yīng)，激活GRP78有關(guān)。GRP78在高濃度5-HT組中表達(dá)上調(diào)，提示5-HT刺激可能通過(guò)腸上皮細(xì)胞以及炎癥細(xì)胞的5-HT受體，引起GRP78蛋白表達(dá)上調(diào)，激活內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激反應(yīng)，進(jìn)一步加重腸道炎癥反應(yīng)。

總之，該研究結(jié)果提示5-HT參與結(jié)腸組織炎癥的發(fā)生發(fā)展；5-HT上調(diào)GRP78表達(dá)而影響腸道黏膜內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激。有關(guān)5-HT和GRP78之間具體的調(diào)控通路和作用機(jī)制還有待于進(jìn)一步研究，以期為IBD的治療找到新的靶點(diǎn)。

致謝：感謝姜雅琳、李宏謙、楊茉莉和李小珍在實(shí)驗(yàn)中給予的大力幫助。

參考文獻(xiàn)

[1]智佳，智發(fā)朝，陳正彥.自噬體基因ATG16L1多態(tài)性與炎癥性腸病的相關(guān)性研究[J].南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),2008,28(4):649

[2]NIEDERREITER L,KASER A.Endoplasmic reticulum stress and inflammatory bowel disease[J].Acta Gastroenterol Belg,2011,74(2):330

[3]曹珊,周慧茹,朱艷琴,等.苦參素對(duì)食管癌Eca-109細(xì)胞BIP和CHOP mRNA表達(dá)的影響[J].鄭州大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版),2014,49(1):1

[4]趙菊輝,董蕾,郝筱倩.多種胃腸激素對(duì)腸易激綜合征患者小腸運(yùn)動(dòng)功能的研究[J].南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),2007,27(10):1492

[5]ISGAR B,HARMAN M,KAYE MD,et al.Symptoms of irritable bowel syndrome in ulcerative colitis in remission[J].Gut,1983,24(3):190

[6]SHAJIB MS,KHAN WI.The role of serotonin and its receptors in activation of immune responses and inflammation[J].Acta Physiol(Oxf),2015,213(3):561

[7]Chassaing B, Aitken JD, Malleshappa M, et al. Dextran sulfate sodium(DSS)-induced colitis in mice[J]. Curr Protoc Immunol,2014,104:Unit15.25

[8]JACKSON LN,ZHOU Y,QIU S,et al.Alternative medicine products as a novel treatment strategy for inflammatory bowel disease[J].Am J Chin Med,2008,36(5):953

[9]張靜,韓英,紀(jì)欣,等.GSH在DSS誘導(dǎo)的小鼠實(shí)驗(yàn)性腸炎中的作用[J].世界華人消化雜志,2005,13(12):1400

[10]ESWORTHY RS,KIM BW,LARSON GP,et al.Colitis locus on chromosome 2 impacting the severity of early-onset disease in mice deficient in GPX1 and GPX2[J].Inflamm Bowel Dis,2011,17(6):1373

[11]OUYANG Q, XUE LY. Inflammatory bowel disease in the 21(st) century in China: turning challenges into opportunities[J].J Dig Dis, 2012,13(4):195

[12]KHAN WI,GHIA JE.Gut hormones: emerging role in immune activation and inflammation[J].Clin Exp Immunol,2010,161(1):19

[13]REGMI SC,PARK SY,KU SK,et al.Serotonin regulates innate immune responses of colon epithelial cells through Nox2-derived reactive oxygen species[J].Free Radic Biol Med,2014,69:377

[14]MANOCHA M,KHAN WI.Serotonin and GI disorders:an update on clinical and experimental studies[J].Clin Transl Gastroenterol,2012,3:e13

[15]SHAJIB MS,WANG H,KIM JJ,et al.Interleukin 13 and serotonin: linking the immune and endocrine systems in murine models of intestinal inflammation[J].PLoS One,2013,8(8):e72774

[16]周臣敏, 董浦江, 付小利. GRP78蛋白在結(jié)腸癌組織中的表達(dá)與意義[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2013,34(10):1234

[17]IWAKOSHI NN,PYPAERT M,GLIMCHER LH.The transcription factor XBP-1 is essential for the development and survival of dendritic cells[J].J Exp Med,2007,204(10):2267

[18]祝筱梅,姚詠明,董寧,等.衣霉素誘導(dǎo)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激對(duì)樹(shù)突狀細(xì)胞成熟分化的影響[J].感染、炎癥、修復(fù),2011,12(3):139

中圖分類號(hào)R574.6

#通信作者，男，1961年8 月生，博士，主任醫(yī)師，研究方向：消化道炎癥和腫瘤，E-mail：gaoq@mail.haust.edu.cn

doi：10.13705/j.issn.1671-6825.2016.02.008

*國(guó)家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目81370487