PLGA-TPGS負載α-TIF-siRNA納米粒對皰疹病毒1的抑制作用

楊成明　王可斌

·論著·

PLGA-TPGS負載α-TIF-siRNA納米粒對皰疹病毒1的抑制作用

楊成明王可斌

【摘要】目的研究以PLGA-TPGS生物可降解材料為載體包載α-TIF-siRNA的納米粒對HSV1的抑制作用。方法以PLGA-TPGS為載體，采用雙乳蒸發法制備包載α-TIF-siRNA的PLGA-TPGS納米粒(命名為PLGA-TPGS/α-TIF-siRNA NPs)，并對其進行表征，包括粒徑大小、zeta電位、包封率和釋放率，用MTT法檢測納米粒對上皮細胞和HeLa細胞的細胞毒作用，免疫熒光觀察納米粒在細胞內的釋放，用空斑實驗研究體外研究納米粒對HSV1病毒的抑制作用。結果PLGA-TPGS/α-TIF-siRNA NPs的粒徑大小為(257±2.94) nm，zeta電位為(－31.25±1.70) mV，siRNA的包封率為(56.23±3.68)%，納米釋放siRNA呈雙相，即在96 h釋放達到50%，之后呈緩慢釋放，用MTT法分析PLGA-TPGS/α-TIF-siRNA NPs對原代角質形成細胞和HeLa細胞幾乎無細胞毒性。熒光顯微鏡能觀察納米粒siRNA細胞內釋放。PLGA-TPGS/α-TIF-siRNA NPs能明顯延長抑制感染HeLa細胞的HSV1。結論PLGA-TPGS納米粒可以作siRNA的載體。PLGA-TPGS/α-TIF-siRNA NPs在體外對HSV1病毒具有明顯的抑制作用，可以成為治療HSV1-誘導的角膜炎在內的相關疾病的候選藥物。

【關鍵詞】單純皰疹病毒1(HSV1);α基因反式誘導因子(α-TIF);納米粒，siRNA

項目來源:廣東省醫學科研基金項目(編號:A2013616);廣東省深圳市創新委知識創新計劃項目(編號:JCY20130327094102249，JCY20140411091643396)

單純皰疹病毒1(HSV1)是雙鏈DNA病毒，是一種重要的病原體，常導致慢性感染、潛伏感染，在一定條件下重新激活而復發。HSV1感染可引起不同臨床癥狀，包括無癥狀的感染、唇皰疹、角膜炎等。HSV1感染是致盲的重要原因。在HSV1感染細胞中，極早(IE或α)基因表達被α基因反式誘導因子(alphagene trans-inducing factor，α-TIF)反式激活［1－3］。HSV-αTIF含2個不同的原件:一個和Oct-1和CFF結合，有助于結合TAATGARAT基序，另一個則被賦予轉錄激活。由于HSV1的感染反復發作，現有的核苷類藥物常常產生藥物耐受，因此，尋求新的治療方法非常必要。……