淺談當(dāng)歸有效成分的分離方法及含量測(cè)定

許開玉

摘 要：相關(guān)學(xué)者和研究人員通過實(shí)驗(yàn)研究對(duì)當(dāng)歸內(nèi)部的有效成分進(jìn)行分離，對(duì)其中的微量元素的含量進(jìn)行有效的測(cè)定，明確其中含有Ca、Mn、Zn等20多種微量元素，在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)的過程中，由于當(dāng)歸的產(chǎn)地不同，當(dāng)歸的實(shí)際化學(xué)特性也存在一定差異，本文采用高效液相色譜法、高效毛細(xì)管電泳以及院子吸收光譜等對(duì)當(dāng)歸進(jìn)行含量測(cè)定，采用硅膠G高效硅膠薄層板、空心熔融石英毛細(xì)管等方法對(duì)當(dāng)歸進(jìn)行有效成分的分離，以促進(jìn)當(dāng)歸的實(shí)際藥用價(jià)值得到有效的發(fā)揮。

關(guān)鍵詞：中藥當(dāng)歸；含量測(cè)定；綜述

當(dāng)歸，又名干歸、金當(dāng)歸，多年生草本，花期為六個(gè)月到七個(gè)月內(nèi)，果期為七個(gè)月到九個(gè)月。當(dāng)歸的根部可以用作藥材，是當(dāng)前我國(guó)中藥中較為常用的入藥品種，具有良好的調(diào)經(jīng)止血功能，有助于潤(rùn)燥滑腸，具有良好的防衰老和免疫抗癌的功效。現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，當(dāng)歸中含有明顯的阿魏酸成分，該成分具有良好的抗氧化和自由基作用，能夠有效的對(duì)血小板聚集進(jìn)行抑制，從而有效的避免血栓的形成。當(dāng)歸在臨床應(yīng)用中，能夠有效的用于記性腦血栓和動(dòng)脈硬化，在進(jìn)入人體內(nèi)部后，能夠促進(jìn)血紅蛋白的生成，促進(jìn)紅細(xì)胞的擴(kuò)冠，并具有良好的抗輻射性能和抗腫瘤。

1 當(dāng)歸有效成分的分離

1.1 當(dāng)歸多糖

是中藥當(dāng)歸中有效的水溶性成分，在提取過程中首先應(yīng)將干擾成分去除后提取有效成分，不同濃度醇提法多適用于多糖類干擾成分的提取。將干擾雜質(zhì)去除后采用水提取或者水提取醇沉工藝。主要操作步驟為采用正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)得到當(dāng)歸多糖的最佳工藝為浸提溫度為85℃、浸提時(shí)間為3.0h、浸提次數(shù)為3次，藥材與水比例為1∶10，當(dāng)歸提取液濃縮后，加入乙醇使醇沉體積分?jǐn)?shù)達(dá)到80%，靜置12h，醇沉2次，所得當(dāng)歸多糖的質(zhì)量分?jǐn)?shù)達(dá)到50%以上。

1.2 揮發(fā)油成分

采用超臨界CO2萃取工藝，以阿魏酸的含量以及揮發(fā)油的取得率作為考察指標(biāo)，采用正交試驗(yàn)優(yōu)選超臨界CO2萃取當(dāng)歸揮發(fā)油和阿魏酸的工藝條件，最佳工藝條件為當(dāng)歸粉碎程度為20～60目，75%的乙醇為夾帶劑，萃取壓力為30Mpa，萃取溫度為60℃。

1.3 藁本內(nèi)酯

采用超臨界CO2直接萃取中間不夾帶任何試劑得到的藁本內(nèi)酯的含量最高。

1.4 阿魏酸

本研究中主要采用超臨界CO2萃取工藝，采用正交試驗(yàn)采用甲醇作為夾帶劑，以收膏率和提取物中阿魏酸的含量作為實(shí)驗(yàn)考察指標(biāo)，優(yōu)選超臨界CO2萃取當(dāng)歸中阿魏酸最佳工藝條件為中藥當(dāng)歸藥材粒度為0.3～0.8mm、夾帶劑乙醇的濃度為80%，萃取壓力為35MPa、萃取溫度為60℃～50℃～45℃。

1.5 其他成分

當(dāng)歸總黃酮具有抗氧化的活性，具有較高的開發(fā)利用價(jià)值，目前較為廣泛的提取純化工藝主要采用正交試驗(yàn)方法，通過NaNO2-Al（NO3）3-NaOH法測(cè)定當(dāng)歸總黃酮的含量。總黃酮分離的最佳工藝為提取溫度為80℃，乙醇濃度為75%，提取時(shí)間為4.0h，中藥藥材與溶液的比例為1∶25。

2 當(dāng)歸內(nèi)部微量元素的含量測(cè)定

2.1 阿魏酸含量的測(cè)定

阿魏酸是當(dāng)歸中的主要成分之一，屬于丙烯酸衍生物，在受到光的作用后極易出現(xiàn)異物化，在此基礎(chǔ)上發(fā)生降解，從而形成有機(jī)酚。除此之外，當(dāng)歸中含有其他的有效成分，比如棕櫚酸、維生素以及揮發(fā)油等多種物質(zhì)，促進(jìn)了當(dāng)歸在中藥應(yīng)用中的藥性發(fā)揮。在對(duì)當(dāng)歸進(jìn)行有效成分的測(cè)定過程中，一般多以阿魏酸作為指標(biāo)。并且我們明顯發(fā)現(xiàn)應(yīng)用高效液相色譜法進(jìn)行含量測(cè)定的實(shí)際應(yīng)用情況較好。對(duì)當(dāng)歸有效成分的測(cè)定及分析結(jié)果見表1和表2。

2.2 其他微量元素的含量測(cè)定

相關(guān)研究人員對(duì)當(dāng)歸藥物進(jìn)行分析和研究顯示，當(dāng)歸中含有20多種微量元素，其中Fe、Ca、Z以及Na含量明顯高于其他微量元素。

3 小結(jié)

3.1 就實(shí)際情況來(lái)看，因當(dāng)歸的產(chǎn)地不同，品種之間存在差異，則其內(nèi)部阿魏酸的含量也存在差異，就全國(guó)范圍內(nèi)的當(dāng)歸品種來(lái)看，四川、湖北以及陜西等地的當(dāng)歸阿魏酸含量明顯高于其他地區(qū)，而內(nèi)蒙古歐當(dāng)歸的含量頗高。立足于當(dāng)歸的實(shí)際含量范圍，我們可以發(fā)現(xiàn)當(dāng)歸中阿魏酸的含量受到部位的不同而產(chǎn)生明顯的差異，尤其是當(dāng)歸尾部的含量高于當(dāng)歸身部的含量，而當(dāng)歸頭部的含量最低。

3.2 由于對(duì)當(dāng)歸中有效成分的提取方式上存在差異，當(dāng)歸中阿魏酸的含量存在明顯的差異。從整體情況來(lái)看，以酸性甲醇作為提取溶劑具有良好的提取效果，相比甲醇作為提取溶劑來(lái)說(shuō)，實(shí)際提取效果要高出很多。就提取方法來(lái)看，差聲波處理之后再進(jìn)行萃取，能夠受到明顯的提取效果，促進(jìn)當(dāng)歸中有效成分的分離，并對(duì)當(dāng)歸內(nèi)部微量元素的含量進(jìn)行了合理的確定。從實(shí)際提取情況來(lái)看，阿魏酸具有不穩(wěn)定性，因而在進(jìn)行提取的過程中應(yīng)當(dāng)對(duì)提取時(shí)間進(jìn)行合理的掌握，避免水煎或者醇提的時(shí)間過長(zhǎng)而影響當(dāng)歸的含量測(cè)定的準(zhǔn)確性和有效性。

3.3 在對(duì)當(dāng)歸進(jìn)行有效成分的分離及含量測(cè)定的過程中，應(yīng)當(dāng)采取適宜的炮制方法，從而對(duì)多糖的含量差異進(jìn)行合理的明確，掌握良好的炮制方式，并對(duì)當(dāng)歸內(nèi)部揮發(fā)油的含量進(jìn)行合理的掌握，從而確保當(dāng)歸中有效成分得到科學(xué)的分離。

3.4 在對(duì)當(dāng)歸有效成分進(jìn)行分離及微量元素的含量測(cè)定的過程中，為保證分析結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性，應(yīng)當(dāng)采用標(biāo)準(zhǔn)比例的乙醇對(duì)當(dāng)歸藥材進(jìn)行合理的提取，并在樣品中加入適量的冰乙酸試劑，從而提高當(dāng)歸中阿魏酸的實(shí)際穩(wěn)定性，進(jìn)而有效的保證當(dāng)歸中微量元素含量測(cè)定的準(zhǔn)確性。

3.5 當(dāng)歸中成分含量較高的還有當(dāng)歸多糖類成分，多糖類成分具有免疫調(diào)節(jié)以及抗放射性損傷的效果，已經(jīng)應(yīng)用于臨床。臨床上不以粗多糖的形式應(yīng)用，因其質(zhì)量較難控制，粗多糖臨床藥效的重復(fù)性差，不符合國(guó)際規(guī)范。因此，如何有效進(jìn)行分離、提取以及高效的快速檢測(cè)當(dāng)歸多糖成為當(dāng)歸藥材質(zhì)量控制的首要問題。研究中采用80%乙醇超聲提取，將單糖、低聚糖、苷類以及生物堿等成分去除后，用超聲水提取多糖成分。超聲提取大大縮短時(shí)間，簡(jiǎn)便快捷，而且分離效果好、靈敏準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好，含量測(cè)定顯色較為穩(wěn)定。■

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