左萬超,鄭衛(wèi)東
(1.武漢大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院,湖北武漢 430000,2.湖北醫(yī)藥學(xué)院附屬人民醫(yī)院檢驗(yàn)科,湖北十堰 442000)
·臨床研究·
全自動(dòng)尿沉渣分析儀在腦脊液細(xì)胞計(jì)數(shù)中的應(yīng)用
左萬超1,鄭衛(wèi)東2△
(1.武漢大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院,湖北武漢 430000,2.湖北醫(yī)藥學(xué)院附屬人民醫(yī)院檢驗(yàn)科,湖北十堰 442000)
目的 探討UF-1000i全自動(dòng)尿沉渣分析儀在腦脊液常規(guī)細(xì)胞計(jì)數(shù)中的應(yīng)用價(jià)值。方法 無菌條件下收集本院住院患者163例腦脊液常規(guī)標(biāo)本,同時(shí)用UF-1000i全自動(dòng)尿沉渣分析儀和改良牛鮑計(jì)數(shù)板進(jìn)行白細(xì)胞和紅細(xì)胞計(jì)數(shù),并對(duì)這兩種方法的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果 UF-1000i全自動(dòng)尿沉渣分析儀和改良牛鮑計(jì)數(shù)板兩種方法結(jié)果比較:腦脊液紅細(xì)胞計(jì)數(shù)(t=0.752,P=0.457)和白細(xì)胞計(jì)數(shù)(t=1.616,P=0.115)差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論 UF-1000i全自動(dòng)尿沉渣分析儀用于腦脊液細(xì)胞計(jì)數(shù),具有快速、準(zhǔn)確、重復(fù)性好等優(yōu)勢(shì)。
全自動(dòng)尿沉渣分析儀; 腦脊液; 細(xì)胞計(jì)數(shù)
腦脊液常規(guī),是臨床實(shí)驗(yàn)室十分常見的檢測(cè)項(xiàng)目,對(duì)于診斷中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病有著重要的參考價(jià)值,腦脊液細(xì)胞計(jì)數(shù)的“金標(biāo)準(zhǔn)”,至今仍然是在顯微鏡下,用改良牛鮑計(jì)數(shù)板進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)[1]。但該法存在操作繁瑣、計(jì)數(shù)誤差大、重復(fù)性差、人為影響因素較大等諸多弊端[2],影響對(duì)患者的病情分析。本文通過UF-1000i全自動(dòng)尿沉渣分析儀(以下簡(jiǎn)稱UF-1000i)和改良牛鮑計(jì)數(shù)板兩種方法對(duì)163例腦脊液標(biāo)本的白細(xì)胞數(shù)和紅細(xì)胞數(shù)進(jìn)行檢測(cè)并探討其臨床應(yīng)用價(jià)值。現(xiàn)報(bào)道如下。
1.1 一般資料 163例腦脊液患者均來自于本院2015年1~6月的各科住院患者,男136例,女27例,患者年齡7~86歲,其中神經(jīng)內(nèi)科45例,神經(jīng)外科31例,兒科27例,腫瘤科15例,感染科22例,呼吸科11例,消化7例,其他科室5例。
1.2 儀器和試劑 UF-1000i和配套的原裝試劑與室內(nèi)質(zhì)控品;改良牛鮑計(jì)數(shù)板;日本OLYMPUS CX-1雙目光學(xué)顯微鏡。
1.3 檢測(cè)方法 所有標(biāo)本由臨床醫(yī)師無菌方法采集于干凈、干燥的腦脊液專用試管中,立即送檢,檢驗(yàn)醫(yī)師在1 h內(nèi)完成檢測(cè)。每份標(biāo)本同時(shí)進(jìn)行以下兩種方法檢測(cè):(1)顯微鏡計(jì)數(shù)法,嚴(yán)格按照《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》第3版[3]規(guī)定操作,將腦脊液充分混勻后滴入改良牛鮑計(jì)數(shù)板充池計(jì)數(shù),由經(jīng)驗(yàn)豐富的檢驗(yàn)師用雙盲法分別進(jìn)行白細(xì)胞計(jì)數(shù)、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)各2次取平均值;(2)UF-1000i每天工作前執(zhí)行保養(yǎng)程序,儀器狀態(tài)良好后進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)控,質(zhì)控品各項(xiàng)結(jié)果在控后方可進(jìn)行標(biāo)本檢測(cè),將腦脊液標(biāo)本充分混勻后采用UF-1000i的手動(dòng)進(jìn)樣模式進(jìn)行測(cè)試。
1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件,用兩配對(duì)樣本的Wilcoxon秩和檢驗(yàn)法對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析,P<0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2.1 163例腦脊液樣本,分別用顯微鏡計(jì)數(shù)法和UF-1000i進(jìn)行檢測(cè)。兩種檢測(cè)方法結(jié)果比較:RBC無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=0.752,P=0.457),WBC無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=1.616,P=0.115),結(jié)果見表1。
2.2 批內(nèi)精密度試驗(yàn) 依據(jù)腦脊液參考值:WBC(0~8)×106/L,正常腦脊液不含RBC;儀器的線性范圍(WBC,RBC均為:0~5 000個(gè)/μL),隨機(jī)選取不同濃度的RBC或WBC重復(fù)做10次,計(jì)算CV值,UF1000i儀器法CV≤2.0%;手工法的CV:13.4%~30.5%,結(jié)果見表2。

表1 163例腦脊液標(biāo)本細(xì)胞計(jì)數(shù)兩種檢測(cè)方法結(jié)果

表2 腦脊液細(xì)胞計(jì)數(shù)儀器法和手工法重復(fù)性試驗(yàn)結(jié)果
3.1 手工法檢測(cè)腦脊液細(xì)胞可靠性評(píng)價(jià) 腦脊液常規(guī)的白細(xì)胞計(jì)數(shù)與紅細(xì)胞計(jì)數(shù)對(duì)各種中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病的診斷與治療監(jiān)測(cè)有著十分重要的臨床意義[4]。但是目前多數(shù)醫(yī)院的檢驗(yàn)科腦脊液常規(guī)細(xì)胞計(jì)數(shù),依然用的是《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》第3版推薦的改良牛鮑計(jì)數(shù)板在光學(xué)顯微鏡下計(jì)數(shù)(以下簡(jiǎn)稱手工法),并視其為“金標(biāo)準(zhǔn)”。手工法雖然已在臨床上得到了廣泛的應(yīng)用,但是該法存在著前述的諸多缺點(diǎn)。因此,探索一種簡(jiǎn)便、快速,準(zhǔn)確客觀的腦脊液常規(guī)細(xì)胞計(jì)數(shù)方法,為中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病的診斷提供科學(xué)的依據(jù)[5],已成為很多儀器公司研發(fā)的方向。
3.2 UF-1000i儀器法檢測(cè)腦脊液細(xì)胞可靠性評(píng)價(jià) UF-1000i全自動(dòng)尿沉渣分析儀利用流式細(xì)胞術(shù)和電阻抗原理用紅色半導(dǎo)體激光束照射經(jīng)過核酸熒光染色后,在鞘流貫流分析池中形成的鞘流樣本,并通過對(duì)從各粒子產(chǎn)生的前向散射光、側(cè)向散射光以及側(cè)向熒光信號(hào)轉(zhuǎn)換成的光電信號(hào)進(jìn)行分析,從而對(duì)各個(gè)粒子進(jìn)行識(shí)別[6]。識(shí)別尿液中的紅細(xì)胞、白細(xì)胞、上皮細(xì)胞和管型等顆粒。腦脊液標(biāo)本中的有形成分比尿液中的有形成分簡(jiǎn)單得多,細(xì)胞以外的干擾粒子少,而且顆??倲?shù)一般在儀器的檢測(cè)范圍內(nèi),這為UF-1000i全自動(dòng)尿沉渣分析儀準(zhǔn)確計(jì)數(shù)腦脊液中的紅細(xì)胞、白細(xì)胞提供了有利的條件[7],全自動(dòng)尿沉渣分析儀對(duì)紅細(xì)胞和白細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果較準(zhǔn)確[8]。本研究通過對(duì)163例腦脊液標(biāo)本進(jìn)行手工法和儀器法檢測(cè),從表1可以看出兩種檢測(cè)方法結(jié)果雖均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,但手工法存在人為影響因素多、重復(fù)性差、操作繁瑣等諸多缺陷。《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》第3版規(guī)定:腦脊液白細(xì)胞計(jì)數(shù)大于10×106/L必須進(jìn)行染色分類,由于儀器法檢測(cè)結(jié)果較為準(zhǔn)確,對(duì)WBC計(jì)數(shù)結(jié)果是否進(jìn)行染色分類提供了可靠的依據(jù)。表2可以看出,UF-1000i全自動(dòng)尿沉渣分析儀的重復(fù)性顯著優(yōu)于手工法,能對(duì)腦脊液中的紅細(xì)胞數(shù)、白細(xì)胞數(shù)進(jìn)行準(zhǔn)確的定量分析,為臨床診斷提供了可靠的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。但儀器法檢測(cè)成本較高、收費(fèi)較低、中小型醫(yī)院尚未普及等,也影響其在基層醫(yī)院的推廣和應(yīng)用,手工法仍有存在的必要。
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2015-11-28)