Myd88在狼瘡性腎炎患者血清組織中的表達及意義

趙彥叢

(邯鄲市涉縣醫院 輸血科,河北 邯鄲056400)

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Myd88在狼瘡性腎炎患者血清組織中的表達及意義

趙彥叢

(邯鄲市涉縣醫院 輸血科,河北 邯鄲056400)

狼瘡性腎炎對系統性紅斑狼瘡(SLE)的預后影響較大,導致的腎功能衰竭是該病主要死亡原因之一。已有報道[1]發現Toll受體在該病免疫應答過程中起著重要作用，人髓樣分化因子88(Myd88)是該信號通路中接頭蛋白，調控著信號的轉導，Myd88在免疫應答中具有非常重要的作用。本研究通過檢測Myd88在狼瘡性腎炎患者血清組織中表達，對其臨床意義進行了分析，現報道如下。

1資料與方法

1.1臨床資料

2014年2月-2015年2月64例狼瘡性腎炎患者為觀察對象，根據SLEDAI評分分成2組，A組非活動期32例，男3例，女29例，年齡18-46歲，平均(30.8±6.4)歲，病程1個月-6年，平均(1.4±1.2)年，B組活動期32例，男2例，女30例，年齡19-48歲，平均(31.2±6.2)歲，病程3個月-8年，平均(1.6±1.3)年，排除合并感染、腫瘤和其他自身免疫性疾病。32名健康志愿者作對照組，男4例，女28例，年齡20-45歲，平均(29.8±5.8)歲，3組的性別、年齡等資料比較無顯著差異(P>0.05)，具可比性。

1.2診斷標準

狼瘡性腎炎的診斷標準[3]：①尿蛋白定量>0、>5g/d或>4mg/(kg.h)；②尿紅細胞>5g/HPF(離心尿檢)；③腎功能出現異常；④腎活檢異常；4項中具備任1項即符合狼瘡性腎炎。

1.3免疫組化法檢測組織Myd88表達制作腎組織切片：經皮腎穿刺活檢取得腎組織，福爾馬林緩沖劑固定，梯度酒精脫水，浸蠟包埋，切片，溫水展開，置于多聚賴氨酸防脫載玻片，溫箱烤干，待染色。免疫組化染色按試劑盒說明書操作。每張切片選3個高倍視野觀察。將檢測結果同腎臟病理活動指數、系統性紅斑狼瘡疾病活動度評分(SLEDAI)評分和24 h尿蛋白定量進行比對，Spearman相關檢驗分析相關性。

1.4統計學分析

2結果

A組、B組Myd88陽性表達率25.0%、53.1%，對照組陽性表達率為0，組間比較差異具統計學意義(P<0.05)，見表1；B組的腎臟病理活動指數、SLEDAI評分和24h尿蛋白定量均明顯高于A組，Myd88同上述腎臟功能性指標呈正相關性，見表2。

表1　3組的Myd88免疫組化分析結果

注：組間免疫組化評分比較：A、B組明顯高于對照組，t=8，24，P<0.01；B組明顯高于A組，t=16，P<0.01.組間陽性表達率比較：A、B組明顯高于對照組χ2=9.14，23.2，P=0.003，<0.01；B組明顯高于A組，χ2=5.3，P=0.02

表2　　　Myd88同腎臟病理活動指數、SLEDAI評分和

3討論

系統性紅斑狼瘡是常見自身免疫疾病，流行病學調查顯示我國該病患病率為0.007%，以育齡女性居多。多數學者[2,3]認為狼瘡性腎炎是一種免疫復合物介導性腎炎，自身反應性T、B淋巴細胞高度活化、多種細胞因子的相互作用、免疫復合物的形成與沉著等是腎損害發生的主要機制。系統性紅斑狼瘡通過免疫復合物沉積等途徑造成多個系統和器官的損害，狼瘡性腎炎嚴重影響預后。

Toll樣受體信號通路在自身免疫應答中起重要作用，該受體通過識別病原相關分子模式誘導免疫效應分子表達，激活多種前炎性因子參與抗感染過程[4,5]。該受體同特異性配體結合后可刺激如IL-6、IL-12和TNF-a等細胞因子表達，從而對免疫細胞進行調控，其同自身免疫性疾病相關性受到廣泛關注。Myd88是該信號通路中的重要蛋白，參與傳遞多種不同受體的活化信號，實驗發現該蛋白參與促炎癥細胞因子IL-6的調節[6]。本研究通過免疫組化法檢測狼瘡性腎炎患者血清組織中Myd88的表達水平，并將檢測結果同疾病活動度進行了相關性分析。表明活動期和非活動期的狼瘡性腎炎患者的Myd88陽性檢出率明顯高于健康志愿者，Myd88免疫組化評分均高于健康志愿者，說明狼瘡性腎炎患者血清組織Myd88處于高表達水平。Myd88被譽為TLR 信號通路的“瓶頸”，TLR/Myd88 信號通路被證實和自身免疫性疾病存在密切關聯。TLR通路信號由 Myd88 傳導，最終激活下游轉錄因子，其中包括NF-κB、IRF 3、2中轉錄因子上調機體防御蛋白和促炎癥因子TNF-α、IL-6、IL-12、INF-β的表達，該通路是多調節功能傳導通路，在免疫炎癥反應中發揮重要作用。一般來說，正常人炎癥因子處于平衡狀態，狼瘡性腎炎患者炎癥因子多，可能和Myd88表達增多有關。腎臟病理活動指數、SLEDAI評分和24 h尿蛋白定量均是腎臟損害程度的反映指標，通過分析Myd88同上述指標關聯性發現活動期狼瘡性腎炎腎臟病理活動指數、SLEDAI評分和24 h尿蛋白定量明顯高于非活動期，活動期患者Myd88表達量和陽性率明顯高于非活動期，Myd88表達量同腎臟病理活動指數、SLEDAI評分和24 h尿蛋白定量呈正相關。Myd88高水平表達可能促使炎癥因子表達，一定程度的反映腎功能損害程度，對該病臨床預后有重要指導意義。通過上述分析可以看出接頭蛋白 Myd88同自身免疫性疾病間存在關聯，筆者認為該蛋白不僅可以用于指導疾病治療效果，還可以將其作為疾病干預治療靶點，用RNA 干擾、基因敲除、靶點化合物治療等方式來調節Myd88表達。增強 Myd88 信號可用來提高疫苗效能、提高病毒載體介導基因治療效果等[7]，而削弱 Myd88 信號有益于自身免疫性疾病和某些炎性疾病的的治療。

參考文獻：

[1]Wenzel J,Held C,Palmisano R,et al.Measurement of TLR-induced macrophage spreading by automated image analysis:Differential role of Myd88 and MAPK in early and late responses[J].Front Physiol，2011,2(18):71.

[2]Chaudhary A,Ganguly K,Cabantous S,et al.The brucella TIR-like protein TcpB ineracts with the death domain of Myd88[J].Biochem Biophys Res Commun,2012,417(1):299.

[3]吳燕燕，王易.Toll樣受體信號通路中Myd88的研究進展[J].免疫學雜志，2012,28(3):262.

[4] 章烈，李園，周總光.髓樣分化因子 88 的研究進展：把握 TLR 信號通路中的瓶頸[J].中國普外基礎與臨床雜志，2013,20(6):685.

[5]Li W,Liu HD,You WC,et al.Enhanced cortical expression of myeloid differentiation primary response protein 88(Myd88) in patients with traumatic brain injury[J].J Surg Res，2013,180(1):133.

[6]李佩宏，李文奇.IgA腎病患者尿蛋白和血管內皮生長因子的相關性研究[J].重慶醫學，2014,12(8)：918.

[7]陶于洪,羅秋紅.Toll 樣受體與腎臟疾病研究進展[J].實用兒科雜志,2012,27(17):1362.

免疫組化結果判定：細胞核或細胞質中出現棕黃色顆粒提示陽性細胞，判讀時參考如下標準：①陽性細胞百分比<1%計0分，1%-10%計1分，10%-30%計2分，30%-60%計3分，60%以上計4分；②陽性細胞染色強度：無黃色顆粒計0分，淡黃色計1分。黃色計2分，棕黃色計3分。免疫組化評分為2項評分結果之和，0-2分為陰性3-7分為陽性。

文章編號：1007-4287(2016)05-0806-02

(收稿日期：2015-08-11)