IgG在特發性膜性腎病中的表達研究

尹保杰+朱濤+李志民等

【摘要】 目的 分析免疫球蛋白G（IgG）在特發性膜性腎病（IMN）中的表達， 并評估IgG4與特發性膜性腎病24 h尿蛋白、血清白蛋白（ALB）等的關系。方法 97例經腎活檢證實的IMN患者， 應用免疫組化法檢測腎組織IgG， 分析IgG表達， 并對IgG4與IMN患者血清白蛋白、 24 h尿蛋白量、血清總膽固醇等指標的關系進行分析。結果 97例IMN患者中IgG4表達陽性率最高為95.9%， 其后依次為IgG1、IgG2、IgG3， 陽性率分別為61.9%、24.7%、16.5%。IgG4含量（+）組、（2+）組、（3+）組24 h尿蛋白含量分別為（1.53±0.87）、（2.75±1.12）、（6.84±2.01）g/L；血清白蛋白含量分別為（28.54±1.56）、（24.13±1.20）、（20.22±0.97）g/L。IgG4 （+）組與（2+）組、（2+）與（3+）組24 h尿蛋白比較， 差異均有統計學意義（P<0.05）；血清白蛋白差異也均有統計學意義（P<0.05）。結論 IMN患者病理組織IgG4表達陽性率最高， 其次為IgG1；IgG4表達強度與IMN患者24 h尿蛋白量、血清白蛋白存在一定關系， 提示IgG4可能在IMN的發病中起了重要作用， 并與IMN患者的嚴重程度相關。

【關鍵詞】 特發性膜性腎病；免疫球蛋白G4相關性膜性腎病；免疫球蛋白G4相關性疾病；抗磷脂酶A2抗體

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2016.14.028

膜性腎病（MN）屬于原發性腎小球疾病的一種， 是以腎小球基底膜上皮細胞下原位免疫復合物的沉積并伴腎小球基底膜彌漫性增厚為病理特征的一組疾病。MN分為特發性膜性腎病及繼發性膜性腎病兩大類[1]。特發性膜性腎病的發病機制尚不十分清楚， 目前認為其可能與自身免疫性反應有關， 好發于 50～60歲中老年人， 我國IMN占原發性腎病綜合征（NS）的25%～30%[2]。盡管有1/3的IMN患者能夠自行緩解， 但仍有1/3～1/2的患者逐漸進展為終末期腎病[2]。IgG 是血液和胞外液中的主要抗體成分， 發揮著重要免疫學效應， 如調理抗體依賴性細胞介導的細胞毒作用（ADCC）及抗感染作用等， IgG 按重鏈氨基酸的不同分為 IgG1、IgG2、IgG3、IgG4 四個亞類， 以往的研究表明IgG4在炎性腸疾病、橋本甲狀腺炎等疾病中表達并參與其發病[3， 4]， 并且聯合病變組織IgG4陽性漿細胞和血清IgG4的表達可以把部分炎性腸疾病、橋本氏甲狀腺炎歸為IgG4-相關性疾病（IgG4-RD）， 成為同類疾病的一個新的亞型。關于IgG在膜性腎病中的表達情況， 以往研究[3]證實在IMN中IgG4有較高的表達率， 本文也著重分析了我國IMN患者腎組織IgG的表達， 同時也對IgG4表達強度與IMN患者24 h尿蛋白及 血清白蛋白等指標關系進行分析。現報告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 選取2013年12月～2015年5月在本院腎臟內科經腎臟病理證實的特發性膜性腎病患者97例， 其中男63例， 女34例， 平均年齡（48.3±16.1）歲， 所有患者均排除肝炎、腫瘤、系統性紅斑狼瘡等疾病， 并且所有患者均知情同意。

1. 2 方法

1. 2. 1 臨床資料 血清總蛋白、尿素、肌酐、24 h尿蛋白等。

1. 2. 2 標本采集 所有患者于清晨空腹抽取靜脈血， 3500 r/min， 10 min 分離血清， 存放于-20℃冰箱。收集患者24 h尿液。

1. 2. 3 操作方法 所有腎穿刺病理標本處理后分別行免疫熒光（IgG、lgA、IgM、C3）、光學顯微鏡（HE、PAS、Masson 及PASM 染色）檢查， 所有標本直接免疫組化染色， 觀察IgG1、IgG2、IgG3、IgG4分布情況， 第一抗體分別為小鼠抗人IgG1、IgG2、IgG3、IgG4 單克隆抗體， Sigma 公司（1∶500）。用PBS 代替第一抗體進行染色作陰性對照。

1. 2. 4 相關生化指標的檢測 羅氏cobas-P8000全自動生化分析儀完成肌酐（CREA）、尿素氮（BUN）、ALB、24 h尿蛋白的檢測。BUN、CREA檢測采用酶法， ALB檢測采用溴甲酚綠法， 尿蛋白檢測采用比色法。

1. 3 統計學方法 采用SPSS19.0統計學軟件處理數據。計量資料以均數±標準差（ x-±s）表示， 采用t檢驗；計數資料以率（%）表示， 非正態分布以中位數表示， 三組間比較采用 Kruskal-Wallis檢驗， 兩兩比較采用Bonferroni法。P<0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

97例IMN患者中IgG1、IgG2、IgG3、IgG4表達陽性率分別為61.9%、24.7%、16.5%、95.9%， IgG4含量（+）組、（2+）組、（3+）組24 h尿蛋白含量分別為（1.53±0.87）、（2.75±1.12）、（6.84±2.01）g/L；血清白蛋白含量分別為（28.54±1.56）、（24.13±1.20）、（20.22±0.97）g/L。IgG4（+）組與（2+）組、（2+）與（3+）組24 h尿蛋白差異均有統計學意義（P<0.05）；血清白蛋白差異也均有統計學意義（P<0.05）。

3 討論

本研究結果同以往的研究一致， 顯示IgG4在IMN患者腎組織中高表達， 且表達強度與患者的病情相關， 這提示IgG4在特發性膜性腎病的發病中可能起了重要作用。而近期關于IgG4相關性疾病的研究也成為了研究的熱點， 它是一種新近認識的以多器官損害為特點的疾病， 可累及肝臟、胰腺、腎臟等多個器官， 其中累及腎臟就稱之為IgG4-RKD， 包括IgG4相關膜性腎病、IgG4相關小管間質性腎病等， 其診斷標準為[4]：免疫組化≥10個IgG4陽性細胞/高倍視野； 血清 IgG4≥1.35 g/L， 同時滿足兩項可以認為是IgG4-RD。特發性模性腎病能否看成IgG4-MN的一種， 目前少量的研究認為IgG4-MN傾向于繼發性膜性腎病[5]， 但IgG4-MN最終能否歸為繼發性膜性腎病的一種， 仍需大量的研究來證實， 因為IgG4-MN也有可能成為特發性膜性腎病一種特殊的亞型， 這對膜性腎病的分類及治療可能有新的指導意義。由于本研究未對特發性膜性腎病進行血清學IgG4的檢測， 因此也無法用上述診斷標準對97例IMN患者進行評估并判斷有多少例IMN可以判定為IgG4-RD， 如果有IMN患者符合上述診斷標準， 可以對其臨床資料、病情、預后等情況與正常特發性膜性腎病進行分析， 并觀察他們在治療、預后等方面的情況， 這將成為以后工作的重點。

參考文獻

[1]王擁濤， 許清玉， 郭明好， 等. 919例腎活檢資料流行病學分析. 中國中西醫結合腎病雜志， 2010， 11（3）：232-234.

[2]劉志紅. 膜性腎病的治療.腎臟病與透析腎移植雜志， 2009， 18（4）：353-355.

[3]黃勤， 鄒曉平. IgG4相關的自身免疫性胰腺炎的診斷. 中華消化內鏡雜志， 2013， 30（6）：301-303.

[4]李亞瓊.橋本氏甲狀腺炎與IgG4相關性疾病有關的臨床病理學特征的相關研究 .山東大學， 2012.

[5]管音， 李航. 自身抗原、抗體與IgG亞型在膜性腎病中的意義. 中華腎臟病雜志， 2014， 30（8）：634-638.

[收稿日期：2015-11-18]