髓樣細胞白血病-1及染色質重塑A蛋白在卵巢上皮癌組織中的表達*＊?

潘　玲，何　常＊

(貴州醫科大學附院病理科，貴州貴陽　550004)

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髓樣細胞白血病-1及染色質重塑A蛋白在卵巢上皮癌組織中的表達*＊?

潘玲＊＊，何常＊＊＊

(貴州醫科大學附院病理科，貴州貴陽550004)

［摘要］目的:探討髓樣細胞白血病-1基因(Mcl-1)及染色質重塑基因A(ARIDIA)蛋白在卵巢上皮癌組織中的表達。方法:應用免疫組化Envision法檢測113例卵巢上皮癌(Ⅰ期42例、Ⅱ期28例、Ⅲ期30例及Ⅳ期13 例)組織、40例卵巢囊腺瘤組織及20例正常卵巢組織中的Mcl-1、ARIDIA蛋白表達，比較2種蛋白表達陽性率在3種組織和不同分期卵巢上皮癌組織的表達情況。結果:卵巢上皮癌組織中Mcl-1蛋白表達陽性率明顯高于卵巢囊腺瘤和正常組織，而ARIDIA明顯低于卵巢囊腺瘤和正常組織(P＜0.05) ; Mcl-1蛋白在卵巢上皮性癌Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期及Ⅳ期的組織中表達陽性率逐漸升高，ARIDIA蛋白表達陽性率逐漸降低，差異有統計學意義(P＜0.05)。結論:卵巢上皮性癌的發生、發展與Mcl-1蛋白表達升高和ARIDIA蛋白表達降低有關。

［關鍵詞］細胞凋亡;抑癌基因;髓樣細胞白血病-1蛋白;染色質重塑基因A蛋白;卵巢腫瘤;免疫組織化學

＊＊貴州醫科大學病理科2012級碩士研究生

＊＊＊通信作者E-mail: 2077166911@ qq.com

網絡出版時間: 2016－02－23網絡出版地址: http: / /www.cnki.net/kcms/detail/52.5012.R.20160223.2104.060.html

雖然卵巢癌的發病率次于子宮頸癌和子宮體癌，但其死亡率卻占各類婦科腫瘤的首位［1］。有研究報道，腫瘤的發生、發展與抗凋亡基因的激活和抑癌基因的失活有關，髓樣細胞白血病-1基因(myeloid cell leukemia-1，Mcl-1)蛋白是Bcl-2家族的抗凋亡成員，在細胞周期和死亡程序中起重要作用［2－3］。染色質重塑基因A(AT rich interactive domain A，ARIDIA)是參與染色體重塑的基因，是一個新興的抑癌基因，其蛋白在卵巢透明細胞癌組織表達缺失［4］。本研究采用免疫組織化學Envision法檢測卵巢上皮癌組織、卵巢囊腺瘤組織及正常卵巢組織中Mcl-1與ARIDIA蛋白的表達情況，探討Mcl-1與ARIDIA蛋白表達與卵巢上皮癌的關系，報道如下。

1　對象與方法

1.1臨床資料

收集2012年1月～2014年12月經病理確診的113例卵巢上皮性癌患者手術標本，患者41～71歲，平均(60.28±7.57)歲;病程2～7年，平均(4.07±1.55)年;參照2013年國際婦產科聯盟(FIGO)分期［5］，Ⅰ期42例、Ⅱ期28例、Ⅲ期30例及Ⅳ期13例;有淋巴結轉移43例，未轉移70例;黏液性66例、漿液性47例;所有患者術前未行放、化療。選取同時段和同年齡段正常卵巢組織20例及卵巢囊腺瘤組織40例(包括黏液性25例、漿液性15例)作為研究對照。

1.2方法

所有組織標本經4%多聚福爾馬林固定，常規處理，石蠟包埋，4 μm連續切片。Mcl-1與ARIDIA兔抗人多克隆抗體及Envision試劑盒均購自武漢博士德公司。采用免疫組織化學(Envision)法檢測Mcl-1與ARIDIA蛋白陽性表達，染色過程按試劑盒說明書進行，Mcl-1與ARIDIA在細胞質、細胞核中均有表達，出現棕黃色顆粒記為陽性細胞(見圖1)，在高倍鏡(×400)視野下綜合染色強度和陽性細胞所占比例進行半定量測定。染色強度評分為不著色記0分，淡黃色者記1分，棕黃色者記2分，深棕色者記3分;每張切片隨機觀察5個視野，計數500個細胞中陽性細胞所占比例進行評分，陽性細胞數＜10%記0分，10%～30%記1分，31% ～60%記2分，＞60%記3分。兩項評分相加，0～1.0分為(－)，1.1～2.0分為(+)，2.1～3.0分為(+ +)，3.1～5.0分為(+ + +) ; (－～+)為陰性，(+ +～+ + +)為陽性。

注: A為Mcl-1蛋白，B為ARIDIA蛋白圖1　卵巢上皮癌組織中Mcl-1、ARIDIA表達(Envision，×400)Fig.1　Mcl-1 and ARIDI positive expression of epithelial ovarian carcinomas tissue

1.3觀察指標

記錄Mcl-1、ARIDIA蛋白在正常卵巢組織、卵巢囊腺瘤組織及Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ及Ⅳ期卵巢上皮癌組織中的表達陽性數，分析Mcl-1、ARIDIA蛋白表達與卵巢上皮性癌及FIGO分期的關系。

1.4統計學方法

應用SPSS 15.0軟件分析，計數資料采用百分比(%)表示，數據比較采取卡方檢驗，P＜0.05表示差異有統計學意義。

2　結果

卵巢上皮癌組織中Mcl-1蛋白表達陽性例數明顯高于卵巢囊腺瘤和正常組織，ARIDIA蛋白表達陽性例數明顯低于卵巢囊腺瘤和正常組織，差異具有統計學意義(P＜0.05)，見表1。Mcl-1蛋白在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ及Ⅳ期卵巢上皮癌組織中的表達陽性率逐漸升高，ARIDIA蛋白表達陽性率逐漸降低，兩兩比較差異有統計學意義(P＜0.05)，見表2。提示卵巢上皮性癌患者病情的發生、發展與Mcl-1蛋白表達呈升高、ARIDIA蛋白表達降低有關。

3　討論

Mcl-1是Bcl-2家族中重要的抗凋亡成員，是通過線粒體途徑參與細胞凋亡和增殖過程的重要分子，基因定位于線粒體外膜，抗凋亡作用主要通過Bak、Bax、Bad等Bcl-2家族中的促凋亡成員形成異聚體，發生中和效應阻止凋亡的啟動，抑制細胞色素C從線粒體上的釋放，Mcl-1蛋白在淋巴瘤、白血病、多發性骨髓瘤、肝癌、肺癌以及前列腺癌等多種腫瘤組織中表達升高［2，6－8］。ARIDIA是一個參與染色體重塑的新興的抑癌基因，定位于1號染色體lp36.11，ARIDIA蛋白富含A-T序列，分子量約為240 kDa，正常情況下主要參與組織發育和細胞分化，在卵巢透明細胞癌組織表達缺失［3，8］。研究發現ARIDIA與卵巢上皮細胞癌及低度子宮內膜癌的發生的密切相關，可影響細胞的凋亡［3，9－10］。

本研究為探討卵巢上皮性癌的發生、發展與細胞凋亡的關系，采用免疫組織化學法檢測卵巢上皮性癌組織、卵巢囊腺瘤組織及正常卵巢組織中Mcl-1與ARIDIA蛋白的陽性表達情況，同時分析Mcl-1與ARIDIA蛋白表達與卵巢上皮性癌臨床分期的關系，結果發現卵巢上皮性癌上皮性組織中Mcl-1蛋白表達陽性例數明顯高于卵巢囊腺瘤和正常組織，而ARIDIA蛋白表達陽性例數明顯低于卵巢囊腺瘤和正常組織(P＜0.05) ;在分析卵巢上皮性癌Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期及Ⅳ期癌組織中的Mcl-1ARIDIA蛋白表達陽性率的變化時發現，Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期及Ⅳ期隨著卵巢上皮性癌的惡性程度的加深，癌組織中的Mcl-1蛋白表達陽性率逐漸升高而ARIDIA蛋白表達陽性率逐漸降低，兩兩比較差異有統計學意義(P＜0.05)。提示卵巢上皮性癌的發生、發展與Mcl-1蛋白表達升高和ARIDIA蛋白表達降低有關。

表1　正常卵巢、卵巢囊腺瘤及卵巢上皮癌組織中Mcl-1、ARIDIA蛋白表達Tab.1 Mcl-1 and ARIDIA protein expression of normal ovaries，ovarian cyst adenoma and ovarian cancer tissues

表2　Ⅰ～Ⅳ期卵巢上皮癌組織中Mcl-1及ARIDIA蛋白表達Tab.2 Mcl-1，ARIDIA protein expression of ovarian cancer tissue in different clinical stages

4　參考文獻

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［3］馬變穎，王梓，張彬，等.肺癌相關抑癌基因的研究進展［J］.生命科學研究，2014(1) : 83－90.

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［5］林仲秋，謝玲玲，李晶.FIGO 2013卵巢癌、輸卵管癌、腹膜癌新分期解讀［J］.中國實用婦科與產科雜志，2013(12) : 921－924.

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［8］Guan B，Mao TL，Pradeep K，et al.Mutation and loss of expression of ARIDIA in uterine low-grade endometrioid carcinoma［J］.Am J Surg Pathol，2011(5) : 625－632.

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［10］焦俊霞，高維娟.細胞凋亡的信號轉導機制研究進展［J］.中國老年學雜志，2010(6) : 853－856.

(2015－11－12收稿，2015－12－24修回)

中文編輯:戚璐;英文編輯:趙毅

Expression of Myeloid Cell Leukemia-1and Chromatin Remodeling A Protein in Epithelial Ovarian Carcinomas Tissue

PAN Lin，HE Chang
(Department of Pathology，Affiliated Hospital of Guizhou Medical University，Guiyang 550004，Guizhou，China)

［Abstract］Objective: To investigate expression of myeloid cell leukemia-1(Mcl-1) and chromatin remodeling gene A(ARIDIA) protein in epithelial ovarian carcinomas tissue.Methods: Adopting IHC Envision assay to test Mcl-1 and ARIDIA protein expression of 113 epithelial ovarian carcinomas tissue (42 cases of Phase I，28 cases of Phase Ii，30 cases of Phase III and 13 cases of Phase IV)，40 ovarian cystadenoma tissue and 20 healthy ovarian tissue; comparing expression of positive rate of 2 protein expression in 3 different tissues and phases ovarian carcinomas tissues.Results: Mcl-1 protein expression positive rate of ovarian carcinomas tissue was obviously higher than that of epithelial ovarian carcinomas and healthy tissue(P＜0.05) ; expression positive rate of Mcl-1 protein in epithelial ovarian carcinomas Phase I，II，III and IV increased gradually，ARIDIA protein expression positive rate decreased gradually，difference was statistically significant(P＜0.05).Conclusion: Occurrence of epithelial ovarian carcinomas and development was correlated with Mcl-1 protein expression increase and ARIDIA protein expression decrease.

［Key words］apoptosis; tumor suppressor gene; myeloid cell leukemia-1 protein; chromatin remodeling gene A protein; ovarian tumor; immunohistochemistry

*［基金項目］貴州省科技廳基金(E2010－4)

［中圖分類號］R737.31

［文獻標識碼］A

［文章編號］1000-2707(2016) 02-0155-03