腺性膀胱炎大鼠模型建立的實驗研究

蔡蔚　謝海平　龍蠡　謝曉　楊華偉

[摘要] 目的 探究雌性大鼠腺性膀胱炎模型制備方法。 方法 選取雌性大鼠50只，其中42只建立腺型膀胱炎動物模型，隨機分為大腸埃希菌灌注組（34只）、生理鹽水灌注組（8只），另外8只不做任何處理，作為空白對照組。同等條件飼養下，50 d后處死各組大鼠，切取膀胱標本進行病理學檢查。 結果 3組大鼠在體重變化及死亡率的比較上，差異無統計學意義（P>0.05）；大腸埃希菌組33例大鼠感染腺性膀胱炎，感染率97.0%，與空白組和生理鹽水組相比差異有統計學意義（P<0.05）；大腸埃希菌組大鼠膀胱標本常規病理切片、透射電鏡均證實為腺性膀胱炎。 結論 大鼠膀胱灌注大腸埃希菌可導致腺性膀胱炎，其病理表現與人類腺性膀胱炎具有相似性，可據此制作腺性膀胱炎動物模型。

[關鍵詞] 腺性膀胱炎；動物模型；大鼠

[中圖分類號] R277.5 [文獻標識碼] A [文章編號] 1674-0742（2016）02（b）-0027-03

[Abstract] Objective To explore the establishment method of female rat models of cystitis glandularis. Methods 50 female rats were selected， and 42 of them were selected for the establishment of rat models of cystitis glandularis. The rats were randomly divided into three groups， Escherichia coli perfusion group （34 rats）， the normal saline group （8 rats）， and the other 8 rats were treated as blank control group. Under the same conditions of feeding， the rats were sacrificed at 50 days， and the bladder specimens were taken for pathological examination. Results There was no statistically significant difference in the changes of body weight and mortality between the three groups （P>0.05）. The 33 rats in the Escherichia coli perfusion group were infected with cystitis glandularis， the infection rate was 97.0%， compared with the blank control group and the normal saline group， the difference was statistically significant （P<0.05）. The Escherichia coli group were confirmed with cystitis glandularis by the conventional pathological examination and transmission electron microscope of the bladder specimens. Conclusion Instillation of Escherichia coli in the bladder in rats can cause cystitis glandularis， and the pathological manifestations are similar to those of the cystitis glandularis in people， in accordance with this， the animal models of cystitis glandularis can be made.

[Key words] Cystitis glandularis； Animal model； Rat

腺性膀胱炎是一種在膀胱粘膜和粘膜下層發生粘液腺增生的疾病，已成為泌尿外科常見疾病之一[1-2]。因其臨床表現不典型，易被誤診，甚至漏診。在腺性膀胱炎的病因及生物學行為仍未完全明確的情況下，通過創建動物模型研究腺性膀胱炎的發病機制具有可行性。因此，該研究選擇50雌性大鼠進行腺性膀胱炎大鼠的造模研究，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

成年雌性健康SD大鼠50只，由湖南中醫藥大學醫學院實驗動物學部提供許可證，分籠飼養，自由飲水；完全隨機分為3組：空白對照組（8只）、生理鹽水灌注組（8只）和大腸埃希菌灌注組（34只）。各組大鼠實驗開始時體重差異無統計學意義（P>0.05），見表1。

1.2 實驗過程

大腸埃希菌灌注組大鼠：膀胱灌注DH5α大腸桿菌溶液（108-9CFU/100UL） 由湖南中醫藥大學第一附屬醫院檢驗科提供），間隔1 d灌注1次，共20次；生理鹽水灌注組：膀胱灌注生理鹽水，間隔1 d灌注1次，共20次；空白對照組：不予灌注，相同條件，自由飼養。50 d后處死各組大鼠，切取膀胱標本分別置于100倍、200倍、400倍顯微鏡下觀察膀胱黏膜固有層是否有炎性細胞浸潤、腺體樣結構、囊腔和Brunn巢結構[3-4]。取膀胱標本于FEI Tecnai G2 Spirit透射電鏡觀察是否有炎性細胞浸潤，黏膜層及肌層是否有異常表現。

1.3 統計方法

數據采用SPSS 17.0軟件統計分析，計量資料用均數±標準差（x±s）表示，并采用F檢驗，計數資料采用百分比較（%）表示，采用χ2檢驗，以 P <0.05 為差異有統計學意義。

2 實驗結果

2.1 造模結束時大鼠體重與死亡率比較

實驗結束時，各組大鼠體重差異無統計學意義（P>0.05）；各組大鼠死亡率亦差異無統計學意義（P>0.05），見表2、表3。

2.2 常規病理切片

①空白組老鼠膀胱黏膜上皮正常；②生理鹽水組老鼠膀胱黏膜上皮層變薄，基底層空泡樣變；③大腸埃希菌灌注組老鼠膀胱黏膜固有層有炎性細胞浸潤、部分基底層有空泡樣變。

2.3 透射電鏡結果

大腸埃希菌灌注組可見黏膜層有炎性細胞浸潤，部分黏膜缺失，黏膜出現分層，間質可見Bruun巢，移行上皮退行性變。空白組及生理鹽水組均未見異常表現。

2.4 各組間大鼠存在腺性膀胱炎感染的比例

大腸埃希菌灌注組感染腺性膀胱炎的比例多于空白組、生理鹽水組，差異有統計學意義（P<0.05）；空白組與生理鹽水組之間無明顯區別，差異無統計學意義（P>0.05）。見表4。

3 討論

腺性膀胱炎患者多數有膀胱內感染，尤其是大腸埃希菌等革蘭陰性菌感染與腺性膀胱炎關系更為密切，膀胱移行細胞長期受到炎癥刺激后黏膜固有層增生并被結締組織包繞、分割，形成Brunn巢[5]，巢中心的細胞可變形退化為囊腔，隨著病情的發展，腔內的柱狀上皮細胞形成腺體樣結構[6-7]。

通過該實驗建立腺性膀胱炎大鼠模型，結果顯示大腸埃希菌組32例大鼠全部感染腺性膀胱炎，感染率100%，在病理檢查及透射電鏡下，大腸埃希菌灌注組活的大鼠膀胱黏膜均不同程度出現炎性細胞浸潤、腺體樣結構、囊腔和Brunn巢結構，生理鹽水組及對照組均未觀察到，組間差異比較有統計學意義（P<0.05），說明生理鹽水不是腺性膀胱炎的感染因素，從而證明膀胱內灌注大腸埃希菌能夠導致腺性膀胱炎，這與國內學者易憧等[8]的研究結果相一致。目前腺性膀胱炎的病因及生物學行為尚未完全明確，該研究為腺性膀胱炎的膀胱灌注治療提供了實驗參考。

該模型的成功構建為腺性膀胱炎的病因預防起到指導性作用，模型操作過程中進行膀胱灌注時，進入尿道路徑短，只需1～1.5 cm，大鼠抗拒性不強，造模成功率97.0%。通過此次實驗，為批量制作人類腺性膀胱炎病理特點類似的動物模型提供了一種簡單、可行性極高的實驗方法。

[參考文獻]

[1] 趙玉迪.腺性膀胱炎的診斷與治療[J].中國實用醫藥，2015，10（3）：167-168.

[2] 任小剛，江少波，鄔賢德，等.腺性膀胱炎治療進展[J].中國中西結合外科雜志，2014，2（1）：100-101.

[3] 易憬，熊飛，蘇良平，等.SD大鼠腺性膀胱炎動物模型的建立[J].臨床外科雜志，2008，16（8）：553-554.

[4] 楊勇.如何正確認識腺性膀胱炎[J].中華泌尿外科雜志，2013，34（3）：165-166.

[5] 劉哲，楊東紅，王斌.腺性膀胱炎組織病理學特點的探討[J].湖南中醫藥大學學報，2009，29（10）：62-65.

[6] 朱建強，王永傳，盧洪凱，等.腺性膀胱炎的再認識[J].醫學綜述，2013，19（3）：493-496.

[7] 逄城，馬洪順，劉光明. 腺性膀胱炎的診斷與治療[J].山東醫藥，2014， 54（12）： 77-79.

[8] 易憬， 熊飛， 蘇良平，等. SD大鼠腺性膀胱炎動物模型的建立[J].臨床外科雜志， 2008， 16（8）：553-554.

（收稿日期：2015-11-09）