265例血型不規則抗體特異性及其臨床分布情況的分析*

杜 娟，張勇萍#，楊世明△，安 寧，李 丹，楊 琳，陳 揚，穆士杰▲

(1.第四軍醫大學唐都醫院輸血科，陜西西安 710038；2.第四軍醫大學西京醫院輸血科，陜西西安 710032)

·臨床研究·

265例血型不規則抗體特異性及其臨床分布情況的分析*

杜 娟1，張勇萍1#，楊世明1△，安 寧2，李 丹1，楊 琳1，陳 揚1，穆士杰1▲

(1.第四軍醫大學唐都醫院輸血科，陜西西安 710038；2.第四軍醫大學西京醫院輸血科，陜西西安 710032)

目的 探討血型不規則抗體特異性和陽性率及其在臨床科室的分布情況。方法 采用微柱凝膠法對孕婦產前檢查或擬輸血治療的患者進行血型不規則抗體篩查，對篩查陽性的血標本再用相同方法進行抗體特異性鑒定，統計分析血型不規則抗體的特異性和陽性率及其在臨床科室的分布情況。結果 265例血型不規則抗體陽性者中，男95例(35.8%)，女170例(64.2%)。非特異性自身抗體32例(12.1%)，特異性同種抗體233例(87.9%)，其中Rh血型系統抗體201例(75.8%)，MNS血型系統14例(5.3%)，P血型系統1例(0.4%)，Lewis血型系統11例(4.2%)，Kidd血型系統3例(1.1%)，Duffy血型系統3例(1.1%)。免疫球蛋白類型：IgG型204例(77.0%)，IgM型58例(21.9%)，IgG+IgM型3例(1.1%)，抗體效價在4～512之間。37℃反應性：+/-～++++。血型不規則抗體在臨床科室中的分布：婦產科、血液科及感染科的血型不規則抗體陽性率居前三位，分別為15.5%(41/265)、12.8%(34/265)及11.3%(30/265)。結論 對孕婦或擬輸血者進行血型不規則抗體篩查和特異性鑒定，對防治新生兒溶血病，保障患者手術和治療及時用血及輸血安全有重要意義。

紅細胞血型； 不規則抗體； 特異性鑒定； 臨床科室； 分布情況

血型不規則抗體是指ABO血型系統以外的所有紅細胞血型抗體，血型不規則抗體多為免疫產生的IgG型抗體，可導致母嬰血型不合新生兒溶血病、溶血性輸血反應、ABO血型正反定型不符及交叉配血不合[1]。鑒于血型不規則抗體導致的上述不良反應及危險性，在產前或輸血前對孕婦或患者進行血型不規則抗體檢測，提前預防或選擇不含相應抗原的血液進行輸注，是防治新生兒溶血病和降低輸血不良反應發生率，確保輸血安全有效的重要措施[2-3]。現將265例血型不規則抗體的特異性和陽性率及其在臨床科室的分布情況報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2012年6月30日至2015年6月30日在唐都醫院住院擇期手術和擬輸血治療以及在婦產科生殖中心就診，血型不規則抗體篩查為陽性的血標本265例，其中男95例(35.8%)，女170例(64.2%)，年齡24 h至80歲。經唐都醫院倫理學委員會批準、患者家屬知情同意。

1.2 試劑與儀器 抗A、抗B、抗D、抗C、抗c、抗E、抗e、抗M、抗N及抗P1定型血清，抗體篩查細胞及鑒定譜細胞、抗IgG、抗C3d及多特異性抗人球蛋白試劑均由上海生物醫藥有限責任公司提供，抗S、抗Lea、抗Leb、抗Jka、抗Jkb定型試劑為英國BIOSCOT公司產品，聚凝胺試劑盒由貝索公司提供；微柱凝膠血型及配血試劑卡由瑞士達亞美公司提供。

1.3 檢測方法

1.3.1 血型不規則抗體篩查 向標記的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ號微柱凝膠卡中加被檢血清50 μL，再加1%的相應抗體篩查紅細胞25 μL，置37 ℃孵育15 min，取出置專用離心機離心10 min，觀察結果，紅細胞全部沉于微柱凝膠卡底部者為陰性，聚集在微柱凝膠卡上部或中段者為陽性。

1.3.2 血型不規則抗體特異性鑒定 對抗體篩查陽性的血標本再用微柱凝膠法進行抗體特異性鑒定，取微柱凝膠卡標記1～10號，在各微柱管中加入與標記號相對應的抗體鑒定譜細胞20 μL，再于各管中加入被檢血清40 μL，于37 ℃孵育15 min，置專用離心機1 030 r/min離心10 min，觀察結果；被檢血清與10個譜細胞中任何一個凝集，與自身對照不凝集判者為有特異性抗體，與所有譜細胞和自身對照均凝集者，判為有自身抗體或未檢出特異性抗體，與譜細胞均不凝集者判為未檢出特異性抗體，同時檢測其紅細胞上的相應抗原是否為陰性。

1.3.3 血型不規則抗體效價及37 ℃反應性的檢測 對檢出特異性抗體的血標本進行倍比稀釋后，用試管法進行抗體效價測定。血型不規則抗體37 ℃反應性的檢測：采用試管鹽水法及間接抗人球蛋白試驗兩種方法，分別將被檢血清與含有相應抗原的紅細胞在37 ℃進行反應，只要其中任何一種方法在37 ℃出現凝集者，即判為有臨床意義的血型不規則抗體。

2 結 果

2.1 血型不規則抗體的特異性和Ig類型及37 ℃反應性 在265例血型不規則抗體陽性中，男95例(35.8%)，女170例(64.2%)。非特異性自身抗體32例(12.1%)，特異性同種抗體233例(87.9%)，其中Rh血型系統抗體201例(75.8%)，MNS血型系統14例(5.3%)，P血型系統1例(0.4%)，Lewis血型系統11例(4.2%)，Kidd血型系統3例(1.1%)；Duffy血型系統3例(1.1%)。免疫球蛋白類型：IgG型204例(77.0%)，IgM型58例(21.9%)，IgG+IgM型3例(1.1%)，抗體效價在4～512之間；37 ℃反應性：+/-～++++(表1)。

表1 265例血型不規則抗體特異性鑒定結果

“/”：無資料；“+/-～++++”：凝集強度；“-”：陰性。

2.2 血型不規則抗體陽性在臨床科室的分布 在265例血型不規則抗體中，婦產科41例(15.5%)，血液科34例(12.8%)，傳染科30例(11.3%)，腦外科29例(10.9%)，普外21例(7.9%)，骨科18例(6.8%)，胸外科17例(6.4%)，消化科14例(5.3%)，腫瘤科11例(4.2%)，泌尿科7例(2.6%)，新生兒科5例(1.9%)，其他科室38例(14.3%)。婦產科、血液科及感染科的血型不規則抗體陽性居前三位。

2.3 血型不規則抗體陽性與輸血及妊娠的關系 在265例血型不規則抗體陽性中，多次輸血或妊娠大于或等于2次者163例(61.5%)，孕產婦及新生兒溶血病患者67 例(25.3%)，初次輸血或原因不明者35例(13.2%)。

3 討 論

輸血是臨床治療疾病和搶救危重患者生命及時有效的重要手段，但因血液制品含有抗原及抗體成分的特殊性，在輸血過程中有可能出現不同程度的輸血不良反應[4]。近年來，隨著單克隆抗體血型檢測試劑敏感度的不斷提高，由ABO血型定型錯誤而引起的輸血不良反應已極少見，但由ABO以外的血型不規則抗體引起的輸血不良反應仍時有發生[5]。血型不規則抗體在人群中的檢出率約為0.3%～2%[6]，可由母嬰血型不合的妊娠、異型輸血、注射血液制品以及其他難以察覺的免疫刺激而導致血型不規則抗體的產生[7]。由于血型不規則抗體可引起溶血性輸血反應、新生兒溶血病、ABO血型正反定型不符及交叉配血不合[8-11]，因此在產前及輸血前對孕婦和受血者進行血型不規則抗體篩查及特異性鑒定，提前采取干預措施和選擇不含相應抗原的血液進行輸注，對預防新生兒溶血病、確保臨床輸血安全尤為重要。

本研究265例血型不規則抗體中，檢出非特異性自身抗體32例(12.1%)，主要為血液系統疾病患者，由于患者存在自身免疫性溶血性貧血，檢出的不規則抗體多數為自身溫抗體，在血型鑒定和交叉配血中起干擾作用[12]。自身溫抗體主要是IgG型，極少部分為IgM型，自身冷抗體是一種溫度范圍很窄的IgM型冷凝集素[13]，在4 ℃反應較強，超過37 ℃通常不反應。患者體內存在較強的自身溫抗體時，應采用自身洗滌或放散后的紅細胞在4 ℃吸收血清中的自身抗體后再進行同種抗體的檢測，以免其封閉或掩蓋同種抗體，導致嚴重的溶血性輸血反應。確定了同種抗體的特異性以后，選擇不含相應抗原的血液進行交叉配血及輸注[14]。

本研究檢出特異性同種血型不規則抗體233例(87.9%)，其中Rh血型系統抗體201例(75.8%)，MNS血型系統14例(5.3%)，P血型系統1例(0.4%)，Lewis血型系統11例(4.2%)，Kidd血型系統3例(1.1%)，Duffy血型系統3例(1.1%)。結果顯示，Rh血型系統不規則抗體的陽性率最高，其次為MNS血型系統，提示Rh及MNS血型系統最容易產生血型不規則抗體。其中Rh血型系統的抗E、抗cE及抗-C是最常見的血型不規則抗體，也是引起遲發性溶血性輸血反應及新生兒溶血病的主要因素[8-9]。抗M、抗Le、抗Jk及抗Fy是除Rh抗體之外比較常見的血型不規則抗體，但其臨床意義明顯小于Rh抗D、抗E及抗C。通常RhD抗原性比E抗原性更強，抗D的檢出率本應高于抗E，因我國較早采用RhD抗原相容性輸血，由輸血引起的抗D逐漸下降，由輸血引起的抗E呈上升趨勢[15]。本研究265例血型不規則抗體中，免疫球蛋白類型為：IgG型204例(77.0%)，IgM型58例(21.9%)，IgG+IgM型3例(1.1%)，抗體效價在4～512之間。37 ℃反應性：+/-～++++。其中IgG型或IgG+IgM型血型不規則抗體207例(78.1%)，而且絕大多數為IgG型抗體，能在37 ℃與含有相應抗原的紅細胞發生+/-～++++的凝集反應，因此說明所檢出的血型不規則抗體具有臨床意義[16]。

本研究265例血型不規則抗體臨床分布情況顯示，婦產科、血液科及感染科的血型不規則抗體陽性率居前三位，分別為15.5%、12.8%及11.3%。婦產科的血型不規則抗體陽性主要為孕產婦，血液科主要為白血病、自身免疫性溶血性貧血及多發性骨髓瘤患者，傳染科主要為乙型及丙型肝炎患者，可能與上述患者反復多次輸血有關[17]。從血型不規則抗體產生的種類及途徑分析，抗D多由妊娠免疫引起，抗E及抗Le多由反復輸血引起。本研究結果顯示，有輸血史或妊娠史的患者血型不規則抗體陽性明顯高于無輸血史或妊娠史者，女性患者的血型不規則抗體陽性(64.2%)明顯高于男性患者(35.8%)。其原因可能是由于女性患者受到妊娠和輸血的雙重免疫機會[18]，從而導致其血型不規則抗體陽性明顯高于男性。

綜上所述，反復輸血和多次妊娠極易受到免疫刺激而產生血型不規則抗體[19-20]，且絕大部分為IgG型抗體，在37 ℃有反應性，可引起溶血性輸血反應及新生兒溶血病。因此，在產前和輸血前對孕婦及受血者進行血型不規則抗體篩查及特異性鑒定，及早發現和確認有臨床意義的血型不規則抗體，對防治新生兒溶血病，確保臨床輸血安全和有效有重要意義。

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陜西省自然科學基金(2009JM4006)；陜西省社發公關項目(2010K15-03-07)。

#同為第一作者。

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，E-mail：shxkyshm@fmmu.edu.cn。

▲，E-mail：musj1963@fmmu.edu.cn。

10.3969/j.issn.1673-4130.2016.07.035 文獻標識碼：A 文章編號：1673-4130(2016)07-0956-03

2015-11-20)