劉晶 王大勇
摘要:本文是對興安杜鵑的愈傷組織培養進行了初步研究。本實驗選擇MS基本分化培養基,經過數據的整理與分析找到適合興安杜鵑生長的最佳培養基。結果表明:外植體消毒6分鐘為最佳時間,最佳啟動生長培養基為MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.1mg/L,接種苗生長正常,能產生分化。最佳增殖培養基為MS+6-BA 1.5mg/L+NAA 0.1mg/L,形成部分愈傷組織。
關鍵詞:興安杜鵑;組織培養
中圖分類號: S685.21 文獻標識碼: A DOI編號: 10.14025/j.cnki.jlny.2016.11.024
目前關于興安杜鵑人工繁殖方面的研究報道較少,如果能成功的培育出大量的興安杜鵑,將豐富國內園林植物的類型,解決純正的優質杜鵑種苗在我國苗木市場上短缺的問題。
1研究地點
1.1 原料的取材地點和時間
4月中旬,對興安杜鵑進行取材。選取4月份剛長出的生長良好、無病蟲害、生長狀況相近的嫩枝進行水培1~2周作為原材料。
1.2 進行組織培養工作的地點
在實驗室里,按照一定的步驟和方法對興安杜鵑進行組織培養。
2研究方法
在實驗中采用的基本分化培養基為MS培養基,細胞分裂素選擇6-BA,生長素選擇NAA,首先準備1個不加任何植物激素的空白實驗用以對照,再以不同濃度的6-BA和NAA分別配成5組濃度組合,每個組合再以不同的外植體消毒時間再分成3組,消毒4分鐘、5分鐘和6分鐘的接種瓶數均為20瓶。接種完后放在培養室中培養,以7天為一個單位,每隔7天觀察一次,查看并記錄興安杜鵑接種苗在培養基上的長勢情況。最后通過數據的整理與分析比較,在15組培養基中,篩選出分化培養基中最佳植物激素濃度配比和最佳消毒時間。
2.1 數據的處理
觀察外植體在不同消毒時間與植物激素不同濃度配比的培養基中的分化狀態,其數據如下表:
由表1,2,3中記錄的數據可以計算出分別消毒了4分鐘,5分鐘,6分鐘的興安杜鵑葉芽在不同植物激素濃度配比的培養基中的污染程度、分化程度、生長狀態等情況。污染率=。
2.2興安杜鵑的增殖培養
將培養出的興安杜鵑無菌苗進行增殖培養,1~5組培養基分別為MS+6-BA 0.1mg/L+NAA 0.1mg/L;MS+6-BA 0.5mg/L
+NAA 0.1mg/L;MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.1mg/L;MS+6-BA 1.5mg/L+NAA 0.1mg/L;MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.1mg/L。將無菌苗嚴格按照無菌操作接種到增殖培養基上,增殖情況見表4。
通過以7天為一個周期,共進行為期30天的觀察,挑選出已染菌的接種苗,并及時對接種苗的生長狀態、分化狀態、是否褐化等狀態進行詳細的記錄并拍照,歸納并整理數據,得出相應的結論并對得到的結論進行合理的分析。
3 主要結果
3.1 最佳植物激素的不同濃度配比
由表5中所記錄的數據進行整理歸納與分析,并通過對接
種苗生長、分化狀態的觀察與對比分析,得到以下結果:長勢最好的是MS+6-BA 2.0mg/L+NAA0.1mg/L ;其次是MS+6-BA
1.5mg/L+NAA 0.1mg/L,長勢最不好的是MS+6-BA 0.5mg/L
+NAA0.1mg/L 。
3.2結論
通過實驗和對實驗數據整理與分析,結果表明:外植體消毒6分鐘,MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.1mg/L的為最佳培養基,接種苗生長正常,形成少量的愈傷組織;培養基MS+6-BA 0.5mg/L+NAA 0.1mg/L的組合效果最差,接種苗幾乎全部慢慢褐化死亡。
作者簡介:劉晶,本科學歷,乾安縣森防站,工程師,研究方向:森林病蟲害防治。