分析HBsAg與抗-HBs雙陽患者血清模式與HBV DNA載量的臨床意義

蔣莉 陳春華 濮翔科

分析HBsAg與抗-HBs雙陽患者血清模式與HBV DNA載量的臨床意義

蔣莉 陳春華 濮翔科

目的 探討乙型肝炎病毒（HBV）感染者乙型肝炎表面抗原（HBsAg）與乙型肝炎表面抗體（抗-HBs）同時陽性的血清學模式的基因變異與HBV DNA的關系并探究其原因及臨床意義。方法 乙肝HBV血清學標志物五項指標(HBsAg、HBsAb、HBcAb、HBeAg、HBeAb)采用時間分辨法定量測定，HBV DNA含量的檢測采用實時熒光定量聚合酶鏈反應(FQ-PCR)。結果 本研究入選的50例HBsAg與抗HBs雙陽患者血清中共出現4種HBV血清學模式:(Ⅰ) HBsAg、抗-HBs、抗-HBe、抗-HBc陽性模式占42.0%，HBV DNA陽性率占42.8%；(Ⅱ) HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBc陽性模式占32.0%，HBV DNA陽性率占70.5%；(Ⅲ)HBsAg、抗-HBs、抗-HBc陽性模式占24.0%，HBV DNA陽性率占25.0%；(Ⅳ)HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc陽性模式占2.0%，HBV DNA陽性率占100.0%。其中含有HBeAg陽性的Ⅱ、Ⅳ模式與Ⅰ、Ⅲ模式的HBV DNA陽性率分別作兩兩比較，差異均有統計學意義（P＜0.05）。結論 HBsAg與抗HBs雙陽患者血清中伴有HBeAg陽性者血清中HBV DNA載量最高，HBsAg與抗-HBs雙陽模式是免疫系統的個性化表現，應引起臨床的重視。

乙肝；表面抗原；表面抗體；乙肝病毒(HBV)；基因變異

診斷HBV感染的重要標志是患者感染了乙型肝炎表面抗原（HBsAg）。感染了乙型肝炎病毒（hepatitis B virus,HBV）的患者，可發生急、慢性乙型肝炎。乙型肝炎經過治療后數周有時HBsAg會轉陰，經過一段時間的窗口期血清內會出現乙型肝炎表面抗體（抗-HBs）。無癥狀HBV攜帶者和乙型肝炎患者均有可能會發生HBsAg和抗-HBs同時陽性的現象（簡稱雙陽現象）。經過治療HBV感染者和無癥狀HBV如果能完全清除病毒,那么HBsAg就會逐漸消失,自體血清中會逐漸產生抗-HBs，或在抗-HBs逐漸升高時HBsAg接近消失前,抗-HBs陽性意味著HBsAg可能已被清除,人體已產生了保護作用[1],患者均出現抗HBc陽性,有的患者出現HBeAg或抗HBe陽性，部分表現為血清中HBV DNA陽性，本研究旨在說明在當臨床檢驗測定HBV抗原-抗體標志物出現HBsAg與抗HBs雙陽性時，患者血清中伴有HBeAg陽性者血清中HBV DNA陽性率最高；伴有HBeAg陽性并伴有抗HBe陽性者HBV DNA陽性率次高，可能在藥物、抗病毒治療中或其他因素的作用下發生了基因突變。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2011年1月～2014年4月江蘇省常州市第三人民醫院收治乙肝HBsAg與抗-HBs雙陽性住院患者50例為研究對象，診斷符合標準[2],其中男20例，女30例，年齡25～78歲，平均(45.2±16.3)歲。

1.2 方法與儀器 HBV DNA熒光定量檢測儀器為美國應用生物公司ABI 7500基因擴增儀，由達安基因生物技術有限公司提供試劑盒，以IU/mL表示DNA的單位含量，檢測時102IU／mL作為判斷陽性。采用儀器為AD 1235全自動熒光免疫時間分辨儀，全自動時間分辨法，用定量測定的方法檢測HBsAg、HBsAb、HBcAb、HBeAg、HBeAb，由中山大學達安基因股份有限公司提供試劑盒。

1.3 結果判斷 HBsAg≥0.6 ng/mL為陽性；抗-HBs≥1 2 m I U/m L為陽性；H B e A g≥0.5 P E I U/m L為陽性；抗-HBe≥10 DRU/mL為陽性；抗-HBc≥0.1 DRU/mL為陽性；HBV DNA≥102IU/mL為陽性。

1.4 統計學方法 統計學分析采用SPSS 12.0軟件進行統計。計數資料用例數（n）表示，計數資料組間率（%）的比較采用χ2檢驗；以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

其中，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ模式分別占有42.0%、32.0%、24.0%、2.0%,含有HBeAg陽性的Ⅱ模式與Ⅰ、Ⅲ模式的HBV DNA陽性率分別作兩兩比較，差異有統計學意義（P＜0.05）；Ⅳ模式與Ⅰ、Ⅲ模式的HBV DNA陽性率分別作兩兩比較,差異有統計學意義（P＜0.05）。見表1。

表1 50例HBsAg和抗-HBs雙陽性患者HBV血清學模式和HBV DNA測定結果（陽性＋，陰性－）

3 討論

出現HBsAg和抗-HBs共存的現象是由于當HBV基因發生突變時，其編碼的氨基酸發生改變或影響蛋白翻譯后的修飾，導致HBsAg抗原性發生改變，突變后的抗原無法與原先產生的抗體結合。HBV感染的特異性指標就是表現為患者血清HBsAg陽性，HBsAb的產生是由HBsAg暴露的抗原決定簇刺激機體產生的一種特異性保護抗體，一般在HBV感染機體使用了藥物等至HBsAg消失后或健康帶病毒者注射乙肝疫苗后出現陽性，HBsAb是一種保護性抗體，是HBV感染后有免疫力及終止的標志，它能中和HBsAg，具有防御HBV感染的作用。理論上兩者是不會同時出現陽性，但我們在臨床實際檢測中確發現了有一些患者表現為兩者同時存在。據報道，國內采用酶免法，HBsAg與HBsAb同時檢出的病例約占總送檢標本的0.3%[3]，本研究顯示，在HBV感染者中，確實存在HBsAg與HBsAb同時陽性的現象，而且占有HBsAg陽性患者一定的比例。本研究中，血清學Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ模式的HBV DNA陽性率出現了42.8%、70.5%、25.0%和100.0%，HBsAg與抗HBs雙陽患者血清中有HBeAg陽性并伴有抗Hbe陽性的Ⅱ模式血清中HBV DNA陽性率70.5%，次于有HBeAg陽性并伴有抗HBe陰性的Ⅳ模式(HBV DNA陽性率100.0%)，機體感染HBV后產生抗-HBs，在機體的免疫壓力、藥物或其他因素的作用下HBV可發生基因突變。Ⅱ、Ⅳ模式分別與Ⅰ、Ⅲ模式相比較，差異有統計學意義（P＜0.05），說明有病毒復制和伴有基因突變，少數慢性乙型肝炎患者可出現HBsAg和抗-HBs陽性[4]；不同亞型HBV的感染,針對于免疫優勢表位“a”表位的抗體可對所有亞型HBV的感染提供保護性免疫，但其他亞型抗體并無交叉保護性[5]；感染過HBV或接種乙型肝炎疫苗后，雖有正常的HBsAb應答，由于機體的免疫力不同，仍能感染a決定簇變異的免疫逃逸病毒株，從而產生了HBsAg與HBsAb并存的現象；由于干擾素既能抑制病毒復制，又能調節宿主免疫，但由于s基因的變異，對于干擾素治療的慢性乙肝患者，在治療中雖出現會HBsAb血清轉換，也會出現不能將HBsAg清除[6]。本研究中有產生了抗HBe，使HBV DNA陽性率有所下降，如Ⅱ模式血清中HBV DNA陽性率70.5%，較Ⅳ模式(HBV DNA陽性率100.0%)有下降，因此目前臨床分析和判斷乙型肝炎患者病程和傳染性的重要指標是依靠乙型肝炎病毒血清免疫學標志檢查，乙型肝炎病毒血清免疫學檢測實際檢測的是人體對乙型肝炎病毒的免疫反應狀態[7]。檢測HBV DNA水平的臨床意義是可以反映體內HBV復制情況，是評價藥物抑制HBV效果的有效方法[8]。因此，HBsAb和HBsAg同時陽性，與HBV DNA載量相互關聯，是有多種原因引起的，是免疫系統的個性化表現，也是病毒基因變異、病毒復制的表現。實驗室檢測應盡量避免應檢測因素引起的誤差，進一步進行HBV基因測序，以確定HBV的基因變異，臨床治療過程中應注意抗病毒治療以后乙肝患者的基因突變。

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10.3969/j.issn.1009-4393.2016.17.027

江蘇 213001 江蘇省常州市第三人民醫院檢驗科 （蔣莉 陳春華濮翔科）

陳春華 E-mail:cchczsy@126.com