大株紅景天化學成分的研究

趙娜，趙國華，王仁久，曹明光，吳海波，柴雅晴，唐生安，段宏泉，3

（1.天津醫科大學藥學院，天津市臨床藥物關鍵技術重點實驗室，天津300070;2.通化玉圣藥業股份有限公司，通化134000；3.天津醫科大學基礎醫學研究中心，天津 300070）

論著

大株紅景天化學成分的研究

趙娜1，趙國華2，王仁久2，曹明光2，吳海波2，柴雅晴1，唐生安1，段宏泉1，3

（1.天津醫科大學藥學院，天津市臨床藥物關鍵技術重點實驗室，天津300070;2.通化玉圣藥業股份有限公司，通化134000；3.天津醫科大學基礎醫學研究中心，天津 300070）

目的：對四川產大株紅景天的化學成分進行分離鑒定。方法：采用硅膠柱色譜、凝膠柱色譜和HPLC制備色譜等方法分離純化得到單體化合物，采用有機波譜方法鑒定化合物結構。結果：從大株紅景天萃取物中分離得到10個化合物，分別鑒定為lotaustralin（1）、仲丁基葡萄糖苷（2）、沒食子酸（3）、3-甲氧基沒食子酸（4）、沒食子酸甲酯（5）、3-羥基-4-甲氧基苯甲酸（6）、苯甲醇（7）、阿魏酸（8）、對羥基肉桂酸（9）、棉黃素-7-O-（3″-O-β-D-葡萄糖基）-α-L-鼠李糖苷（10）。結論：化合物2、6為首次從該屬植物中分離得到，化合物1、5、8、9、10為首次從該種植物中分離得到。

紅景天屬；大株紅景天；化學成分；結構鑒定

大株紅景天（Rhodiola wallichiana）為景天科紅景天屬植物，全名大株粗莖紅景天[1]，2000多年前的《神農本草經》和唐代的《千金翼方》及明代的《本草綱目》均有記載。大株紅景天分布于西藏、四川及云南等地。紅景天享有“高原人參”、“北極玫瑰”之美稱，具有適應原作用，包括保護心臟、神經，抗疲勞，抗衰老，抗輻射，調節生理機能，延長壽命，被廣泛應用于醫療、保健品、化妝品等領域[2-4]。紅景天中含糖苷類、香豆素類、黃酮類、揮發油、生物堿、甾體、苯酚類化合物以及有機酸（沒食子酸、草酸、檸檬酸、蘋果酸、琥珀酸）和微量無機元素等[5-6]。本文以天然藥物化學研究手段，對大株紅景天進行了提取分離，采用硅膠柱色譜、凝膠柱色譜和制備型HPLC等色譜方法分離純化得到單體化合物，采用1D NMR、2D NMR、MS等有機波譜方法以及與文獻報道數據進行對比鑒定化合物結構。

1 儀器與方法

1.1 儀器、試劑及材料 核磁共振儀：Bruker AV 400 instrument（TMS內標）；液質聯用色譜儀：Alliance2695，Quattro Micro TM ESI(Waters)；半制備高效液相色譜儀：日本分光公司(JASCO)，PU-2089（泵），RI-2031和UV-2075（檢測器）；制備HPLC色譜柱：C-18反相柱：YMC-Pack ODS-A SH-343-5（20 mm×250 mm），GPC（凝膠滲透色譜柱）：Shodex, Asahipak GS-20G（20 mm×500 mm×2）；凝膠柱色譜：Toyopearl HW-40C(Tosoh)；氘代試劑（ALDRICH公司）；柱色譜和薄層色譜用硅膠均系青島海洋化工廠生產，所用試劑均系分析純。

本文所用藥材大株紅景天[Rhodiola wallichiana（HK）S H Fu var Cholaensis（Praeg）S H Fu]于2012年9月采自四川省阿壩州，由天津醫科大學藥學院生藥學教研室周曄教授鑒定，標本（D20130610）存放于天津醫科大學藥學院。

1.2 提取分離 取自然干燥的大株紅景天根莖14 kg，粉碎后用75%的乙醇回流提取3次，每次2 h。提取液減壓濃縮，得浸膏1 530.3 g，浸膏加水混懸后，分別用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取3次，每次3.5 L，合并萃取液，減壓濃縮得石油醚提取物26.5 g，乙酸乙酯提取物175.7 g，正丁醇提取物281.5 g。

取乙酸乙酯萃取物（175.7 g）經硅膠柱色譜（800 g,300～400目）分離，石油醚-乙酸乙酯-甲醇梯度洗脫（石油醚-乙酸乙酯，6∶1，4∶1，3∶1，2∶1，含5%甲醇的乙酸乙酯，10%甲醇的乙酸乙酯，20%甲醇的乙酸乙酯，甲醇），TLC檢測合并類似部分，得到8個組分（Fr.1～8）。Fr.4經凝膠Toyopearl HW-40C柱色譜（35×1 200 mm，二氯甲烷-甲醇，v/v，2∶1）洗脫分離，得到5個組分（Fr.4.1～4.5），組分Fr.4.5經制備HPLC（ODS-A，5 μm，20×250 mm，甲醇-水，v/v，7:3)純化得到化合物4(33.6 mg)。Fr.5經硅膠柱色譜分離，二氯甲烷-甲醇梯度洗脫（v/v,97:3，95∶5，9∶1，85∶15+1‰冰醋酸）得到6個組分（Fr.5.1～5.6），其中 Fr.5.3經凝膠 Toyopearl HW-40C柱色譜（35×1 200 mm，二氯甲烷-甲醇，v/v，2∶1）洗脫分離，得到5個組分（Fr.5.3.1～5.3.5）。Fr.5.3.3進一步以制備HPLC（ODS-A，5 μm，20×250 mm，甲醇-水，v/v，6∶4）純化得到化合物6（49.5 mg）和化合物8（158.5 mg）。Fr.5.3.4經凝膠滲透HPLC（GPC，20×500 mm×2，甲醇）純化，得到化合物9（24.2mg）。Fr.6經凝膠ToyopearlHW-40C柱色譜（35×1200mm，二氯甲烷-甲醇，v/v，2∶1）洗脫分離，得到3個組分（Fr.6.1～6.3），組分Fr.6.1進一步以凝膠滲透HPLC（GPC，20×500 mm×2，甲醇）純化，得到化合物2（30.4mg）。組分Fr.6.3經制備HPLC（ODS-A,5 μm, 20×250 mm，甲醇-水，v/v，7∶3）純化得到化合物7（27.2 mg）。組分Fr.7經硅膠柱色譜分離，二氯甲烷-甲醇（v/v，9∶1，85∶15，7∶3，6∶4）梯度洗脫，分離得到7個組分（Fr.7.1～7.7），其中Fr.7.3經凝膠Toyopearl HW-40C柱色譜（35×1200mm，二氯甲烷-甲醇，v/v，1∶1）分離得到7個組分（Fr.7.3.1～7.3.7）。Fr.7.3.3進一步以制備HPLC（ODS-A，5 μm，20×250 mm，甲醇-水，v/v，3∶7）分離得化合物1（27.8 mg）。Fr. 7.3.6進一步經凝膠 Toyopearl HW-40C柱色譜（35×1 200 mm，二氯甲烷-甲醇，v/v，1∶1）分離得到化合物3（150.5 mg）。

取正丁醇萃取物（281.5 g）經硅膠柱色譜（800 g，300～400目）分離，二氯甲烷-甲醇梯度洗脫（95∶5， 9∶1，85∶15，8∶2），二氯甲烷-甲醇-水（75∶25∶0.2，65∶35∶0.3）和甲醇梯度洗脫，所得組分經聚酰胺色譜柱，凝膠滲透柱色譜Toyopeal HW-40及制備高效液相色譜柱分離純化，分別得到化合物5（20.5mg）和10（25.5mg）。

2 結果

從大株紅景天R.wallichiana提取物中分離得到10個化合物，見圖1。

圖1 從大株紅景天中分離得到的化合物Fig 1 Compounds 1～10 isolated from R.wallichiana

2.1 化合物1 lotaustralin，為白色固體粉末。ESIMS m/z:262[M+H]+。1H-NMR（DMSO-d6，400 MHz）δ：1.90（1H，m，H-3a），1.81（1H，m，H-3b），0.98（3H，t，J=7.6 Hz，H-4），1.55（3H，s，J=7.6 Hz，H-5），4.77（1H，J=7.8 Hz，H-1′），2.9-3.7（6H，糖）；13C-NMR（DMSO-d6，100 MHz）δ：120.6（C-1），75.5（C-2），32.8（C-3），8.4（C-4），23.9（C-5），99.3（C-1′），73.1（C-2′），76.9（C-3′），69.7（C-4′），76.9（C-5′），60.8（C-6′）。

2.2 化合物2 仲丁基葡萄糖苷，為白色固體粉末。ESI-MS m/z：237［M+H］+。1H-NMR（DMSO-d6，400 MHz）δ：0.87（3H，J=7.4Hz，H-4），1.13（3H，J=6.0 Hz，H-1），1.44（2H，m，H-3），3.65（1H，H-2），4.16（1H，J=7.6 Hz，H-1′）。13C-NMR（DMSO-d6，100 MHz）δ：21.0（C-1），9.3（C-4），28.5（C-3），75.8（C-2），102.3（C-1′），70.1（C-2′），76.8（C-3′），73.6（C-4′），76.6（C-5′），61.1（C-6′）。

2.3 化合物3 沒食子酸，為白色固體粉末。ESIMS m/z:171[M+H］+。1H-NMR（DMSO-d6，400 MHz）δ：7.05（2H，s，H-2，6）；13C-NMR（DMSO-d6，100 MHz）δ：123.6（C-1），110.3（C-2，6），146.3（C－3，5），139．0（C－4），71．6（－COOH）。

2.4 化合物4 3-甲氧基沒食子酸，為白色固體粉末。ESI－MS m/z：185［M＋H］＋。1H－NMR（DMSO－d6，400 MHz）δ：7．02（1H，d，J＝2．4 Hz），7．07（1H，d，J＝2．4 Hz），3．7（3H，s，－OCH3）；13C－NMR（CD3OD，100 MHz）δ：123．7（C－1），104．8（C－2），147．7（C－3），138．3（C－4），145．2（C－5），111．1（C－6），55．7（－OCH3），168．9（－COOH）。

2.5 化合物5 沒食子酸甲酯，為白色固體粉末。ESI-MS m/z:185[M+H]+。1H-NMR（DMSO－d6，400 MHz）δ：6．95（2H，s，H－2，6），3．75（3H，s，－OCH3）；13C－NMR（DMSO－d6，100 MHz）δ：119．2（C－1），108．5（C－2，6），145．5（C－3，5），138．4（C－4），166．3（－COOH）。

2.6 化合物6 3-羥基-4-甲氧基苯甲酸,為白色固體粉末。ESI－MS m/z：169［M＋H］＋。1H－NMR（DMSO－d6，400 MHz）δ：7．45（1H，dd，J＝8．4，2．0 Hz，H－6），7．44（1H，d，J＝2．0 Hz，H－2），6．85（1H，d，J＝8．4 Hz，H－5），3．81（3H，s，OCH3）；13C－NMR（DMSO－d6，100 MHz）δ：121．6（C－1），115．0（C－2），147．2（C－3），151．0（C－4），112．6（C－5），123．4（C－6），55．5（－OCH3），167．2（－COOH）。

2.7 化合物7 苯甲醇，為白色固體粉末。ESI－MS m/z：109［M＋H］＋。1H－NMR（CD3OD，400 MHz）δ：7．33（2H，d，J＝8．4 Hz，H－2，6），7．30（2H，d，J＝8．4 Hz，H－3，5），7．22（1H，m，H－4），4．59（2H，s）；13C－NMR（CD3OD，100 MHz）δ：142．7（C－1），129．4（C－2，6），128．0（C－3，5），128．3（C－4），65．2（C－7）。

2.8 化合物8 阿魏酸，為白色固體粉末。ESI－MS m/z 195［M＋H］＋，1H-NMR（DMSO－d6，400 MHz），7．49（1H，d，J＝16．0 Hz，H－7），7．28（1H，br s，H－2），7．08（1H，br d，J＝8．4 Hz，H－6），6．79（1H，d，J＝8．4 Hz，H－5），6．37（1H，d，J＝16．0 Hz，H－8），3．82（3H，s，OCH3）；13C－NMR（DMSO－d6，100 MHz）δ：115．6（C－1），111．1（C－2），147．9（C－3），149．0（C－4），125．7（C－5），122．8（C－6），144．5（C－7），115．5（C－8），55．6（－OCH3），168．0（－COOH）。

2.9 化合物9 對羥基肉桂酸，為白色固體粉末。ESI－MS m/z 165［M＋H］＋，1H-NMR（DMSO－d6，400 MHz），7．44（2H，d，J＝8．8 Hz，H－2，6），7．36（1H，d，J＝16．0 Hz，H－7），6．78（2H，d，J＝8．8 Hz，H－3，5），6．27（1H，d，J＝16．0 Hz，H－8）；13C－NMR（DMSO－d6，100MHz）δ：125．7（C－1），129．5（C－2，6），118．5（C－3，5），159．2（C－4），141．7（C－7），115．7（C－8），169．0（C－9）。

2.10 化合物10 棉黃素－7－O－（3″－O－β－D－葡萄糖基）－α－L－鼠李糖苷，為黃色固體粉末。ESI－MSm/z：625[M－H]－。1H－NMR（DMSO－d6，400 MHz）δ：6．53（1H，s，H－6），6．85（1H，d，J＝8．8 Hz，H－3′），7．72（1H，d，J＝2．0 Hz，H－6′），4．44（1H，d，J＝7．6 Hz，葡萄糖端基氫），5．47（1H，br s，鼠李糖端基氫），1．07（3H，d，J＝7．6 Hz，鼠李糖甲基），3．56－4．12（4H，鼠李糖），3．03－3．60（6H，葡萄糖）；13C－NMR（DMSO－d6，100 MHz）δ：147．4（C－2），135．9（C－3），176．3（C－4），151．5（C－5），98．3（C－6），149．5（C－7），127．2（C－8），144．4（C－9），104．7（C－10），122．1（C－1′），120．3（C－2′），115．5（C－3′），147．9（C－4′），145．0（C－5′），115．5（C－6′），99．2（C－1″），68．9（C－2″），80．8（C－3″），70．4（C－4″），69．4（C－5″），17．8（C－6″），104．4（C－1?），74．0（C－2?），76．8（C－3?），69．8（C－4?），76．2（C－5?），60．9（C－6?）。

3 討論

本文運用硅膠、凝膠柱色譜及半制備液相色譜等方法，對四川產地的大株紅景天進行化學成分提取、分離和純化，并通過核磁共振波譜、質譜等方法，鑒定化合物的結構。結果表明，從大株紅景天中分離得到10個化合物，1H-NMR和13C-NMR數據與文獻報道一致，依次鑒定為lotaustralin（1）[7]、丁基葡萄糖苷（2）[8]、沒食子酸（3）[9]、3-甲氧基沒食子酸（4）[10]、沒食子酸甲酯（5）[11]、3-羥基-4-甲氧基苯甲酸（6）[12]、苯甲醇（7）[13]、阿魏酸（8）[14]、對羥基肉桂酸（9）[15]、棉黃素-7-O-（3″-O-β-D-葡萄糖基)-α-L-鼠李糖苷（10）[16]。其中化合物2、6為首次從該屬植物中分離得到，化合物1、5、8、9、10為首次從該種植物中分離得到。目前國內外對紅景天的化學成分、藥理及臨床的研究都有一定進展，研究發現紅景天其有效成分在抗腫瘤、抗缺氧、增強記憶力、抗衰老、抗輻射等方面有作用，且療效顯著、不良反應少，具有很大的藥用價值。該研究進一步豐富了紅景天的化學成分研究內容，其藥理作用還有待深入研究。

[1] 谷燕莉，陳玉婷.藥用紅景天初考-兼與《中國藥典》商榷[J].中國中藥雜志，2004，29（9）:929

[2]黃鈺芳.紅景天活性成分及藥理作用[J].中醫藥臨床雜志，2008, 20（5）:528

[3] Spasov A A,Wikman G K,Mandrikov V B,et al.A double-blind, placebo-controlled pilot study of the stimulating and adaptogenic effect of Rhodiola rosea SHR-5 extract on the fatigue of students caused by stress during an examination period with a repeated lowdose regimen[J].Phytomedicine,2000,7(2):85[4]羅定強，趙翔宇，王軍憲.小叢紅景天化學成分研究[J].中藥材，2005，28（2）:98

[5] Lee M W,Lee Y A,Park H M,et al.Antioxidative phenolic compounds from the roots of Rhodiola sachalinensis A.Bor[J].Arch Pharm Res,2000,23（5）:455

[6] Nakamura S,Li X Z,Matsuda H,et al.Chemical structures of acyclic alcohol glycosides from the roots of Rhodiola crenulata[J]. Chem Pharm Bull,2008,56（4）:536

[7] Yurdanur A,Daneel F,Ehab A,et al.Lotaustralin from Rhodiola rosea roots[J].Fitoterapia,2004,75（6）:612

[8] Sigurskjold B W,Haunstrup I,Bock K.Hydrolysis of substrate analogues catalysed by beta-D-glucosidase from Aspergiuus niger. PartⅢ.Alkylandarylbeta-D-glucopyranosides[J].ActaChemAcand, 1992,46（10）:451

[9]陳紀軍，陳金素，陳泅英，等.德欽紅景天的化學成分[J].云南植物研究，1999,21（4）:525

[10]Liu B M,Chen R G,Cai Q L.Preliminary study on the chemical constituents of Glochidion ericarpum Champ[J].Guangxi J Tradit Chin Med,2000,23（40）:52

[11]舒希凱.芍藥花抗氧化活性成分的分離與鑒定[D].山東:山東師范大學，2013.

[12]DingHY,LinHC,TengCM,etal.Phytochemicalandpharmacological studies on Chinese Paeonia Species[J].J Agric Food Chem,2000,47（2）:381

[13]張忠立，左月明，羅光明，等.梔子化學成分研究[J].中藥材，2013,36（3）:401

[14]Xiao H,Parkin K.Isolation and identification of phase II enzymeinducing agents from Nonpolar Extracts of Green Onion(Allium spp.)[J].J Agric Food Chem,2006,54（22）:8417

[15]Bai N S,He K,Roller M,et al.Flavonolignans and other constituents from Lepidium meyenii with activities in anti-inflammation and humancancercelllines[J].JAgricFoodChem,2015,63（9）:2458

[16]H ussein S A,Hashem A N,Seliem M A,et al.Polyoxygenated flavonoids from Eugenia edulis[J].Phytochemistry,2003,64（4）: 883

（2015－09－15收稿）

Studies on chemical constituents from Rhodiola wallichiana

ZHAO Na1,ZHAO Guo-hua2,WANG Ren-jiu2,CAO Ming-guang2,WU Hai-bo2,CHAI Ya-qing1,TANG Sheng-an1,DUAN Hong-quan1
（1.School of Pharmacy,Tianjin Medical University,Tianjin Key Laboratory on Technologies Enabling Development of Clinical Therapeutics and Diagnostics(Theranostics),Tianjin 300070,China;2.Tonghua Yusheng Medicine Co.,Ltd.Tonghua 134000,China; 3.Research Center of Basic Medical Sciences,Tianjin Medical University,Tianjin 300070,China）

Objective：To study the chemical constituents from Rhodiola wallichiana.Methods：Chemical constituents were isolated and purified by repeated column chromatography(silica gel,Toyopearl HW-40C and preparative HPLC).Their structures were elucidated on the basis of spectral data analysis.Results：Ten compounds(1-10)were isolated and their structures were identified by comparing their spectral data with literature values as follows:lotaustralin(1),sec-butyl-O-β-D-glycosidase(2),trihydroxybenzoic acid(3),3-methoxytrihydroxybenzoic acid(4),methyl gallate(5),3-hydroxy-4-methoxy-benzoic acid(6),benzyl alcohol(7),ferulic acid(8),4-Hydroxycinnamic acid(9),gossypetin-7-O-(3″-O-β-D-glucosyl)-α-L-rhamnoside(10).Conclusion：Compound 2 and 6 are isolated from the genus Rhodiola for the first time,compound 1,5,8,9 and 10 are isolated from this plant for the first time.

Rhodiola;Rhodiola wallichiana;chemical constituents;structure identification

R9

A

1006－8147（2016）02-0119-03

趙娜(1990-)，女，碩士在讀，研究方向：天然活性化學成分研究；通信作者：段宏泉，E-mail:duanhq@tijmu.edu.cn。