試管血與血袋導(dǎo)管血檢測(cè)HBsAg結(jié)果的比較分析

熊麗紅，莊養(yǎng)林，楊莉娜(江西省血液中心檢驗(yàn)科，江西南昌330046)

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試管血與血袋導(dǎo)管血檢測(cè)HBsAg結(jié)果的比較分析

熊麗紅，莊養(yǎng)林，楊莉娜
(江西省血液中心檢驗(yàn)科，江西南昌330046)

摘要:目的探討HBsAg酶聯(lián)免疫試劑檢測(cè)試管血和導(dǎo)管血S/CO的差異性。方法廈門新創(chuàng)HBsAg ELISA試劑檢測(cè)2015年1月1日至2015年4月30日無(wú)償獻(xiàn)血者標(biāo)本17967例，對(duì)初次反應(yīng)性標(biāo)本用原試管和血袋導(dǎo)管血分別進(jìn)行雙孔復(fù)試。結(jié)果檢測(cè)17967例標(biāo)本，共檢測(cè)陽(yáng)性標(biāo)本143例，陽(yáng)性率為0.8%。試管血與導(dǎo)管血S/CO≥28有56例，10≤S/CO＜28間的有40例，1.5≤S/CO＜10的有36例，0.8≤S/CO＜1.5的有11例。采用T檢驗(yàn)，10≤S/CO＜28間的40例和1.5≤S/CO＜10的36例，0.8≤S/CO＜1.5的11例，導(dǎo)管血S/CO均明顯低于試管血。結(jié)論除強(qiáng)陽(yáng)性標(biāo)本外，導(dǎo)管血S/CO明顯低于試管血，為保證血液結(jié)果的準(zhǔn)確性，對(duì)初次反應(yīng)性處于灰區(qū)的標(biāo)本不適于單獨(dú)使用導(dǎo)管血進(jìn)行復(fù)查。

關(guān)鍵詞：試管血；導(dǎo)管血；HBsAg；S/CO

血站技術(shù)操作規(guī)程對(duì)初次試驗(yàn)有反應(yīng)性檢測(cè)標(biāo)本的后續(xù)處理方案1為以同一試驗(yàn)對(duì)原血樣（或從血袋導(dǎo)管重新取樣）做雙孔復(fù)試。本中心目前對(duì)初次反應(yīng)性標(biāo)本的后續(xù)處理方案為同時(shí)對(duì)原血樣和從血袋導(dǎo)管重新取樣分別雙孔復(fù)試，經(jīng)觀察血袋導(dǎo)管血S/CO明顯比原血樣低，現(xiàn)就兩種血樣的檢測(cè)結(jié)果報(bào)告如下。

1　材料與方法

1.1材料2015年1月1日至2015年4月30日本中心無(wú)償獻(xiàn)血者血液標(biāo)本17967例，采用EDTA-Na2抗凝。采血人員在采集血液前進(jìn)行旁路放血，酶免試管采集5ml血液樣本；初次反應(yīng)性標(biāo)本由檢驗(yàn)科工作人員至待檢庫(kù)從血袋導(dǎo)管取樣；對(duì)原試管和血袋導(dǎo)管血分別進(jìn)行雙孔復(fù)試。

1.2儀器與試劑采用STAR全自動(dòng)加樣系統(tǒng)和FAME全自動(dòng)酶聯(lián)檢測(cè)系統(tǒng)(瑞士Hamilton公司)；HBsAg酶免試劑采用廈門英科新創(chuàng)科技有限公司試劑盒。

1.3方法17967例標(biāo)本首先采用廈門新創(chuàng)公司酶免試劑進(jìn)行HBsAg檢測(cè)，對(duì)初次試驗(yàn)有反應(yīng)性的標(biāo)本剪取血袋導(dǎo)管血，用同種試劑對(duì)原血樣和血袋導(dǎo)管血分別進(jìn)行雙孔復(fù)試。有反應(yīng)性判斷標(biāo)準(zhǔn)：S/CO≥0.8。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理用EXCEL對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，采用T檢驗(yàn)（原血樣與導(dǎo)管血均取雙孔平均S/ CO值），P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1檢測(cè)17967例標(biāo)本，共檢測(cè)陽(yáng)性標(biāo)本143例，陽(yáng)性率為0.8%。試管血與導(dǎo)管血S/CO≥28有56例，10≤S/CO＜28間的有40例，1.5≤S/CO＜10的有36例，0.8≤S/CO＜1.5的有11例。

2.2 10≤S/CO＜28間的有40例，1.5≤S/CO＜10的有36例，0.8≤S/CO＜1.5的有11例標(biāo)本具體結(jié)果見(jiàn)表1，三組間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。

表1　具體結(jié)果（±s）

表1　具體結(jié)果（±s）

組別10≤S/CO值＜28 1.5≤S/CO值＜10 0.8≤S/CO值＜1.5 n 40 36 11試管血　　導(dǎo)管血　P 20.0±5.20 4.29±2.13 1.09±0.19 18.8±4.83 3.72±2.05 0.95±0.16 2.71×10-60.0007 0.0016

2.3室內(nèi)質(zhì)控每次檢測(cè)均做陰性室內(nèi)質(zhì)控和弱陽(yáng)性質(zhì)控各一孔，均為北京康徹斯坦生物制品有限公司生產(chǎn)。陰性室內(nèi)質(zhì)控檢測(cè)結(jié)果均為陰性。弱陽(yáng)性質(zhì)控品濃度為0.2IU/ml，±s（S/CO）為2.41±0.21。

3　討論

HBsAg的檢測(cè)是臨床診斷乙肝病毒感染的重要手段，也是獻(xiàn)血員篩選的項(xiàng)目之一，結(jié)果的準(zhǔn)確性對(duì)于臨床診斷及輸血安全有舉足輕重的影響。近年來(lái)隨著HBsAg各種檢測(cè)方法的使用，同一份標(biāo)本在不同實(shí)驗(yàn)室或采用不同的試劑盒有時(shí)會(huì)得出不一致的結(jié)果，出現(xiàn)假陰性或假陽(yáng)性[1，2]，導(dǎo)致同一患者檢查結(jié)果的混亂，給臨床帶來(lái)困擾，也給醫(yī)患糾紛和輸血安全帶來(lái)一定的隱患，如何保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性至關(guān)重要。本研究針對(duì)獻(xiàn)血員檢測(cè)HBsAg有反應(yīng)性標(biāo)本復(fù)查模式進(jìn)行探討，顯示除強(qiáng)陽(yáng)性標(biāo)本外，血袋導(dǎo)管血檢測(cè)HBsAg的S/CO值明顯低于試管血S/CO值。

血袋CPD保養(yǎng)液能導(dǎo)致HBsAg檢測(cè)S/CO值降低[3－10]，本中心試管血通過(guò)血袋旁路放血，均為血袋血液采集前就進(jìn)行試管血的采集，試管血不會(huì)有血袋保養(yǎng)液稀釋的現(xiàn)象。血袋采集過(guò)程中血袋要均勻搖動(dòng)，使采集的血液與血袋保養(yǎng)液充分混勻。血液采集完成后，近端血袋導(dǎo)管中可能稍有保養(yǎng)液沖入，保養(yǎng)液可能會(huì)對(duì)導(dǎo)管血有稀釋作用，影響檢測(cè)HBsAg的S/CO值，但血袋導(dǎo)管一端封閉，遠(yuǎn)端導(dǎo)管血不可能與血袋中血液充分混勻，留取復(fù)查導(dǎo)管血無(wú)或僅微量保養(yǎng)液，影響作用不會(huì)過(guò)大。

初步認(rèn)為，導(dǎo)致HBsAg導(dǎo)管血檢測(cè)HBsAg的S/CO值明顯低于試管血S/CO值另一原因可能為脂蛋白黏附特性決定。HBsAg抗原活性屬于高浮力密度范圍內(nèi)的脂蛋白類。用CsCl密度梯度離心，表面抗原（小顆粒和管狀顆粒）平均密度為1.20g/ cm2.Dane顆粒的密度略高，為1.25g/cm2。純化的22nm顆粒的平均沉降系數(shù)為33～54S，分子量約為2.4～2.5×106。純化的HBsAg含有類脂質(zhì)、糖類、脂質(zhì)、蛋白質(zhì)及糖蛋白。血液采集完后，血袋靜置于冰箱，有利于HBsAg黏附與血袋導(dǎo)管壁上，導(dǎo)致導(dǎo)管血S/CO值明顯低于試管血S/CO值。

鑒于血袋導(dǎo)管血檢測(cè)HBsAg的S/CO值明顯低于試管血S/CO值，復(fù)查弱陽(yáng)性標(biāo)本可能試管血與導(dǎo)管血結(jié)果不一致，認(rèn)為對(duì)HBsAg初次反應(yīng)性處于灰區(qū)的標(biāo)本復(fù)查模式不適于單獨(dú)使用導(dǎo)管血復(fù)查，可能導(dǎo)致弱陽(yáng)性標(biāo)本的漏檢。血袋導(dǎo)管血檢測(cè)HBsAg的S/CO值偏低原因有待進(jìn)一步研究。

參考文獻(xiàn)

[1]譚立明．ELISA法檢測(cè)的影響因素及其對(duì)策[J]．實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2013，31(4)：300－305．

[2]胡越，蔣瑞馨，邵家幼．兩種酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)乙肝表面抗原的結(jié)果比較[J].實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2012，30(3)：269－270．

[3]張根倉(cāng)，張明霞，趙黎娟，等．血液保養(yǎng)液與肝素抗凝劑對(duì)HBsAg ELISA檢測(cè)結(jié)果的影響[J]．臨床輸血與檢驗(yàn)，2010，12(4)：45－47．[4]李鵬程，郭如華，溫麗玲，等．血液保養(yǎng)液對(duì)ELISA檢測(cè)HBsAg結(jié)果的影響及改進(jìn)措施[J]．臨床輸血與檢驗(yàn)，2009，11(1)：45－47．[5]溫麗玲，郭如華，余晉林，等.血液保存液對(duì)血液篩查ELISA4項(xiàng)檢測(cè)和速率法ALT檢測(cè)的影響及改進(jìn)措施的探討[J].中國(guó)輸血雜志，2011，4(1)：47－48.

[6]李麗平，彭小華，湯明.兩種抗凝劑對(duì)血液免疫項(xiàng)目ELISA法檢測(cè)結(jié)果的影響[J].中華臨床醫(yī)學(xué)雜志，2008，11(11)：56－57.

[7]金一鳴，俞彥，曹誼，等.血液篩查中陽(yáng)性樣本與其血辮的符合性研究[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2012，33(15)：1907－1908.

[8]孫立平.兩種抗凝劑對(duì)血液4項(xiàng)指標(biāo)ELISA檢測(cè)結(jié)果干擾的分析[J].中國(guó)輸血雜志，2006，19(4)：290－292.

[9]門守山.血袋內(nèi)抗凝血液標(biāo)本對(duì)ELISA法檢測(cè)HBsAg結(jié)果的影響[J].臨床輸血與檢驗(yàn)，2006，4(4)：307－309.

[10]陳秀敏，郭風(fēng)濤. EDTA－K2和肝素鈉抗凝劑對(duì)HBsAg ELISA法檢測(cè)結(jié)果影響的分析[J].中國(guó)傷殘醫(yī)學(xué)，2014，20(20)：137－138.

·輸血與檢驗(yàn)·

(收稿日期2015－09－08；修回日期2016－02－15)

DOI：10.3969/j.issn.1674-1129.2016.02.046

中圖分類號(hào)：R457.1+2，R512.6+2

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1674-1129(2016)02-0251-02