RGCC基因在胃癌組織中的表達及其意義

尚超，張佳星，陳秀秀，張家樂，黃寶俊

(1中國醫科大學附屬第一醫院，沈陽 110001；2中國醫科大學基礎醫學院)

RGCC基因在胃癌組織中的表達及其意義

尚超1，2，張佳星1，陳秀秀1，張家樂1，黃寶俊1

(1中國醫科大學附屬第一醫院，沈陽 110001；2中國醫科大學基礎醫學院)

目的 探討細胞周期調節基因(RGCC基因)在胃癌發生、發展中的作用。方法 選擇胃癌患者65例，取其保存完整的胃癌組織及配對癌旁組織標本，采用實時定量PCR法檢測RGCC mRNA相對表達量。采用單因素方差分析RGCC表達與胃癌患者臨床病理參數的關系，以胃癌組織中RGCC mRNA相對表達量的平均值為界，將患者分為高表達組和低表達組，比較兩組5年生存率。結果 胃癌組織RGCC mRNA相對表達量為2.505±0.502，癌旁組織為1.068±0.107，RGCC基因在胃癌組織中的表達明顯高于癌旁組織(P<0.01)。Borrmann Ⅲ/Ⅳ型、彌漫型生長、分化程度低、浸潤程度深、存在脈管癌栓、淋巴結分期晚的患者胃癌組織RGCC mRNA表達明顯升高(P<0.05或<0.01)，不同性別、年齡、癌灶大小及部位者胃癌組織RGCC mRNA表達均無統計學差異(P均>0.05)。高表達組5年生存率為31.0%，低表達組為64.2%，兩組比較有統計學差異(P<0.01)。結論 RGCC基因在胃癌組織中表達升高，與腫瘤的惡性生物學行為和患者預后不良有關。

胃癌；細胞周期調節基因；惡性生物學行為；預后

胃癌是我國最常見的惡性腫瘤之一，發病率居各類腫瘤之首。近年來，雖然以手術為主結合放化療的綜合治療水平不斷提高，但中晚期患者術后5年生存率僅為30%左右[1,2]。深入研究胃癌發生和發展的分子機制，尋找效果更佳、特異性更好的治療靶點是胃癌相關研究的重點。細胞周期調節基因(RGCC基因)為重要的補體應答基因，在細胞增殖分化、炎癥反應、腫瘤發生和轉移等過程中起關鍵作用，參與許多疾病的發生、發展[3～5]。本研究探討RGCC基因在胃癌發生、發展中的作用。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇2008～2009年于中國醫科大學附屬第一醫院進行手術的胃癌患者65例，男33例、女32例，年齡39～74歲、中位年齡60歲。患者臨床資料完整，術前均未接受放療和化療。本研究均獲得患者的知情同意。

1.2 胃癌組織RGCC mRNA表達檢測 采用實時定量PCR法。取患者保存完整的胃癌組織及配對癌旁組織(距腫瘤3 cm以上)標本，TRIzol法提取總RNA，逆轉錄成cDNA。以GAPDH為內參基因，按照試劑盒說明書擴增RGCC基因。RGCC引物序列：上游引物：5′-TCAACCTTCTACCAGGCCACTC-3′，下游引物：5′-GCAAGCAGGTAAACAAAGTCAG-3′，引物長度102 bp；GAPDH引物序列：上游引物：5′-AGGTCGGTGTGAACGGATTTG-3′，下游引物：5′-GGGGTCGTTGATGGCAACA-3′，引物長度95 bp。反應體系：2×Premix Ex Taq 25 μL，F/R primer(10 μmmol/L)1 μL，50×ROX Reference Dye1 1 μL，模板4 μL，加水至50 μL。反應條件：95 ℃ 30 s，95 ℃ 5 s，60 ℃ 30 s，共40個循環。每個試驗重復5次。采用7500熒光定量儀和7500 Software v2.0軟件計算RGCC mRNA相對表達量，以2-ΔΔCT表示。

1.3 胃癌組織RGCC mRNA表達與患者臨床病理參數的關系 收集患者的臨床資料，包括年齡、性別、癌灶大小、癌灶部位、Borrmann分型、生長方式、分化程度、浸潤深度、脈管癌栓及淋巴結分期情況，分析上述資料與RGCC mRNA表達的關系。

1.4 胃癌組織RGCC mRNA表達與患者預后的關系 以胃癌組織RGCC mRNA相對表達量的平均值為界，將患者分為高表達組和低表達組，計算并比較兩組5年生存率。

2 結果

2.1 胃癌與癌旁組織RGCC mRNA相對表達量比較 胃癌組織中RGCC mRNA相對表達量為2.505±0.502，癌旁組織為1.068±0.107，RGCC基因在胃癌組織中的表達明顯高于癌旁組織(P<0.01)。

2.2 胃癌組織RGCC mRNA表達與患者臨床病理參數的關系 Borrmann Ⅲ/Ⅳ型、彌漫型生長、分化程度低、浸潤程度深、存在脈管癌栓、淋巴結分期晚的患者胃癌組織中RGCC mRNA的相對表達量明顯升高(P<0.05或<0.01)，患者的性別、年齡、癌灶大小及部位對胃癌組織中RGCC mRNA的相對表達量均無影響(P均>0.05)。見表1。

表1 胃癌組織RGCC mRNA表達與患者臨床病理參數的關系

2.3 胃癌組織中RGCC mRNA表達與患者預后的關系 以胃癌組織中RGCC mRNA相對表達量的平均值2.505為界，高表達組39例，5年生存率為31.0%；低表達組26例，5年生存率為64.2%，低表達組生存率明顯高于高表達組(P<0.01)。

3 討論

RGCC基因是一種重要的補體應答基因，又名C13orf15、補體應答基因32(RGC32)，定位于人染色體13q14.11[6]。RGCC基因在多種組織中廣泛表達，具有調控細胞周期、促進細胞增殖分化及調節免疫反應等作用[7，8]。近期研究報道，RGCC基因在多種惡性腫瘤中呈高表達，包括結直腸癌、胰腺癌等，可能參與調節腫瘤細胞的增殖和侵襲等，從而發揮癌基因的作用[9，10]。

本研究結果顯示，RGCC mRNA在胃癌組織中的表達明顯高于癌旁組織；Borrmann Ⅲ/Ⅳ型、彌漫型生長、分化程度低、浸潤程度深、存在脈管癌栓、淋巴結分期晚的患者胃癌組織中RGCC mRNA表達明顯升高，不同性別、年齡、癌灶大小及部位者癌組織中RGCC mRNA表達無統計學差異，說明RGCC mRNA高表達與腫瘤的惡性生物學行為有關。夏祥偉等[11]應用免疫組化方法檢測RGCC蛋白在胃癌組織中的表達，亦得出RGCC在胃癌組織中高表達的結論，且其表達與胃癌分化程度、TNM分期和淋巴結轉移有關。付尚志等[12]在結腸癌研究中亦發現類似現象。本研究結果顯示，RGCC低表達的患者生存率明顯高于高表達者，說明RGCC能夠作為胃癌患者預后不良的生物學標志物之一。

綜上所述，RGCC基因在胃癌組織中表達升高，可促進胃癌的發生及發展，與腫瘤的惡性生物學行為和患者預后不良密切相關。RGCC基因可作為胃癌生物治療的新靶點，但是其具體作用機制尚不清楚，仍需進一步深入研究。

[1] Inokuchi M, Otsuki S, Fujimori Y, et al. Clinical significance of MET in gastric cancer [J]. World J Gastrointest Oncol, 2015,7(11):317-327.

[2] 朱正剛.胃癌復發、轉移診治難點與對策[J].中國實用外科雜志,2015,35(10):1037-1039.

[3] Cui XB, Luan JN, Ye J, et al. RGC32 deficiency protects against high-fat diet-induced obesity and insulin resistance in mice[J]. J Endocrinol, 2015,224(2):127-137.

[4] Tegla CA, Cudrici CD, Azimzadeh P, et al. Dual role of response gene to complement-32 in multiple sclerosis [J]. Exp Mol Pathol, 2013,94(1):17-28.

[5] Feik E, Schweifer N, Baierl A, et al. Integrative analysis of prostate cancer aggressiveness[J]. Prostate, 2013,73(13):1413-1426.

[6] Vlaicu SI, Cudrici C, Ito T, et al. Role of response gene to complement 32 in diseases[J]. Arch Immunol Ther Exp (Warsz), 2008,56(2):115-122.

[7] Wang QJ, Song BF, Zhang YH, et al. Expression of RGC32 in human normal and preeclamptic placentas and its role in trophoblast cell invasion and migration[J]. Placenta, 2015,36(4):350-356.

[8] Vlaicu SI, Tegla CA, Cudrici CD, et al. Role of C5b-9 complement complex and response gene to complement-32 (RGC-32) in cancer[J]. Immunol Res, 2013,56(1):109-121.

[9] Lu Y, Hu XB. C5a stimulates the proliferation of breast cancer cells via Akt-dependent RGC-32 gene activation[J]. Oncol Rep, 2014,32(6):2817-2823.

[10] Vlaicu SI, Tegla CA, Cudrici CD, et al. Epigenetic modifications induced by RGC-32 in colon cancer[J]. Exp Mol Pathol, 2010,88(1):67-76.

[11] 夏祥偉,茅國新.RGC-32和ZEB1在胃癌組織中的表達[J].腫瘤基礎與臨床,2015,28(3):193-197.

[12] 付尚志,張佳節,李萬平.直腸癌術前新輔助放化療研究進展[J].臨床軍醫雜志,2015,43(4):409-412.

國家自然科學基金資助項目(81272716)；遼寧省社會發展攻關計劃(2012225016)。

黃寶俊(E-mail： huang_bj@163.com)

10.3969/j.issn.1002-266X.2016.16.029

R735.2

B

1002-266X(2016)16-0077-03

2016-01-02)