目的:了解昆明市兒童醫院肺炎鏈球菌臨床分布及藥敏情況,為結合臨床用藥提供依據。方法:對2013年7月—10月進行微生物病原學培養分離的肺炎鏈球菌藥敏結果進行統計分析。結果 該院分離的肺炎鏈球菌主要來自兒童(100%),標本主要來源是痰液(72.72%),其次是血液(22.72%),其他(4.56%)。肺炎鏈球菌的耐藥率:青霉素86.4%,氨芐西林0%,頭孢曲松40.9%,美羅培南54.5%,慶大霉素0%,環丙沙星0%,左旋氧氟沙星0%,氧氟沙星4.5%,克林霉素95.5%,紅霉素95.5%,萬古霉素0%,氯霉素27.3%,四環素90.9%。結論 應該積極對兒童預防接種肺炎鏈球菌疫苗,青霉素對該菌耐藥性較高。
肺炎鏈球菌(Streptococcus Pneumoniae, SP)是兒科社區獲得性感染的主要病原菌之一,主要寄生在人類上呼吸道,為條件致病菌,約40% ~ 70% 正常人鼻咽部有本菌存在。可通過飛沫、分泌物傳播,對人的健康構成了一定的威脅,WHO估計,每年大約有160萬人死于SP感染,其中5歲以下兒童占43.8%~62.5%,且大多數分布在發展中國家。更為嚴重的是,在過去青霉素等抗菌藥物是治療肺炎鏈球菌感染的有效手段,但隨著抗菌藥物的大量使用或使用不合理,耐青霉素菌株和多重耐藥菌株持續增加,已成為臨床抗感染治療的新難題。肺炎鏈球菌疫苗是預防其感染、延緩耐藥菌株產生和傳播的有效措施。SP感染嚴重威脅著兒童的健康,避免抗生素濫用是目前公認的較好的控制SP耐藥發生和發展的主要途徑。為了解近年來肺炎鏈球菌的耐藥情況,為臨床合理使用抗生素提供依據,特對昆明市兒童醫院2013年7月~10月臨床分離的非重復的22株肺炎鏈球菌的耐藥性進行回顧性分析,現將結果報道如下。
一、資料與方法
(一)一般資料
2013年7月—10月分離自昆明市兒童醫院患兒的肺炎鏈球菌感染菌株22株。其中16株來自痰液,5株來自血培養,1株來自其他。
(二)菌株鑒定
將采集的標本接種于血平板(鄭州安圖提供),置于5% CO2,35℃過夜孵育18~24h。挑選菌落周圍有草綠色溶血環、細小、灰白色、表面光滑、扁平的可疑菌落,或中央塌陷、邊緣隆起、呈臍窩狀的可疑菌落,或表面光滑、濕潤有黏液的可疑菌落,進行革蘭染色、觸酶試驗、奧普托欣試驗(抑菌圈>10mm)、肺炎鏈球菌膠乳凝集試驗確認。
(三)試劑
肺炎鏈球菌藥敏試劑盒(湖南長沙天地人生生物科技提供),生化培養液,藥敏培養液,無菌加樣滴管,Crystal Spec比濁儀。
(四)方法
肺炎鏈球菌細菌生化鑒定:取生化培養液一只,將肺炎鏈球菌制成濁度為1麥氏單位的細菌懸浮液,成為生化試驗菌液,用加樣器轉移150μL菌液到A、B、C三行24個生化試驗孔中。肺炎鏈球菌藥敏試驗:取一只普通藥敏培養液,用無菌加樣滴管取調好的生化試驗菌落加入普通藥敏培養液中,使濃度為5×105FU/ml,混勻,加入D、E、F、G各行藥敏孔中每孔加150μL試驗菌液。蓋上卡片蓋板,在35℃培養基中孵育16—24h。后取出卡片15-20分鐘觀察結果,人工目測結果即可獲得待測菌株鑒定結果,
二、結果
(一)22株肺炎鏈球菌對抗生素的耐藥情況(表1)
(二)肺炎鏈球菌耐藥分析
從表1可見左氧氟沙星敏感率> 95%;氧氟沙星>70%;萬古霉素敏感率100%; 紅霉素及克林霉素高度耐藥,敏感率< 5%,青霉素的敏感率為0%。
三、討論
肺炎鏈球菌是社區獲得性下呼吸道感染的主要病原菌,肺炎鏈球菌廣泛存在于自然界,可通過飛沫、分泌物傳播,也可經呼吸道發生自體轉移,被感染者一般處于帶菌或定植狀態,一旦機體免疫力降低,細菌可發生局部浸潤引發感染,導致中耳炎、鼻竇炎、急性肺炎和支氣管炎、敗血癥等。
肺炎鏈球菌的主要危害對象為兒童和老年人,尤其對嬰幼兒危害更嚴重。在本院分離出的22株肺炎鏈球菌患兒標本中,以痰液標本分離率最高,達72.72%,5例血陽性標本中有2例并發腦膜炎,證明嬰幼兒血腦屏障發育不健全,易受感染,未見單獨腦脊液標本陽性。
根據資料近年來,我國青霉素不敏感肺炎鏈球菌發生率已接近日韓等高耐藥國家水平,其中高水平耐藥的比率亦有顯著增長。2005年中國細菌耐藥監測研究組(CHINET)細菌耐藥性監測結果顯示84株肺炎鏈球菌中青霉素不敏感SP(PNSP)約占61%,2006 年該研究組監測結果顯示成人株青霉素的不敏感率7.9%,兒童及青少年患者中青霉素不敏感率為88.2%,2007 年的監測成人組和兒童青少年組青霉素的不敏感率分別為26.4%和88.5%。2006—2008年我國四家兒童醫院開展的住院肺炎流行病學研究發現,PNSP已達86.0%。肺炎鏈球菌交叉耐藥和多重耐藥現象明顯。本組肺炎鏈球菌對青霉素的敏感率為0%,對紅霉素和克林霉素均高度耐藥,對氯霉素低度耐藥,對左氧氟沙星和萬古霉素、慶大霉素均完全敏感。所以,紅霉素、克林霉素不應作為肺炎鏈球菌感染治療的常規藥物,萬古霉素可作為嚴重侵襲性肺炎鏈球菌疾病經驗用藥的理想選擇,早期有效抗感染治療,能提高治愈率,降低病死率。以上這些資料表明中國青霉素不敏感率處于上升趨勢,同時也表明兒童患者肺炎鏈球菌對青霉素的不敏感率明顯高于成人除此之外,建立細菌耐藥監測網,并借助于MLST等分子生物學的方法追蹤細菌的耐藥起源和播散途徑,可以為臨床更好的控制SP耐藥性的發生和發展提供有力的依據。
(作者單位:云南省楚雄醫藥高等專科學校)