13 442例兒童末梢血白細胞及五分類參數參考范圍調查

黃玉開，劉 銳，顧曉瓊，梁肖云，曾蘭蘭，劉 非，梁綺華

(1.廣州市婦女兒童醫療中心檢驗科，廣東廣州 510623；2.仲愷農業工程學院

輕工食品學院，廣東廣州 510225 )

·論 著·

13 442例兒童末梢血白細胞及五分類參數參考范圍調查

黃玉開1，劉 銳2，顧曉瓊1，梁肖云1，曾蘭蘭1，劉 非1，梁綺華1

(1.廣州市婦女兒童醫療中心檢驗科，廣東廣州 510623；2.仲愷農業工程學院

輕工食品學院，廣東廣州 510225 )

目的 對13 442例健康兒童末梢血白細胞及五分類參數參考范圍調查分析，為臨床診斷提供參考。方法 按照健康兒童篩選標準及血液疾病、感染性疾病、服藥史等排除標準，選擇來自廣州市婦女兒童醫療中心保健科進行體檢和相關檢查均正常的健康者，年齡1個月至7歲的兒童13 442例，采用日本Sysmex XS-800i 型全自動血細胞分析儀及配套試劑進行白細胞分析參數檢測。結果 白細胞及五分類參數均不符合正態分布；經Mann-Whitney檢驗，不同性別兒童間比較，WBC、BASO#、NEU#參數差異無統計學意義(P>0.05)，而LYM#、MONO#、EOS#參數差異有統計學意義(P<0.001)，其中LYM#女性顯著高于男性，MONO#和EOS#男性顯著高于女性；經Kruskal-Wallis檢驗，不同年齡組進行比較，白細胞及五分類參數差異均有統計學意義(P<0.001)，其中WBC、LYM#、MONO#、EOS#參數隨年齡的增加而降低，NEU#隨年齡的增加而不斷提高，而BASO#在4歲前隨年齡的增加而下降，4歲后隨年齡的增加而增加。結論 應該在充分考慮性別、年齡等因素的基礎上制定1個月至7歲兒童獨立的白細胞類參數的參考值范圍。

健康兒童； 白細胞； 參考區間

白細胞(WBC)指的是一類由骨髓中的造血干細胞分化而來的一種抵抗感染排斥異物的免疫細胞。根據形態和功能又可以將白細胞分成五類，分別為淋巴細胞(LYM#)、中性粒細胞(NEU#)、單核細胞(MONO#)、嗜酸粒細胞(EOS#)和嗜堿性粒細胞(BASO#)[1]。各類白細胞檢測數據是血液檢測中的最為重要的項目之一。其值是臨床醫生對身體狀況、疾病判斷及診治的重要依據?，F在兒童末梢血白細胞類檢測項目正常參考值范圍直接套用健康成人的參考值范圍[2]。白細胞類項目檢測值往往受到多種生理因素的影響。兒童處于生長發育最為快速階段，這個時期往往也會引起血液檢測中的各個指標的劇烈變化[3]。研究兒童階段白細胞類參數特點具有重要意義。雖然國內關于兒童血常規參數報道的文獻較多，其中僅僅包含白細胞總數等少量指標[4-7]。本文調查了年齡階段處于1個月至7歲之間的13 442例健康兒童血液樣本末梢血檢測結果，對WBC、LYM#、NEU#、單核細胞的數目MONO#、EOS#、BASO#6個白細胞類檢測項目進行統計學分析。

1 資料與方法

1.1 一般資料 調查人群來自2012年～2014年來本院保健科進行體檢保健的健康兒童，共13 442例。年齡范圍出生1個月至7歲。經體檢證明生長發育正常，無慢性病史，無營養不良，無貧血史。

1.2 儀器與試劑 Sysmex XS-800i全自動血液分析儀及原裝配套試劑。

1.3 測量方法 所用的儀器每半年由工程師進行校準，要求結果均在范圍內，每年均參加衛生部和廣東省的室間質評，要求結果在范圍內。每月進行1次新鮮全血的比對試驗，每天均進行2次室內質控的測定，早上8點開機及下午4點均用3個濃度水平e-CHECK質控品對儀器進行質控，在控后再進行操作。由熟練的工作人員采集末梢循環良好的左手無名指內側血液100 μL,采血前用碘伏消毒，待干，并棄去第一滴血，然后加入含EDTA-K2的抗凝管中，將抗凝劑和血液充分混勻后室溫放置，嚴格按照儀器的操作規程進行測定，樣品均在2 h內完成測定。

1.4 檢查的參數 WBC、LYM#、NEU#、MONO#、EOS#和BASO#。

1.5 統計學處理 首先采用Tukey′s Hinges判斷數據離群值，并將其刪除。然后利用直方圖、QQ圖、PP圖及Kolmogorov-Smirnov檢測方法等判斷各個參數數據是否符合正態分布。對呈正態分布的參數，按照方差分析或者t檢驗進行分析，并計算其正常參考值范圍，對不是正態分布的參數，根據實際情況選擇不同的非參模型進行分析。所有的數據處理采用SPSS22.0統計軟件進行計算。

2 結 果

2.1 各個參數分布 首先判斷白細胞類參數分布進行判斷，是正確選擇統計方法的基礎。只有正態分布且方差齊整的情況下，才可以使用T檢驗或F檢驗的統計方法。通過直方圖、PP圖及QQ圖直觀判斷，所有白細胞類參數均偏離正態分布。對所有參數進行Kolmogorov-Smirnov檢測，其P<0.001，計算其偏度系數Skewness值及峰度系數Kurtosis，均不滿足正態分布要求，其結果與中外文獻報道相符[3,7-8]。根據其形狀及偏度系數值判斷，所有的參數分布均為正偏態分布。對所有數據進行對數、開方等變換后，數據也無法滿足正態分布及方差齊整，所以在后面的分析中，如果是兩組數據進行比較，采用了Mann-Whitney非參檢驗方法，而多組數據比較采用了Kruskal-Wallis非參檢驗方法。

2.2 不同性別組比較結果 性別對整體數據影響，采用非參統計Mann-Whitney進行兩水平統計分析，數據分析結果顯示WBC、BASO#及NEU#參數的P值大于0.05，所以不同性別組間數據差異不具有統計學意義。而EOS#、LYM#及MONO#參數的P值均小于0.001，說明不同性別組之間存在的差異具統計學意義。EOS#值參數與MONO#值參數中，男性組顯著大于女性組。而LYM#參數中，女性組顯著大于男性組。

2.3 不同年齡組比較結果 年齡對5個參數數據的比對，采用非參統計Kruskal-Wallis進行多水平統計分析，所有比較項目的P均小于0.001，年齡對白細胞類的6個檢測參數的影響非常顯著。為了進一步研究年齡對各個指標的具體影響，給出合理的區段劃分及合理的參考指標范圍，首先用1歲組與2歲組進行兩水平的非參數的Mann-Whitney的檢測，如果兩組之間無顯著性差異，則將兩組合為一組后，再與3歲組進行兩水平檢驗，但是如果兩組差異顯著，則再選擇2歲組與3歲組進行兩水平檢驗，以此類推直至所有年齡組全部比較完。然后根據結果對年齡組進行劃分合并后，再進行多樣本的Kruskal-Wallis檢測方法中的逐步降低(stepwise step-down)的方法進行分析。由于性別對WBC、BASO#和NEU# 3個參數無顯著性影響，因此在年齡階段的劃分上，不再考慮性別對結果的影響。而性別對EOS#、LYM#、MONO# 3個參數具有非常顯著的影響，因此，針對這3個參數，筆者相同性別下的年齡比較統計分析。其分組及統計分析結果如表1所示。

表1 根據性別和年齡分組后的參考區間(×109/L)

續表1 根據性別和年齡分組后的參考區間(×109/L)

3 討 論

兒童處于一個快速生長發育過程，且其生長環境也往往伴隨其不同成長的階段而劇烈變化。這個階段中，其血液中的多種指標均會受到年齡和性別等因素的影響[3,9-10]。其抵御疾病的免疫系統也是在逐漸成熟的變化過程，所以這個階段，其血液中的白細胞類指標也會隨年齡的增加而劇烈變化。準確掌握白細胞種類隨年齡的增加而變化的規律，對于了解兒童發育臨床疾病診斷等具有重要意義。

進行這方面的研究，遇到的首要問題是獲得準確的大樣本數據。本研究收集了來廣州市婦女兒童醫療中心保健科進行保健及健康體檢的1個月至7歲兒童的末梢血樣本，并根據體檢結果剔除了具有生長發育遲緩、慢性病史、營養不良、貧血等非健康樣本，保證了數據的真實、可靠性，并以年為一階段收集樣本進行分析。

已經發表了的關于兒童末梢血參數調查研究的文獻，大部分研究僅僅關注WBC等少量指標[4-7]。而WBC不能反映白細胞五分類各個參數的實際情況。本研究表明不同性別的兒童，雖然WBC差異并無統計學意義，這與前期報道結果一致[6-7,11]。但是EOS#、MONO#及LYM# 3個參數差異卻具有非常顯著的統計學意義。WBC值隨著年齡的增加而降低，而五分類中的NEU#則隨歲年齡的增加而不斷增加。因此有必要對白細胞及五分類的所有參數進行詳細的研究分析。

本研究結果顯示了在1個月至7歲兒童階段，性別對WBC、BASO#及NEU#整體上影響不大，但是對EOS#、MONO#和LYM#的差異卻具有顯著的統計學意義。其中EOS#和MONO#這2個參數的男性兒童參考值范圍要高于女性兒童，LYM#參數的女性兒童參考值范圍要高于男性兒童。而在這個成長階段內，年齡對所有的白細胞及五分類參數均具有重要的影響。WBC、BASO#、MONO#、LYM#值均隨著年齡的增加而降低，NEU#則隨歲年齡的增加而不斷增加。前期研究末梢血參數的報道文獻，并沒有考慮或者是忽略了年齡對末梢血參數的影響，將覆蓋的所有年齡階段作為一個整體進行研究，提出參考范圍[4,6,7]。本研究結果建議在臨床診斷上，應該充分考慮到性別、年齡上的差異，以避免作出錯誤的判斷。

雖然處于1個月至7歲之間的兒童，性別的特征并不明顯，但是性別仍然顯著影響一些白細胞參數。甚至有些白細胞參數如EOS#在男、女組中，隨年齡增長變化的趨勢并不相同。很多文獻也報道了兒童階段性別對一些指標具有顯著性的影響[6,10,12]。對于兒童階段不同性別造成的檢測參數的不同原因及結果，需要更多的研究與關注。

在各個生理生化指標劇烈變化的兒童生長階段，需要收集更為詳細的資料，如準確到月的年齡資料、身高、體質量、生長環境、患病史、生長環境、檢測方法等，進行更為深入詳細的研究，從而科學劃分分組，制定合理的正常參考區間，將具有重要的醫學價值。

[1]許文榮,丁磊,胡麗華,等.臨床基礎檢驗學[M].北京：人民衛生出版社,2015.

[2]宮春勇,胡坤.紅細胞平均體積在疾病檢測與治療中的臨床應用[J].醫學綜述,2007,13(18):1434-1436.

[3]Adeli K,Raizman JE,Chen Y,et al.Complex biological profile of hematologic markers across pediatric,adult,and geriatric ages:establishment of robust pediatric and adult reference intervals on the basis of the canadian health measures survey[J].Clinical Chemistry,2015,26(3):421-424.

[4]袁明生,吳起武.4 536名健康兒童末梢血血常規參數參考區間的調查分析[J].中國婦幼保健,2014,35(4):573-575.

[5]鄭風英.山東青海玉樹籍學生血常規的調查分析[J].濱州醫學院學報,2014,35(4):297-298.

[6]鄭建新,楊慧,傅啟華.上海市學齡前兒童末梢血血常規的參考值范圍調查分析[J].國際檢驗醫學雜志,2014,35(16):2194-2196.

[7]陳宗波,李國選,周碧蕓,等.佛山市南海區3～14歲健康兒童靜脈血血細胞參數參考范圍調查[J].國際檢驗醫學雜志,2014,35(8):1005-1006.

[8]Qiao R,Yang S,Yao B,et al.Complete blood count reference intervals and age-and sex-related trends of North China Han population[J].Clin Chem Lab Med,2014,52(7):1025-1032.

[9]Colantonio DA,Kyriakopoulou L,Chan MK,et al.Closing the gaps in pediatric laboratory reference intervals:a caliper database of 40 biochemical markers in a healthy and multiethnic population of children[J].Clinical Chemistry,2012,26(2):216-219.

[10]Bailey D,Colantonio D,Kyriakopoulou L,et al.Marked biological variance in endocrine and biochemical markers in childhood:establishment of pediatric reference intervals using healthy community children from the CALIPER cohort[J].Clinical Chemistry,2013,59(9):1393-1405.

[11]李松濤,唐吟岫,徐靜華,等.南京地區2～5歲健康兒童末梢血血常規參考范圍調查[J].廣東醫學,2014,(8):1247-1248.

[12]梁有勇.8歲以下兒童末梢血血紅蛋白參考范圍分析[J].中國全科醫學,2012,28(15):1744-1745.

Investigation on reference ranges of peripheral white blood cells and five classification parameters among 13 442 children

HuangYukai1,LiuRui2,GuXiaoqiong1,LiangXiaoyun1,ZengLanlan1,LiuFei1,LiangQihua1

(1.DepartmentofClinicalBiochemistry，GuangzhouMunicipalWomenandChildrenMedicalCenter,Guangzhou,Guangdong510623,China; 2.CollegeofLightIndustryFood,ZhongkaiUniversityofAgricultureandEngineering,Guangzhou,Guangdong510225,China)

Objective To investigate the reference ranges of peripheral white blood cells(WBC) and five classification parameters among 13 442 apparently healthy children to provide reference for clinical diagnosis.Methods A total of 13 442 apparently healthy children aged from 1 month old to 5 years undergoing the health physical examination in the healthcare department of the Guangzhou Municipal Women and Children Medical Center were chosen according to the healthy children screening standard and the exclusion standard of hematological diseases,infection diseases and drug administration history.The WBC analysis and its parameters detection were performed by using the Sysmex XS-800i automatic blood cell analyzer.Results WBC and its five classification parameters were not accorded with the normally distribution.By the Mann-whitney test,no statistically significant differences in WBC,BASO# and NEU# were detected between different genders of children (P>0.05),while the differences in LYM#,MONO# and EOS# had statistical significance(P<0.001),in which the LYM# level in females was significantly higher than that in males,while the MONO# and EOS# levels in females were lower than those in males; By the Kruskal-Wallis test，WBC and five classification parameters had statistically significant differences among different age groups (P<0.001).The parameters of WBC,LYM#,MONO# and EOS# were decreased with age increase,while NEU# was constantly increased with age increase and BASO# was decreased with age increase before 4 years old.Conclusion All factors such as gender,age should be The independent reference rangesl of WBC parameters among children aged from 1 month old to 7 years old should be formulated on the basis of fully considering the factors such as gender,age.

healthy child; white blood cell; reference interval

黃玉開，女，主管技師，主要從事醫學檢驗研究。

10.3969/j.issn.1673-4130.2016.07.008 文獻標識碼：A 文章編號：1673-4130(2016)07-0886-04

2015-11-18)